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[成果] 1800260113 云南
[R85, S85] 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2018
成果简介:猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是猪的一种病毒性传染病。该病自2006年夏天暴发以来,现已波及整个中国,对中国养猪业造成了重大危害。云南省多个地区也暴发了该病,造成了巨大经济损失。针对这一严峻形势,项目组早期启动了云南省"高致病性猪蓝耳病"相关研究,阐明了云南省PRRS的流行情况,揭示了毒株变异规律,建立了快速有效的检测方法,研发了侯选治疗药物,并提出PRRS防控理论与技术体系,为有效防控云南省PRRS作出了重大贡献。主要创新点如下: 1.首次分离获得云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株,建立病毒库,揭示云南流行毒株的遗传进化关系,阐明PRRS流行特点,制定PRRS防控关键技术体系。2006~2016年期间,课题组分离鉴定云南省PRRSV地方流行毒株23株,开展生物学特性鉴定和分子背景分析,建立病毒库;完成代表毒株全基因组及61株ORF5和Nsp2基因的序列测定,建立基因储备库;建立可分别鉴定欧洲型和美洲型、美洲型经典毒株和高致病性毒株的RT-PCR方法,在313个猪场进行疫病预警和防治,检测1.22万头猪,阐明了云南省和四川省部分地区PRRS流行特点,发现大约1/3发病猪群与PRRSV感染有关;PRRSV和PCV-2(猪圆环病毒2型)混合感染占混合感染总数的59.13%,为疫病的早期预警和防治提供了关键技术支撑。 2.建立体外抗PRRSV药物评价方法,首次发现具有抗PRRSV活性的天然小分子化合物15种,为开发天然、环保的兽药奠定物质基础。基于体外药效评价方法,测定中草药提取物的毒性,体外抑制病毒增殖效果,综合评价中草药治疗PRRSV作用,结合关键基因比对选择疫苗、抗体监测优化免疫程序,建立添加抗病毒中药的"驯蓝-防蓝"防控技术体系。 3.首次设计合成具有抗PRRSV反义寡核苷酸3条,并进行锁核苷酸(LNA)修饰,获得毒性更低、效果更好的反义LNA-DNA新型核苷酸药物,能有效减轻病猪的临床症状和病理变化,为治疗PRRS新药研发做出新的尝试。 4.通过Mx1蛋白真核表达载体构建,阐明了Mx1蛋白能够体外抑制PRRSV的增殖,为抗病育种提供了新思路。该成果获发明专利4项;发表论文19篇,其中SCI收录8篇影响因子11.7;培养硕士9人,培训养殖从业人员2877人次。 项目所建立的技术体系在云南省10个地州和四川省攀枝花市推广应用,有效降低生猪死亡率,累计新增生猪出栏15万余头,新增销售额3.06亿元,新增利润0.91亿元,社会经济效益显著。成果评价专家一致认为该成果具有较强的创新性,为云南省生猪产业发展提供了有力的技术保障,综合效益显著,总体技术水平达到国内领先。
[成果] 1800260117 云南
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2018
成果简介:畜禽养殖是该省支柱产业,综合产值占农业总产值40%,对云南经济社会发展具有重要地位。该项目针对畜禽养殖产品生产、屠宰、流通环节药物残留检测及真伪识别关键技术支撑不足问题,研究建立了畜禽产品抗生素检测技术、兽药残留未知筛查与定量检测技术,以及商品掺假鉴定技术,构建了畜禽产品全链条质量安全检测技术体系。主要创新点如下: 一是创建了基于单线态氧介导发光原理、纳米金连锁识别原理的畜禽产品喹诺酮、氯霉素、四环素类抗生素快速检测新技术,检测灵敏度0.3-1.0 ug/kg,达到或超过串联质谱水平,氯霉素检测试剂盒灵敏度优于德国r-Biopharm公司试剂盒。采用电子顺磁共振技术研究了化学发光过程中自由基种类和变化,揭示了氟喹诺酮化学发光反应中激发态中间体转化历程和ONOOH氧化还原反应类型,首次阐明了Ce(IV)产生单线态氧介导化学发光机理。 二是创建了畜禽产品超痕量兽药多残留未知筛查及定量确证检测技术。首次合成了3种具有特异性、高选择性的药物残留磁性纳米分散固相萃取材料和1种青霉素分子印迹聚合物新材料,显著提高了药物残留富集净化能力,应用在牛奶中兽药残留检测灵敏度达到0.003-0.3 ug/L。创立了含酚羟基类雌激素硅烷化、磺酰化衍生检测新方法,检测灵敏度提高了10倍以上。构建了基于兽药精确质量及限量值峰高比例数据库,建立畜禽产品药物残留未知物筛查与精确定量检测技术,分析时间由13天缩小为4个小时,提高了检测效率,降低了检测成本,并形成了规范化的检测方法标准。 三是首次研制成功羊肉纯度检测试剂盒和RPA-胶体金检测试纸条,实现了肉类掺假鉴定的可视化。对5种常见的动物源成分进行扩增,筛选通用引物和特异性引物,基于重组酶聚合酶扩增法,研发的羊肉鉴别RPA-试纸条灵敏度达到10 ng,检测一个样品10 min内完成。研发的羊肉纯度检测试剂盒对羊肉掺假比例超过10%以上即可检出,方法变异系数低于3%。 项目在国内外主流期刊发表论文18篇(其中SCI收录8篇),获授权发明专利1件(受理4件),研发试剂盒/试纸条新产品4个,制定检测机构方法技术标准1项。在全国7个省区推广应用,近2年产生直接经济效益3182万元,快检技术在该省生猪屠宰场推广应用,保障了3万余头上市猪肉质量安全,产生间接效益1亿元以上,经济社会效益显著。经第三方专业科技成果评价机构组织专家评价,总体达到国际先进水平,羊肉RPA-胶体金试纸条技术达到国际领先水平。
[成果] 1700390045 青海
