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摘要:目的:比较4种方法,包括煮沸法、改良碱裂解法、磁珠法和吸附柱法提取金黄色葡萄球菌基因DNA效果,为临床金黄色葡萄球菌感染的快速检测提供技术支撑。方法:选取20株临床分离耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,分别使用煮沸法、改良碱裂解法、磁珠法和吸附柱法提取基因DNA。通过PCR法扩增所提取DNA模板中金黄色葡萄球菌spa基因、mecA基因和femB基因,以评估4种方法提取效果。结果:磁珠法制备的模板中,PCR法可以扩增出所有标本的spa基因、mecA基因和femB基因;吸附柱法制备的模板中,所有标本均可扩增出spa基因和mecA基因,而仅19个标本扩增出femB基因;以改良手工碱裂解法制备的模板,所有标本均可扩增出mecA基因,19标本可以扩增出spa基因和femB基因;煮沸法制备的模板中,PCR法可以分别扩增出7个标本的spa基因,8个标本的mecA基因,所有标本均未扩增出femB基因。结论:改良碱裂解法、吸附柱法和磁珠法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA均可以用于PCR扩增,直接煮沸法提取效果较差,不适合用于临床金黄色葡萄球菌基因组DNA提取;磁珠法用时最短,更适合于大量快速自动化提取。...
摘要:目的:探讨宫颈上皮细胞游离亚铁原卟啉/活性氧自由基(FH/ROS)联合检测在宫颈癌及癌前病变中的临床应用价值。方法:2019年3月至2019年6月遵义医科大学附属妇幼保健院(遵义市妇幼保健院)妇科接受宫颈癌筛查的女性患者360例,选取同时具有TCT检测及病理检查结果的300例,对其FH/ROS联合检测,以病理学诊断结果作为金标准,分析FH/ROS联合检测和TCT对宫颈癌与CIN检测的灵敏度、特异度、准确度。结果:上皮细胞FH/ROS联合检测阳性率高于TCT (P...
摘要:目的:研究济南地区人群ABO血型比例和血型等位基因频率。方法:对山东人类精子库2006年4月至2019年6月7458例捐精志愿者血型情况进行分析,统计A、B、O和AB血型的人数并根据Hardy-Weinberg遗传平衡定律计算等位基因频率。结果:济南地区人群血型比例为:A型,27.06%;B型,33.12%;AB型,10.44%;O型,29.38%;血型等位基因频率为IA,pc = 0.2094;IB,qc = 0.2486;i,rc = 0.5420。结论:济南地区人群中,B型血人数最多,i等位基因占优势。通过研究济南地区人群ABO血型情况,对遗传学研究、输血医学和临床应用等具有重要的意义,并在一定程度上推动人类精子库和血液中心的合作关系,促进献血和捐精公益事业的发展。...
摘要:牛β防御素4 (BNBD4)是一种天然存在于牛肺脏肺泡巨噬细胞内的抗菌肽,本研究拟通过克隆BNBD4成熟肽片段的编码区序列,连接至真核表达载体pPIC9K构建重组质粒mBNBD4-pPIC9K,转化至毕赤酵母菌株GS115诱导表达,镍柱纯化后,经Tricine-SDS-PAGE检测和Western Blot鉴定,成功获取重组蛋白mBNBD4,为进一步研究牛防御素BNBD4的作用机制提供试验材料。...
摘要:骨肉瘤是严重威胁患者健康和生命的一种原发性恶性肿瘤。随着医疗科学技术的发展,治疗方法日益多样,近几年多提倡手术治疗与化疗结合的综合性治疗方案,这能将患者五年生存率提高至60%~70%。为了提高患者生存质量,延长患者生存时间,骨肉瘤治疗的关键在于对骨肉瘤的早发现,早治疗。本文就目前骨肉瘤的诊断方式和近年来骨肉瘤在免疫信号通路、血管靶向、修饰T细胞、等方面取得的研究进展进行综述。...