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:为了规范家畜棘球蚴病调查技术,尽快控制家畜棘球蚴病的危害,确保畜牧业生产健康、稳定的发展。本次制定家畜棘球蚴病流行病学调查及监测技术标准,可统一青海省家畜棘球蚴病流行病学调查的方法,指导省内家畜棘球蚴病的监测工作的开展,对控制和预报疫情,促进畜牧业健康发展;增加农牧民收入;使农牧业更加科学化、规模化、集约化发展具有重要意义。本规范规定了家畜棘球蚴病流行病学调查的内容、方法及监测技术等要求。本规范结合该省多年来对全省动物疫病流行病学调查、防控、疫病监测中掌握的第一手资料和经验,充分考虑到省内的现实情况,对家畜棘球蚴病流行病学调查、监测方法等提出了具体要求,内容科学实用、操作性强,为防治家畜棘球蚴病提供了技术支持。本规范针对家畜棘球蚴病流行病学调查及监测工作的各个环节,以相关标准、法律、文件、专业书籍和文献等为基础,结合青海省动物疫病预防控制中心多年来对全省动物疫病流行病学调查、防控、疫病监测中掌握的第一手资料和经验,充分考虑到省内的现实情况,对家畜棘球蚴病流行病学调查、监测方法、预警预报等提出了具体要求,以期提高该病的调查和防治水平和促进畜牧业生产健康发展。
[成果] 1700241099 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:H9亚型禽流感病毒不仅给中国的养禽业造成了极大经济损失,还可跨越宿主屏障直接感染人,对人类健康构成严重威胁。使用H9 亚型禽流感疫苗发挥了重要作用,但仍有H9 亚型禽流感呈地方性流行。在广西自然科学基金项目(2013GXNSFDA019015)的支持下,项目首次对广西不同地区、不同时间的不同家禽和野禽的H9亚型禽流感病毒进行病原学监测,分离纯化H9亚型禽流感病毒,并对H9亚型禽流感病毒进行全基因的序列测定及分析,筛选出免疫效力好且能抵御广西变异株攻击的H9亚型禽流感病毒灭活疫苗种毒株。技术原理及性能指标:采集不同品种家禽、野禽喉气管、泄殖腔棉拭子及组织样品,分离纯化了39株的 H9亚型禽流感病毒,并进行生物学特性的鉴定。 进行了26株 H9亚型禽流感病毒的全基因序列测定,分析并统计抗原性相关基因的变异情况,阐明了近年广西 H9亚型禽流感病毒的生态进化,建立了广西 H9亚型禽流感病毒流行毒株的全基因数据信息库。筛选出了能有效抵御变异毒株攻击的疫苗候选株病毒A/Chicken/Guangxi/CX/2013。发表论文10篇,其中SCI 收录论文2篇,核心期刊论文7篇。培养博士后1人,硕士研究生1人。申请国家发明专利5项,已授权2项。技术的创造性与先进性:筛选出了免疫效力好且能抵御广西变异株攻击的灭活疫苗种毒株A/Chicken/Guangxi/CX/2013。为有效控制广西 H9亚型禽流感的发生和流行提供了及时的理论依据,为广西养禽业的可持续发展及人民健康提供有力保障。技术的成熟程度,适用范围和安全性:课题技术已十分成熟,对人类和环境等安全无害。
[成果] 1700241100 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:项目来源与背景:广西养牛业发展十分迅速,拥有全国第5位的牛存栏量,其中水牛存栏量438万头,占全国水牛总数的五分之一,居全国之首,世界第二位。国内暂无牛病毒性腹泻病毒(BVDV)疫苗,在检测和防治BVDV方面十分薄弱,缺乏有效的快速检测方法,制约着养牛业的健康发展。该项目在广西自然科学家基金(2012GXNSFAA053074)的支持下,研究制备了BVDV NS3基因的单克隆抗体,并建立了BVDV抗原捕获ELISA检测方法。项目由广西壮族自治区兽医研究所承担完成。技术原理及性能指标:分离获得2株BVDV广西分离株,并完成其中一株的全基因测序。分离到2株BVDV广西分离株:GX4和GX6136,完成GX4株的全基因测工作,经鉴定GX4株为BVDV-1b亚型。制备了BVDV单克隆抗体。项目获得了能稳定分泌BVDV单克隆抗体的杂交瘤细胞:抗NS3蛋白杂交瘤细胞1株。对所获得的单克隆抗体进行纯化和鉴定,经鼠源单抗亚类鉴定试剂盒进行单克隆抗体的亚类鉴定,用秋水仙素法检测杂交瘤细胞的染色体,SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定单克隆抗体识别的抗原表位,所获得的单克隆抗体携带有识别BVDV的表位。建立了BVDV抗原捕获检测方法。该方法可用于区分野毒感染和疫苗免疫,为该区养牛业的健康发展提供技术保障。项目共发表论文6篇,其中5篇发表在国内核心期刊上,1篇发表在Genome Announcements。培养硕士研究生2名。技术的创造性与先进性:该课题中检测方法的成功研制,填补了国内外同类技术空白。技术的成熟程度,适用范围与安全性:该项目研制的技术已十分成熟,适用于BVDV的快速检测及其有效防控等,对人类和环境等安全无害。应用情况及存在的问题:该项目虽然完成了BVDV快速诊断技术的研究工作,但要将这些研究成果进一步推广,还需要投入大量的人力和资金,通过培训和提高人员防范BVDV的意识,加大对饲养场的防控和监测力度,特别是散养户的监测,这样才体现该研究的实在意义,最终净化牛群,确保养牛业的可持续健康发展。
[成果] 1700240548 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:该课题是由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心承担的科技攻关与新产品试剂项目,课题名称为“广西边境地区口蹄疫研究”,它是桂财教〔2007〕79号文件下达的广西科学研究与技术开发计划项目,合同编号为桂科攻0779001。口蹄疫具有发病迅速,感染性强,传播迅速、难于防治、补救措施少等特点,一旦暴发口蹄疫,只能屠宰和集体焚毁染病牲畜,动物及其产品就会受到严格的流通限制,经济损失巨大,后果不堪设想。为促进广西畜牧渔业健康发展,保障人体健康与生命安全,助农增收,维护社会稳定,十分有必要开展该课题研究。技术原理及性能指标:建立了通用型口蹄疫病毒的PCR诊断方法,具有很好的特异性和敏感性,为广西的口蹄疫检测和流行病学监测奠定了基础。国内外率先建立了能同时检测三种口蹄疫病毒的三重PCR检测方法,为口蹄疫病毒的准确快速检测提供了条件。成功获得了1株针对A型VP1基因的单克隆抗体,该抗体具有很高的特异性,与抗原反应性强,利用单克隆抗体,建立了口蹄疫A型的竞争ELISA检测方法。该研究采用重组PCR技术对O型口蹄疫VP1主要抗原位点进行体外表达,并建立口蹄疫O型竞争ELISA检测方法。对36159份动物血清样品进行了口蹄疫抗体检测(其中O型24853份,A型7711份,亚洲I型3595份);对24515份动物组织样品进行口蹄疫病毒检测(其中O型13397份,A型6746份,亚洲I型4372份)。掌握了该区第一手口蹄疫流行病学资料。首次发现口蹄疫O型耿马毒感染猪。利用课题建立的方法,快速诊断出广西首例口蹄疫亚洲I型疫情和广西首例口蹄疫A型疫情。首次进行了野生动物口蹄疫感染情况研究。采集了边境地区的野猪、野猫、蛇、竹鼠、麂子、刺猬、穿山甲、黄鼠狼、水獭、飞天鼠、狐狸、麝香猫、果子狸、野兔、旱獭、田鼠、杂狸、九香狸、松鼠和刺狸等野生动物组织和血清样品各674份,其中血清学采用液相阻断ELISA方法进行检测,结果显示:O型抗体阳性有10份,A型抗体阳性有8份,亚洲I型抗体阳性有10份;病原学用PCR方法检测,结果全部为阴性。对广西口蹄疫地方毒株的VP1基因进行了序列测定,系统性掌握了广西地区口蹄疫流行特点和遗传进化规律。完善了自治区、市、县级三级兽医实验室、边境动物疫情测报站疫情上报制度,建立了一套涵盖边境地区3市、23个县(区)、235个乡、2867个村屯的自治区、市、县、乡、村五级的完备的口蹄疫预警预报系统。通过人员培训,采用二维码耳标、移动智能识读器、SIM卡、IC卡,建立起了边境地区口蹄疫可追溯体系。制定广西重大动物疫病免疫操作技术规程地方标准。获得国家授权发明专利1项,培养硕士研究生2名;在国家核心期刊发表论文11篇。技术的创造性、先进性:该课题中口蹄疫A型VP1蛋白及其单抗的竞争ELISA方法的成功研制,填补了国内同类技术空白。技术的成熟程度,适用范围和安全性:课题技术已十分成熟,适用用口蹄疫的病原及抗体的快速诊断、流行病学监测、疫病防控等,对人类和环境等安全无害。
[成果] 1800120498 天津
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:危害养猪业的细菌性传染病主要包括猪肺疫(巴氏杆菌病)、猪传染性胸膜肺炎、大肠杆菌病、副猪嗜血杆菌病、猪副伤寒(沙门氏菌病)、猪丹毒、葡萄球菌病、链球菌病等。该项目拟建立上述疾病的快速鉴别诊断程序,进而完善养猪业细菌性传染病的早期监测及防控技术体系。开展对细菌性传染病建立及时、快捷和准确的检测方法和利用基因芯片技术对细菌性传染病进行敏感药物的筛选工作,可以使天津市在全国率先建立细菌性传染病的病原菌耐药谱系,从而为行政主管部门制定重大决策提供理论支持。技术创新点:(1)将猪病中细菌性传染病的检测作为研究内容,以细菌性传染病的临床症状为重点,以完善的实验室检测为依据,以商品化的技术作为补充,建立一整套与天津市沿海都市型农业定位相匹配的细菌性传染病早期监测及防控技术体系。(2)以“用于检测巴氏杆茵耐药性的基因芯片”为着眼点,以该技术为依托,建立其他细菌性传染病的敏感药物筛选体系。通过该项项目的实施,有望使天津市养猪业细菌性传染病的监测及防控技术走在全国的前列。
[成果] 1800120275 北京
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:生猪疫病是危害养猪业健康发展和人类公共卫生安全的主要因素,其防控有赖于及时准确地诊断和处置疫情。国内外率先将多重连接探针扩增技术应用于生猪疫病检测。在核酸检测中针对5种病原添加不同大小的指纹DNA片段,研发出同时检测5种猪病病毒的多重连接探针扩增技术,实现高通量快速筛查的目的,为生猪疫病的快速诊断、进出境猪及其产品的快速通关提供新技术。研制出6种实时荧光PCR试剂盒。针对猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病病毒和猪流感病毒,分别研制出实时荧光PCR(RT-PCR)试剂盒,实现了病毒的特异性快速检测;针对猪流感病毒主要亚型,分别研制出实时荧光RT-PCR试剂盒,解决了流感病毒亚型鉴别检测的关键问题。研制出口蹄疫病毒依赖解旋酶等温扩增试剂盒。突破了核酸检测技术难以现地使用的瓶颈,为养殖场和基层兽医实验室对不同亚型口蹄疫病毒的通用检测提供技术,确保疫情发生后在小的范围内得以诊断和处置。
[成果] 1800120298 北京
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:奶牛隐性乳房炎易感性监测体系;获得中国荷斯坦牛全基因组水平显著关联的乳房炎抗性SNPs标记及候选基因;建立奶牛乳房炎表观遗传分子检测技术平台,获得影响奶牛乳房炎及产奶性状的表观遗传标记或靶标基因。利用CD4基因启动子区DNA甲基化水平可将临床乳房炎牛与健康牛截然分为两个群体(如图),其中临床乳房炎牛的DNA甲基化水平比健康牛高出16%(P<0.01),且这种高甲基化显著抑制该基因的表达。结果表明,高甲基化的CD4基因启动子区可作为临床乳房炎牛的重要表观遗传标记。
[成果] 1800120303 北京
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:动物病原微生物、寄生虫等为研究对象,开展DNA条形码检测技术研究,并制订相应的检测技术规范、标准,构建相关病原微生物、寄生虫的实物标本库以及数字化标本库,为动物病原微生物DNA条形码检测技术平台的建立提供必需的数据信息。建立动物病原微生物、寄生虫实物标本库以及数字化标本库。蜱虫属种两级DNA条形码检测技术。动物重要内寄生虫DNA条形码检测技术。