摘要:诺如病毒(NV)可导致急性肠胃炎并具有高度的传染性,一次爆发涉及人数众多,极易引起恐慌。NV致病机理尚不明确,流行病学研究发现牡蛎可特异性富集NV而成为食源感染NV最主要途径,而其生物富集过程机理也不清楚。研究表明人体FUT2多态性会影响NV识别与感染,实验表明牡蛎体内存在类似人体NV识别受体。我们研究发现不同牡蛎个体间NV富集存在显著差异,该差异是否与FUT2多态性相关尚不清楚。本研究拟借助高通量测序等方法筛选牡蛎FUT2多态性位点,然后利用高分辨率熔解曲线以及荧光定量PCR等技术开发、验证FUT2多态性标记。本研究为探索牡蛎富集NV过程机理奠定基础;同时为进一步明确NV感染人体过程以及相关预防和治疗措施提供新思路。...
摘要:心血管疾病严重威胁人类健康,其中心肌肥大和心肌纤维化是心血管疾病发展的主要表现。microRNA-29在心肌肥大和纤维化过程中都发生异常表达,并且参与纤维化、肿瘤增殖等过程。本研究通过建立肥大心肌细胞体外模型,研究miR-29a在心肌肥大过程中的变化水平及肥大心肌细胞细胞周期相关蛋白的表达模式变化。将常规培养H9C2心肌细胞系使用1 × 10−5、1 × 10−6和1 × 1−7 mol/L浓度的AngII诱导48 h后,检测细胞面积、细胞总蛋白含量,确定肥大心肌细胞诱导结果;再利用qPCR方法检测不同组的miR-29a、Cyclin A2、Bcl-2、Plk-1表达水平。结果显示使用浓度为1 × 10−5、1 × 10−6 mol/L的AngII对H9C2诱导48 h后,细胞面积明显增大,细胞的总蛋白含量也增加,并且miR-29a表达水平显著升高;细胞周期相关的CyclinA2、Bcl-2和Plk-1在高浓度(1 × 10−5 mol/L)AngII诱导后表达水平上升,低浓度(1 × 10−7 mol/L) AngII诱导后表达水平下降。在肥大心肌模型建立过程中,miR-29a可能能够对细胞周期相关基因产生抑制。...
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2019年 03期
摘要:目的:近年来,标准化和单靶向疗法对骨肉瘤都没有显著效果,因此,多靶向治疗骨肉瘤是目前发展的趋势。方法:通过基因数据库寻找到骨肉瘤相关芯片GSE16088,对正常骨和骨肉瘤芯片中基因的差异表达进行分析,并构建交互网络,最后基于其相互作用性强的基因进行骨肉瘤信号通路机制分析并找出多个靶点。结果:通过对骨肉瘤和正常骨组织基因芯片的差异表达分析,得出其差异表达最强的是胶原(Collagen, COL)系基因,并通过构建交互网络发现其致病相关通路为COL-MMPs-RhoA-JNK通路,基于此通路,可同时进行细胞质机制重塑和药物多靶向治疗。结论:多靶向COL-MMPs-RhoA-JNK通路中的关键基因是治疗骨肉瘤的一个新思路,为临床靶向治疗骨肉瘤提供更多的切入点。...
[期刊论文] 王乾芬
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2019年 03期
摘要:狂犬病是由狂犬病毒引起的人畜共患传染病。狂犬病毒感染温血动物和人类的中枢神经系统后导致急性致命脑脊髓炎。狂犬病疫苗的开发有着悠久的历史,19世纪后期开发出第一代狂犬病疫苗,随后开发出更高疗效和更少不良反应的第二代和第三代疫苗,疫苗的正确应用对于防止狂犬病的发展是非常有效的。大量的实验性疫苗正在发展中,包括DNA疫苗、重组病毒疫苗和重组蛋白疫苗。本文概述狂犬病接种疫苗的过去、现在和可能的未来。...