[成果] 1800120342 甘肃
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:养羊业是中国畜牧业重要组成部分,也是少数民族地区的传统农业支柱产业之一。随着农村经济结构的调整和退牧还草政策的实施,养羊业生产方式逐渐从放牧散养到集约化规模化转变、养殖区域也从传统牧区向农区扩展,羊只引种、调运频繁,由山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体等支原体引起的羊支原体肺炎迅速流行,成为影响养羊业健康发展的重要疾病问题。该成果为解决这一生产实际问题,从2005年开始,历经10个项目的持续研发,完成了从流行病学调查、诊断技术与疫苗研究、配套整合及生产应用的全过程,形成了羊支原体肺炎系列新型疫苗、诊断试剂盒、技术标准和专利等集约式成果,提高了中国羊病防控技术水平,为中国现阶段养羊业健康发展、动物防疫技术标准化、畜产品进出口检疫和国际贸易争端解决提供了技术支撑。取得的主要成果有:获得国家新兽药证书5项,取得自主发明技术4项,制定国家标准2项、行业标准1项,获得甘肃省科技进步二等奖2项,发表论文27篇(含SCI论文9篇),编著著作2部。主要技术内容:(1)查清了中国羊支原体肺炎的优势病原:采用病原分离鉴定、分子检测和血清学方法查清了中国羊支原体肺炎的优势病原,包括山羊支原体山羊肺炎亚种、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种,且山羊支原体山羊肺炎亚种单一感染为主,绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种混合感染多见,原有国内仅有的组织灭活疫苗“山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗”是由单一的丝状支原体山羊亚种制备,对流行的3种优势病原不能提供有效保护,找到了免疫动物继续发病的症结,也为新疫苗研制指明了方向。同时发现了中国流行的山羊支原体山羊肺炎亚种菌株只有一个基因型,率先测定和注释了山羊支原体山羊肺炎亚种的全基因组,为诊断技术和新型疫苗靶标筛选提供了理论基础。(2)解决了病原支原体体外培养技术瓶颈:针对支原体难以培养的难题,对16种支原体培养基进行了筛选和配方优化,最终确定以丙酮酸钠作为碳源的MTB培养基,提高了支原体培养速度,使生长滴度在2~4天达到109ccu/mL,提高了病原分离率,为诊断技术和全菌灭活疫苗的研发提供了技术平台。(3)建立了系列快速诊断技术并开发了诊断试剂盒:通过对病原支原体16srRNA、arcD、Hsp70、H2等多个基因靶标的序列分析和比对,设计了12对普通PCR引物和4套环介导等温扩增PCR(LAMP)引物,建立了3种优势病原的特异性PCR检测技术和1种LAMP快速诊断技术,克服了传统的病原学检测方法中病原分离耗时、生化鉴定可靠性差的难题;通过对病原支原体膜蛋白、菌体蛋白、荚膜多糖和分泌多糖等多种抗原进行筛选,建立了针对3种优势病原抗体的IHA检测技术,其中,2种获得了新兽药证书,满足了生产实际中调运检疫和临床诊断的需要;研制了绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种抗体间接ELISA检测方法并获得了1种新兽药证书,提高了检测的敏感性,满足了实验室血清学诊断和疫苗免疫效果评价的需求。(4)针对中国优势病原及流行特点,创制了系列新型疫苗:针对3种流行优势病原及山羊支原体山羊肺炎亚种单一感染为主、绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种混合感染多见的流行病学特征,利用支原体体外培养技术,筛选了理想的制苗菌株,创制了羊支原体肺炎二联灭活疫苗(丝状支原体山羊亚种M8701株+绵羊肺炎支原体MoGH3-3株)、山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗(山羊支原体山羊肺炎亚种M1601株)两种新疫苗,获得了新兽药证书并实现了产业化生产。两种新疫苗产品均利用病原支原体纯培养物,经浓缩、纯化、适当配比并与油佐剂乳化后制备,实现了羊支原体肺炎疫苗的生产技术由组织灭活疫苗向全菌培养物疫苗的更新换代,解决了原有的疫苗不适应流行特点、不能全面提供免疫保护的问题,也避免了组织灭活疫苗使用活羊制苗的质量不可控风险,提升了中国羊支原体肺炎疫苗质量,带动了羊支原体肺炎疫苗产品的升级换代,满足了防疫需求。
[成果] 1800120521 河南
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:口蹄疫(FMD)、猪蓝耳病(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)等主要疫病严重危害畜牧业生产、公共卫生安全和对外贸易。该研究围绕以上4种疫病进行了多种高通量、快速鉴别诊断分子病原学和血清学检测方法研究;建立了鉴别FMDV通用和分型多重PCR/荧光定量PCR方法,鉴别不同致病力PRRSV多重PCR和荧光定量PCR方法,CSFV Nested-PCR和荧光定量PCR方法,鉴别PRV Gd/Ge基因复合PCR和荧光定量PCR方法;建立了检测FMDV(O)、PRRSV、CSFV和PRV的胶体金试纸条及ELISA方法等;为疫病净化监测和快速诊断提供了技术手段。根据以上4种疫病感染、流行及监测情况,研究、筛选了可有效防控其发生的疫苗和免疫程序。建立了规模猪场疫病风险评估模型,制定了风险评估防控技术规范。制定了规模化猪场生物安全技术规范,指导养殖企业落实生物安全防控措施,提升生物安全防护水平。围绕FMD、PRRS、CSF、PR等猪场主要疫病,建立了多种高通量、快速鉴别诊断分子病原学和血清学检测方法,用于4种疫病的净化监测和快速诊断。在FMD、PRRS、CSF、PR等4种疫病防控用疫苗的研究和筛选、抗体消长规律研究、免疫程序的优化等方面进行了创新性研究。在规模化猪场猪瘟风险评估模型的建立和规模化猪场生物安全技术规范制定方面进行了创新性研究。在FMD、PRRS、CSF、PR等4种疫病净化关键技术集成方案和净化评审标准的制定及其推广应用等方面进行了创新性研究。
[成果] 1700450533 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:广西水牛存栏437万头,是中国饲养水牛最多的省(区),奶牛存栏量也达到8.77万头,随着政府号召大力发展草食性动物,纯粹的肉牛养殖小区或养殖户也在迅速壮大。该项完成后可以建立一个快捷简便的牛支原体LAMP诊断技术,并在该区牛病诊治中进行应用。为快速制定科学的防控措施提供理论依据,必将大大降低该病感染率及死亡率,提高生产性能,促进养牛业的健康发展,为增加农民收入,发展和繁荣民族地区经济发挥积极的作用;为此,广西壮族自治区水产畜牧兽医局下达了科技项目《牛支原体肺炎快速诊断技术研发。》(桂渔牧科201528003),由广西壮族自治区兽医研究所承担实施,合同实施时间为2015年1月至2016年12月。技术原理:利用可视化LAMP实时浊度仪,建立一套拥有独立自主知识产权的快速、灵敏、准确检测牛支原体的环介导等温扩增技术(LAMP),该技术不同于以肉眼评判结果的常规LAMP方法,它根据反应液浊度的变化由仪器灵敏、准确地读取数据进行判断,该技术将为早期诊断和有效治疗牛支原体肺炎提供技术支持,为今后致病机制、疫苗研发以及综合防控牛支原体肺炎提供重要依据。完成项目合同的性能指标:项目通过LAMP引物设计,反应条件优化,以及特异性、敏感性和荧光可视化检测,建立了牛支原体LAMP快速诊断方法,其快速与敏感性优于PCR。申请国家发明专利“一种牛支原体环介导等温扩增试剂盒及其应用”(申请号201510095946.5),获受理。技术的创造性、先进性:技术关键:LAMP引物的设计和反应条件的优化。科技创新点:牛支原体LAMP检测方法为国内首创,已经申请国家发明专利,该方法敏感性高,特异性强,适合兽医基层应用,为增强该区防控牛支原体病工作提供有利的工具。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该项目经过2年的实施,成功建立一个快捷简便的牛支原体LAMP诊断技术,这种快捷、正确的检测方法可为广西乃至全国养牛业提供一种较为实用的牛支原体病检测技术,有助于有效预防牛支原体病的流行和爆发,由此可见,该课题所从事研究十分适合该区乃至中国养殖业发展的需求,其研究成果应用前景广阔,社会效益显著,具备良好的经济效益前景。应用情况及存在的问题:该项目验建立了检测牛支原体的LAMP技术,通过临床的样品检测,证明该技术可用于临床样品的检测,其检测效果比传统的PCR检测方法敏感性高100倍。要将这些研究成果进一步推广,并取得更大的经济和社会效益,在下一步工作中必须加大成果转化力度。历年获奖情况:无。
[成果] 1700450376 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:山羊痘是由山羊痘病毒(goatpox virus,GTPV)引起的一种急性、热性、接触性传染病,以病畜发热、全身性起痘、呼吸道和消化道损伤以及淋巴结肿大为特征。该病发病率和死亡率高,给养羊业造成重大损失。世界动物卫生组织(OIE)将山羊痘列为必须上报的动物疫病,中国也将其列为一类动物疫病,加以严格的控制。在前期研究中,该课题组已在体外条件下鉴定出多个山羊痘病毒毒力因子,为揭示羊痘病毒的致病和免疫调控机理从而研制更为安全、高效的基因工程活疫苗奠定基础,但上述因子在病毒感染致病中的作用及对病毒毒力的真实影响有赖于在动物体内加以验证。然而,操作山羊痘强毒株需在高等级生物安全实验室进行,而传统技术手段的敏感程度难以对基于弱毒疫苗株构建的重组毒株的致病力做出精确评价。为此,广西区科学技术厅下达了青年基金项目(滚动项目)《山羊痘病毒毒力基因及其缺失重组毒株动物体内评价技术的研究》(2013GXNSFBB053006),由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心承担实施,合同实施时间为2013年1月至2015年12月。技术原理:一是利用分子生物学、比较基因组学、基因重组、免疫学等技术手段,建立基于重组痘苗病毒的山羊痘病毒毒力基因小鼠实验模型或者兔实验模型;二是建立6大类山羊细胞因子的荧光定量RT-PCR检测方法和山羊细胞凋亡水平的TUNEL检测方法,与临床观察、病理学检查、细胞因子检测和细胞免疫水平测定等方法相结合,建立可利用弱毒疫苗株开展研究的山羊痘病毒毒力评价技术平台;最终形成一套科学、敏感、准确的山羊痘病毒毒力基因及其缺失重组毒株动物体内评价技术体系,并借助该技术体系对推测的毒力基因进行特性鉴定和验证。性能指标:形成一套科学、敏感、准确的山羊痘病毒毒力基因及其缺失重组毒株的动物体内评价技术体系;建成基于重组痘苗病毒的山羊痘病毒毒力基因小鼠实验模型或者兔实验模型;建立6大类15种山羊细胞因子的荧光定量RT-PCR检测方法和山羊细胞凋亡水平的TUNEL检测方法,与临床观察、病理学检查、细胞因子检测和细胞免疫水平测定等方法相结合,建立可利用弱毒疫苗株开展研究的山羊痘病毒毒力评价技术平台;发表论文3篇,培养硕士研究生3人,博士研究生2名。