摘要:心率是脉搏波的最基本信息,是人体健康的一项重要生理指标。传统的心率检测多与人体有直接接触,而长时间的接触会造成被试者的不适,因而不适合长时间的心率测量。因此本文提出了利用摄像头实现非接触式对被测者的光电容积脉搏波(RPPG: remote Photo Plethysmography)的提取和分析的方法。即基于人脸识别技术,实现从摄像头中自动分割被测试者的面部信息,选取感兴趣区域(ROI: Region of Interest),使用计算机视觉技术和独立成分分析算法(ICA: Independent ComponentAnalysis),从摄像头视频中提取被测者的光电容积脉搏波信号。本文设计实现了非接触式测量心率,提供了一种较为准确的心率测量方法。...
摘要:气喘为气管道的慢性发炎性疾病,急性发作严重时可能会造成呼吸衰竭,甚至导致生命危险。本篇研究目的为评估自国人体内筛选出之乳双岐杆菌GKK2改善OVA诱导之小鼠过敏情形及有效调节相关过敏因子。实验将Balb/c小鼠分为四组:生理食盐水组、OVA诱导气喘组、OVA诱导小鼠给予GKK2-100组(0.123 mg/day/kg)及OVA诱导小鼠给予GKK2-300组(0.41 mg/day/kg)。实验结果显示,OVA致敏小鼠经给予乳双岐杆菌GKK2低高两剂量组后,其呼吸道阻力、嗜酸性球(eosinophil)及OVA特异性IgE皆较OVA诱导气喘小鼠组别显著降低许多。在IFN- γ及IgG2a方面,给予乳双岐杆菌GKK2,则能有效增加致敏小鼠体内IFN- γ及IgG2a的含量,降低过敏反应。...
摘要:藻蓝蛋白的提取纯化有利于其作为药品和荧光试剂的研究和推广应用。本文以巢湖蓝藻为原料,利用柱色谱法纯化藻蓝蛋白,开展单因素实验优化柱色谱的运行条件,并使用紫外–可见吸收光谱与红外吸收光谱分析整个纯化工艺的机理。研究表明,CellufineA-500纯化藻蓝蛋白实验的最适单因素条件分别为pH 7.0、离子强度0.25 mol/L、洗脱速度5mL/min、进样浓度1mg/mL。紫外–可见吸收光谱表明一步盐析工艺去除了少量杂蛋白,二步盐析去除了大量核酸和杂蛋白,柱色谱工艺进一步去除杂蛋白,得到试剂级藻蓝蛋白。红外吸收光谱表明整体工艺去除的杂蛋白二级结构以β-折叠为主,硫酸铵等添加物会被有效去除。...
摘要:目前表观遗传学的研究正愈加受到重视,表观遗传不通过改变DNA的编码顺序也可以调控基因的表达,而DNA甲基化和组蛋白乙酰化作为表观遗传学的重要机制,更是目前表观遗传学研究的热门方向。DNA的甲基化和去甲基化,组蛋白的修饰之间是否达到平衡更是保证干细胞向成骨细胞正常分化的关键。基因表达时序性被打破不仅会影响到成骨分化,更与骨科类疾病,如骨质疏松有密切的联系。本文主要综述了近年来DNA甲基化、组蛋白乙酰化和miRNA对成骨细胞分化的调控作用及其与骨质疏松关系的最新研究进展。...
[期刊论文] 林鑫翔 赵兴群
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2019年 02期
摘要:脑动脉中的栓子有可能阻塞脑血管而引起缺血性脑卒中等疾病,因此脑血栓检测具有重要的临床意义。传统的脑血栓检测依赖于专家的主观判断,并且耗时长。为了克服这些缺点,本文提出了一种基于双树复小波变换(DTCWT)的快速、准确和健壮的脑血栓检测方法。双树复小波变换相对普通离散小波变换,增强了从多普勒超声信号中提取的系数的鲁棒性。对于本文提出的检测方法,采用栓塞和人工伪像信号进行实验论证,首先对不同样本的正向血流信号使用DTCWT分别提取其血流系数,然后对每组系数进行降维,并将降维后的系数逐一馈送进分类器。将所得结果与基于FFT和DWT的脑血栓检测方法进行比对,结果表明使用DTCWT提取的特征具有最高的准确性和栓塞检测率。...
[期刊论文] 吴诉诉 尚靖
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2019年 02期
摘要:人体肝脏具有多种免疫学功能。它独特的解剖学特点以及肝脏内多种参与免疫反应的细胞使它成为人体免疫系统的哨兵。了解肝脏发挥免疫功能的分子机制对于肝脏相关疾病发病机制的阐释及寻找有效的药物治疗靶点都有十分重要的意义。本文综述了肝脏的解剖学结构以及肝细胞、Kupffer细胞、肝血窦内皮细胞、树突状细胞、肝星状细胞以及胆管细胞通过表达特定分子来介导免疫反应的过程。...
[期刊论文] 杜明泽
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2019年 02期
摘要:纵观创客教育在我国发展状况,3D打印技术的不断突破,促进了创客教育的发展,同时也促进了众多核心领域的技术更新,3D打印生物高分子材料在医疗领域的应用逐渐进入人们的视野,并取得了一定的成功。本文将在高中创客教育视野下,分析3D打印技术、生物高分子材料与医疗技术之间的关系。...
摘要:热休克蛋白广泛存在于各种生物体内,当生物体受到外界环境刺激后会大量表达,帮助生物体维持细胞的稳态。近期研究表明,热休克蛋白在伤口愈合过程中有促进细胞迁移的功能,通过向动物注射热休克蛋白能加速伤口的愈合过程,并且在高血糖环境下不受到阻碍。本综述通过查阅近年来相关资料,将热休克蛋白与传统的生长因子做了对比,描述了热休克蛋白90的功能和信号通路,总结了热休克蛋白在治疗伤口愈合过程中的优势和面临的困境。为将来研究伤口愈合的新药提供思路。...
摘要:研究了高压脉冲等离子体射流(APPJ)对耐药性鲍曼不动杆菌(A. baumannii)生物膜的失活效果和机制。研究发现,该脉冲等离子体射流对生物膜中的细菌有明显的灭活作用。菌落形成单位(CFU)计数方法处理显示,30分钟处理后,生物膜中99.9%的细菌失去其可培养发育能力。与此同时,刃天青荧光染色方法显示约80%的细菌失去了新陈代谢能力,部分细菌进入了一种存活但不可培养发育的状态(VBNC),H2-DCFDA荧光染色方法显示,等离子体处理后生物膜中细菌内的活性含氧基团(ROS)的浓度有所提高。等离子体活性物种可能诱导了细菌内部应激反应的产生,导致胞内ROS的生成,最终氧化破坏细菌结构,这可能是等离子体导致生物膜中细菌失活的重要原因。...
[期刊论文] 赵珂 吴巧珑 吴晨
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2019年 02期
摘要:目的:评价补肾调轴方改善IVF-ET反复种植失败者子宫免疫微环境的临床疗效。方法:将47例反复种植失败的患者作为研究对象,予补肾调轴方颗粒进行治疗,检测子宫内膜IDO的表达。结果:治疗后IDO的表达较治疗前提高,差异有统计学意义。结论:中药补肾调轴方能上调子宫内膜IDO的表达,促进胚胎免疫耐受,有助于胚胎的着床成功。...
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2019年 02期
摘要:壳聚糖衍生于甲壳素,是自然界中产量仅次于纤维素的天然高分子多糖。由于它具有生物相容性、生物可降解性、抗菌性、无细胞毒性以及非凡的蛋白亲和性等优异性能,在生物医药方面具有广阔的应用前景。此文对壳聚糖及其衍生物生物特性以及在医药应用中的进展进行了综述。...
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