技术的创造性、先进性:国际上首次建立了基于重组痘苗病毒的山羊痘病毒基因生物学功能小鼠和兔实验模型;建立6大类15种山羊细胞因子的荧光定量RT-PCR检测方法;建立检测山羊细胞凋亡的TUNEL检测方法,与临床观察、病理学检查、细胞因子检测和细胞免疫水平测定等方法相结合,建立一套可利用弱毒疫苗株开展研究的山羊痘病毒本体动物体内评价技术平台;建立一套科学、敏感、准确、多层次的山羊痘病毒毒力基因及其缺失重组毒株的动物体内评价技术体系,破解了山羊痘病毒生物学特性和致病机制研究缺乏理想动物体内研究技术平台,而强毒研究需要高等级生物安全实验室的难题;借助建立的动物体内评价技术体系,证实山羊痘病毒编码的SERPIN和N1L基因是毒力相关基因,其中N1蛋白可能具有抑制宿主细胞炎症反应和细胞凋亡的能力。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该项目所建立的重组痘苗病毒的山羊痘病毒基因生物学功能小鼠、兔实验模型,以及基于弱毒疫苗毒株的山羊痘病毒本体动物体内评价技术平台技术成熟,可以广泛运用山羊痘病毒以及其他痘病毒基因功能和生物学特性研究,以及重组疫苗的研发。另外,该研究建立6大类15种山羊细胞因子的荧光定量RT-PCR检测方法和山羊细胞凋亡水平的TUNEL检测方法也适用于羊免疫机能评价和疫苗研究。由于该研究利用的是属于生物安全4级的无致病性的疫苗毒株——痘苗病毒天坛株和山羊痘弱毒疫苗毒株AV41株,可以在普通BSL-2级实验室操作,无需BSL-3级以上高等级实验室,因此安全性良好。应用情况及存在的问题:该研究建立的评价体系已成功应用于山羊痘病毒编码的SERPIN、N1L基因的生物学特性鉴定和该课题组承担的其他科研项目,效果良好。存在的问题:所建立的山羊细胞因子的荧光定量RT-PCR检测方法和山羊细胞凋亡水平的TUNEL检测方法尚待进一步标准化,以便推广运用。历年获奖情况:无。
[成果] 1700450377 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:近年来该区采取有力措施大力发展林下生态养殖助农增收,该区林下生态养殖产值占林下经济总产值的51.1%。H5、H7和H9亚型禽流感、新城疫、传染性支气管炎、鸡马立克氏病和禽白血病给中国林下养殖业造成重大的经济损失。强化对林下饲养鸡主要病毒病的防控,对保障该区畜牧业持续、稳定、健康发展具有重要意义。该成果是在完成广西区水产畜牧兽医局科技计划项目《林下饲养鸡主要疫病监测技术平台建立及流行病学研究》(桂渔牧科1204935)的基础上获得的。技术原理及性能指标:该项目应用分子生物学、动物微生物学、动物传染病学、动物免疫学原理,开展饲养鸡H5、H7和H9亚型AIV、NDV、IBV、MDV和ALV的病原学、分子流行病学、诊断技术及防控技术的研究及应用。完成的性能指标:建立了H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)多重RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。在国内首次建立鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)多重荧光定量RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。在国内首次建立鸡马立克氏病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)多重荧光定量RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。应用所建立的主要疫病监测技术平台和地方标准,对广西林下饲养鸡主要疫病开展流行病学调查,掌握其发生及流行特点。发表了学术论文12篇,其中在中文核心期刊公开发表8篇。制定了2项广西地方标准。培养了2名硕士研究生。应用该项目成果及林下饲养鸡主要病毒病的综合防控技术,4年来为437家林下饲养鸡场开展技术培训、技术指导、技术服务及防控效果评估,林下饲养鸡主要病毒病的发病率和死亡率大幅下降,取得了显著的经济效益。在全区建立16个林下养鸡主要疫病防控示范基地(点)。技术的创造性与先进性:建立了H5、H7、H9亚型禽流感病毒多重RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。国内首次建立鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。在国内首次建立鸡马立克氏病病毒、禽白血病病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法,并应用于临床样品检测。制定了《H5、H7和H9亚型禽流感病毒的检测一步法多重反转录聚合酶链反应法》和《鸡新城疫病毒及鸡传染性支气管炎病毒的检测二重荧光定量反转录聚合酶链反应法》2项广西地方标准。这是国内首次将能同时检测区分H5、H7、H9亚型禽流感病毒,NDV和IBV的多重RT-PCR检测方法及多重荧光定量RT-PCR检测方法归纳、总结并制定成省级推荐性地方标准。应用以上所建立的主要疫病监测技术平台和地方标准,开展林下饲养鸡主要病毒病病原学检测、流行病学调查,掌握主要疫病发生现状以及流行特点,制定有针对性的防控措施,提高疫病防控的科学水平。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该成果所建立的快速检测方法技术成熟,已成功应用于全区各市养殖户开展疫病诊断、防控效果评估等技术服务。同时,该成果所查明的林下饲养鸡主要病毒病的流行规律以及据此制定的综合防控技术措施以专家指导意见的形式在全区进行推广应用,指导广大养殖户积极防治上述疫病,均取得了显著效益。应用情况及存在的问题:该成果在全区14市推广应用,举办培训班41期,培训各级各类人员14520人次,显著提高了其对林下饲养鸡主要病毒病流行与危害的认识以及诊断、防治能力。应用成果的养殖场发病率和死亡率明显降低,用药减少,养殖业对环境的污染也相应减少,取得了3742.139万元的直接经济效益,经济效益、社会效益和生态效益显著。存在的问题:所建立的快速检测方法尽管已制定了广西地方标准,但仍有待进一步标准化和产品化,以利于其进一步推广应用。历年获奖情况:无。
[成果] 1700450378 广西
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题来源与背景:水禽圆环病毒病、鸭坦布苏病毒病(原名鸭黄病毒病)和鸭痘是近年来新出现的水禽疫病,对水禽养殖业危害严重。对于该类疫病的研究国内外尚处于起步阶段,在病原生物学特性、流行病学规律、致病机理、免疫机理和防控技术等方面尚有大量疑难问题亟待攻克,广西壮族自治区水产畜牧兽医局下达了广西水产畜牧兽医科技项目《水禽新发疫病分子流行病学与快速检测技术研究》(桂渔牧科1204936),由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心承担实施,项目实施时间为2012年1月至2017年3月。技术原理:该成果应用分子生物学和免疫学理论与技术,分别建立了水禽圆环病毒、鸭坦布苏病毒、鸭源禽痘病毒PCR(或RT-PCR、荧光PCR)检测方法,鸭圆环病毒抗体ELISA检测方法;利用上述快速检测方法以及病毒学、流行病学原理和技术,开展了新发水禽病毒病病原学、流行病学和致病性研究,查明上述病原在广西水禽群中的流行分布情况及其对水禽养殖业和家禽重大疫病防控工作的危害程度;明确广西流行毒株的基因型、优势基因型以及病毒遗传衍化规律,掌握其分子流行病学特点。将研究成果集成为综合防控技术措施,在全区推广应用并指导广大养殖户开展防控。性能指标:完成17株鸭圆环病毒和3株鹅圆环病毒的全基因组,5株鸭坦布苏病毒和3株鸭源禽痘病毒关键基因的序列测定;建立了能同时检测并区分鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的二重PCR方法、鸭圆环病毒抗体间接ELISA检测方法、鸭坦布苏病毒RT-PCR检测方法、鸭源禽痘病毒荧光PCR检测方法等4种快速检测方法,获得国家发明专利授权1项;开展广西鸭、鹅圆环病毒、鸭坦布苏病毒、鸭源禽痘病毒的病原学研究和流行病学调查;发表学术论文12篇,其中1篇发表在SCI期刊,1篇发表在英文国际期刊,8篇发表在中文核心期刊;培养研究生3名,博士研究生2名,中青年技术骨干15名,举办各类培训班39期,培训3250人次;制订鸭圆环病毒、鸭坦布苏病毒和鸭痘综合防控技术措施并在全区14市推广应用,应用养殖场发病率和死淘率明显降低,用药减少,饲料利用率提高,取得直接经济效益4704万元,经济效益、社会效益和生态效益显著。技术的创造性、先进性:在东亚地区首次分离鉴定鸭源禽痘病毒,为水禽源禽痘病毒的传播和自然分布提供科学证据。首次建立鸭痘病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法,获国家发明专利授权。发现新型重组鸭圆环病毒,首次证实1型和2型毒株之间可在3’末端基因间隔区发生型间重组,为鸭圆环病毒遗传变异和重组提供新的证据。首次建立了同时检测并区分鸭圆环病毒和鹅圆环病毒的二重PCR检测方法。首次通过优化密码子,实现鸭圆环病毒Cap蛋白在大肠杆菌中高效表达,并据此建立鸭圆环病毒抗体ELISA检测方法。与国内外水禽病毒病研究方面的同类技术相比,该成果取得鸭源禽痘病毒流行病学调查、鸭痘病毒检测技术、鸭圆环病毒分子生物学特性、鸭圆环病毒与鹅圆环病毒鉴别诊断技术、鸭圆环病毒血清学检测技术等方面的创新,研究成果总体达到国内领先水平。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该成果所建立的快速检测方法技术成熟,已成功应用于为全区各市养殖场户开展疫病诊断、防控效果评估等技术服务以及该项目组承担的其他科研项目;同时,该成果所查明的3种水禽新发疫病的流行规律以及据此制订的综合防控技术措施以专家指导意见的形式在全区进行推广应用,指导广大养殖场户积极防治上述新发疫病,均取得了显著效益。应用情况及存在的问题:该成果在全区14市推广应用,举办各类培训班39期,共培训基层广大防疫技术人员、养殖场户管理人员3250人次,显著提高了其对3种水禽新发疫病流行与危害的认识以及诊断、防治能力,应用成果的养殖场发病率和死淘率明显降低,用药减少,饲料利用率提高,取得直接经济效益4704万元,经济效益、社会效益和生态效益显著。存在的问题:所建立的快速检测方法尽管已取得专利授权,但仍有待进一步标准化和产品化,以利于其进一步推广应用。历年获奖情况:无。
[成果] 1700590128 海南
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:项目所属科学技术领域:兽医传染病学研究应用领域。主要内容:对中国主要养禽地区IBDV的流行规律及遗传变异特征进行研究,提出了中国IBDV基因组节段重组毒株类型的分类建议,为中国IBDV防控提供了参考依据,特别要重视不同毒株间的重组以及活疫苗的合理使用。阐明了中国MDV的分子流行规律及遗传进化特征,发现了中国MDV流行毒株的遗传演化特点。基于反向遗传操作系统,鉴定了一系列影响IBDV致病力、复制效率的关键分子基础;发明了IBDV疫苗的新型创制方法,可将候选毒株的培育间大幅缩短,且免疫原性与流行毒株更接近且安全低毒;创制了一株主要抗原基因与流行毒株高度接近的IBDV重组弱毒候选疫苗株,稳定性好,安全,高效。证实中国养殖鸡群中存在特超强毒力的MDV流行毒株和可突破现有疫苗免疫保护的MDV毒株,流行毒株毒力呈现多样性,毒力以超强毒(vvMDV)和特超强毒(vv+MDV)为主,致病特征呈现多样化特征;培育了4株MDV致弱毒株,初步探讨了毒株致弱的分子基础。筛选出适合文昌鸡的传染性法氏囊病和马立克氏病防控技术各1套,分别应用于2805万只和5053万只文昌鸡,为文昌鸡养殖业的健康发展提供了技术支撑。主要特点:针对文昌鸡规模化生产中存在问题进行立项,为文昌鸡饲养过程中传染性法氏囊病和马立克氏病的防控提供技术依据。应用推广情况:文昌鸡的传染性法氏囊病和马立克氏病防控技术分别应用于2805万只和5053万只文昌鸡,为文昌鸡养殖业的健康发展提供了技术支撑。
[成果] 1800120248 重庆
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:课题组作为农业生产养殖消费大国,随着国际交往和动物及其产品进出口贸易的增加,动物疫病国际间传播的风险日益增大,对世界各国的人体健康、农牧业生产和生态环境安全已构成巨大威胁,世界各国都极为重视重要动物疫病跨境入侵的防控。该项目针对进出境重要检疫对象马脑炎病毒、牛疙瘩皮肤病毒等重要动物疫病的病原为研究对象,建立或完善了多种重要动物疫病病原的系列检测技术及标准物质,为加强动物疫病国门把关、提升国内疫病防控能力。创新点和获得的主要成果:(1)率先在国内开展牛疙瘩皮肤病的研究,建立牛疙瘩皮肤病毒的基因芯片、LAMP、多重PCR、荧光PCR等检测技术,研发了牛疙瘩皮肤病毒基因芯片、LAMP和多重PCR检测标准物质及试剂盒,为外来疫病防控提供技术支撑。(2)以水泡性口炎病毒为载体,采用反向遗传技术,创新性构建了3株表达马脑脊髓炎病毒E2蛋白的重组病毒,研发出相应的检测标准物质;建立了东部型马脑脊髓炎、西部型马脑脊髓炎、委内瑞拉马脑脊髓炎以及西尼罗河病毒等12种虫媒病的WsP-mRT-PCR联用Lab-on-Chip方法,可同时实现“一孔12检”。(3)率先建立动物衣原体的多重套式PCR、多重TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,可快速高通量的鉴别检测流产嗜衣原体、鹦鹉热衣原体、猪源衣原体、家畜嗜衣原体等,分别研制出多重套式PCR和荧光PCR试剂盒,实现了病原的特异性快速鉴别检测。(4)建立了口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪TTV等的LAMP检测方法,研发了相应的LAMP检测试剂盒,方法简便、快速、特异、灵敏,可实现肉眼直接判定结果,能满足重大疫病防控和口岸快速通关要求,为口岸和基层实验室的临床快速检测提供了技术支撑。
[成果] 1700640086 云南
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:小反刍兽疫、非洲猪瘟和蓝舌病是三种重要动物疫病,对动物健康养殖、生产性能危害大。三种疫病在全球呈由西向东扩散流行,严重威胁各国的非传统安全(包括畜牧业、食品、社会经济发展等),如小反刍兽疫,2007年传入中国,2013年-2014年,在全国22个省份大流行,2013年11月-2016年3月,共计发病动物(羊)39622头,死亡动物(羊)17667头,处理动物(羊)58827头。该项目针对严重威胁中国动物健康的小反刍兽疫等三种重要动物疫病,在"十一五"、"十二五"国家高技术发展计划(863)的支持下,持续开展了上述疫病检测方法研究和应用,研发了系列检测技术及配套的诊断试剂盒产品。取得成果如下:1.研制了小反刍兽疫等三种病毒重组抗原、单克隆抗体,部分在中国典型培养物保藏中心进行了保藏;2.建立了小反刍兽疫等三种病毒抗体检测的ELISA/胶体金检测方法,试制成功相应检测试剂盒;3.建立了小反刍兽疫病毒/蓝舌病病毒检测的PCR、双抗夹心ELISA检测方法,试制成功相应检测试剂盒; 4.与企业签订了小反刍兽疫、蓝舌病ELISA抗体检测试剂盒的成果转化和新兽药注册协议,开展了新兽药注册工作;5.试制的小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测试剂盒于2014年检出云南省首例小反刍兽疫病毒抗体阳性动物,制订的小反刍兽疫检疫技术规范行业标准在云南省首例小反刍兽疫病例的核酸/抗体检测中进行了应用;6.建立的蓝舌病、小反刍兽疫抗体/核酸检测方法、制订的标准、试制的试剂盒在全国部分动物检疫实验室能力测试中进行了应用,累计提升了全国90家以上动物疫病检测实验室相应的检测能力。上述研究成果获得单克隆抗体细胞株8株;获得重组蛋白抗原5种;试制检测试剂9种;签订成果转化协议2份;获得新兽药临床试验批件1份;获国家发明专利7项、实用新型专利2项、外观设计专利1项;制定国家标准1项,行业标准2项,地方标准2项;建立动物疫病诊断中试生产线2条;发表研究论文30篇,其中SCI论文5篇;专著2部;培养博士后1名、硕士3名、5名晋升职称。研究成果形成了方法、标准、专利、试剂盒产品"一体化"成果,在动物防疫和检验检疫实际工作中进行了广泛应用,提高了疫病检疫效率,突破了国外试剂在中国市场占据价格垄断的优势,节约了应用单位相应的动物疫病防控成本,有效防止了相关疫病的传播和传入中国,取得了良好的经济和社会效益。
[成果] 1800120078 山东
S85 应用技术 畜牧服务业 公布年份:2017
成果简介:牛羊结核病和布病是重要的人畜共患传染病。应用兽医流行病学理论进行奶牛布病群间流行率和个体流行率的测量;确定奶牛场布病群间相关系数(ICC为0.06);对奶牛布病发生的风险因素进行分析评估,为奶牛场监测净化提供了科学依据。测定了流产羊场(户)与布鲁氏菌检测阳性场之间及流产母羊与布鲁氏菌检测阳性关联强度,证明关联度较高;牛场和羊场规范化消毒技术。
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