绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 8
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 143 条结果
[硕士论文] 余飞
预防兽医学 上海交通大学 2016(学位年度)
摘要:种蛋保存期间,其内部品质受到外部环境的影响而产生变化,而种蛋抵抗外部环境变化的能力又因自身特性不同而各异。当前在种蛋保质过程中外观选择指标、保存环境、消毒方法以及综合管理等方面缺乏系统研究,没有一套可供参考和执行的标准参数,不利于浦东鸡种蛋保质工作和种质资源特性的系统评价与开发。为此,开展相关试验,对种蛋外观选择指标、保存环境、种蛋消毒等因素进行优化分析,对于研究科学的浦东鸡种蛋保存技术具有重要意义.
  主要进行了以下研究:
  1.本试验选取30/45/60/75周龄四个年龄组浦东鸡所产种蛋各150枚,每组分别按蛋重划分为:<56 g、56-60 g、>60 g三个区间。对每个区间的数量、受精率、孵化率进行统计分析。结果表明:浦东鸡在30-75周龄期间所产种蛋重多在56-60 g之间,>60 g的数量最少,且二者之间差异显著。不同周龄间种蛋的受精率、受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率差异不显著。
  2.本试验选取50-55周龄的浦东鸡所产种蛋,并按颜色深浅分为深、中、浅三组。试验重复4次。对每组的受精率、孵化率进行统计分析。结果表明:浦东鸡种蛋中深色的具有更高的孵化品质,但无法判断深色蛋是否更利于种蛋长期保存。
  3.本试验选取浦东鸡种蛋分别保存在11℃和16℃环境中10/13/16/19/22 d。每个条件下重复4次。对每组的受精率、孵化率进行统计分析。结果表明:浦东鸡种蛋保存10-22 d时,随着保存期的增加,种蛋的孵化率逐渐降低。但保存在11℃环境时的效果总体好于16℃。浦东鸡种蛋在16℃环境下保存时间不宜超过13 d。
  4.利用厌氧袋制造:氧含量极低/较低/稍低/正常的保存小环境。种蛋分别置入以上四种小环境中保存7/14/21 d。每个条件下重复4次。对每组的受精率、孵化率进行统计分析。结果表明:环境气体变化影响孵化率。保存21 d时,较低氧含量的环境更利于种蛋的保存,且差异显著;保存7d时,正常氧含量的环境更合适,差异极显著。
  5.在种蛋入库保存前,分别采用熏蒸、浸泡、喷雾等消毒处理。每个条件下重复4次。对每组的受精率、孵化率进行统计分析。通过对不同消毒方法的对比发现,潮湿高温的夏季,要长时间储存种蛋,应首选喷雾消毒。其次是浸泡消毒,不同浸泡消毒液的效果差异不显著。
  综上所述,根据不同的生产计划或保存需求,依据种蛋外观选择指标及保存环境参数来管理种蛋对提高生产效率有帮助。
[硕士论文] 李梦楠
计算机技术 河北农业大学 2016(学位年度)
摘要:伴随我国国民经济的提高和社会的发展,居民更加注重健康饮食和生活,乳制品成为日常生活中的必备食品。所有的乳制品都是基于原料乳的再加工生产而成,所以原料乳的质量成为保证乳制品的味道口感,品质及其安全性和营养价值的关键因素。原料乳的收购是关系乳品质量的关键环节,保障乳品质量的第一步。在原料乳检测中影响质量的关键因素主要有蛋白质、脂肪、酸度、菌落总数、芽孢数和入厂温度。由于我国奶牛养殖散户居多而原料乳保质期极短,原料乳生产后不及时上交或在其运输过程中,奶品质极有可能下降。仅仅依靠质量的检测远远无法保障品质,只有未雨绸缪才能及时的发现问题,及时进行调整,从而减少不必要的乳品安全问题。
  随着移动互联网的蓬勃发展,现代化企业管理发展必须依靠移动互联网技术。Android平台对外统一开放且开发快捷扩展性好的优点使基于Android平台的系统开发成为一个极其富有发展前景的领域。因此,本课题研究的基于Android手机平台的原料乳质量预测系统可使奶牛饲养员、原料乳收购员和企业验收员每人手持终端,不受地域限制,实时对原料乳质量进行监控预测,方便快捷。
  首先,论文介绍了原料乳质量预测模型所需要确定的关键因素和预测技术。通过分析原料乳的组成和加工过程确定影响原料乳质量的关键因子。介绍当下流行的预测技术,通过分析对比确定适用于本系统开发的预测技术。
  其次,结合当下流行的神经网络技术,对乳品质量进行了预测仿真实验。根据人工神经网络具有自学习能力特征,并结合乳品生产特点,以影响原料乳质量的关键因子数据和12h后关键因子变化数据为实验数据,用归一法对数据做预处理后再训练BP神经网络质量预测模型,仿真各个关键因子之间的相互作用关系。采用遗传算法对BP网络模型进行了优化。通过结果数据对比分析确定应用GA-BP网络建立原料乳质量预测模型有效可行。综合分析预测数据为原料乳质量做品质评级,更加直观的表现出原料乳是否达到要求。
  再次,对基于Android平台的原料乳质量预测系统进行严格的测试,并设计实现系统数据库。对系统进行详细的功能性需求分析。采用MVC设计模式,运用Http协议通信,Apache作为客户端和服务器的通信接口。
  最后,在系统功能完成后,对系统各功能模块进行了修改。并通过系统主管、奶牛饲养员、原料乳收购员和企业验收员不同人员之间的不同需求,登录此系统不同模块,通过这些模块的有机结合对系统进行综合测试,以实现信息化管理原料乳属性数据、系统用户、订单和对原料乳质量进行预测评级的目的。
[硕士论文] 许茂思
特种经济动物饲养 东北林业大学 2016(学位年度)
摘要:毛皮动物饲养行业在我国有着60余年的历史,主要用其皮毛原料制作裘皮服饰,而胴体却成了副产品。人们对毛皮动物胴体认识不明,至今还未能被开发利用,每年取皮季节大量胴体的随意丢弃,既是对动物肉质资源的巨大浪费,又是对生态环境的极大破坏。然而,我国是一个动物性蛋白饲料极缺的国家,每年都要耗费巨资进口近十万吨肉骨粉和百万吨鱼粉。若将毛皮动物胴体经过一定加工手段,合理开发出来,不仅可以有效的缓解我国蛋白质饲料短缺依靠进口的局面,还可以降低养殖成本,创造更大的经济效益。
  目前,我国还未出台针对毛皮动物胴体利用的相关规范标准,为此,本文主要对国内外畜禽动物副产品加工成肉骨粉工艺等相关文献的查阅、与我国多家毛皮动物饲养企业的走访调研,并结合针对我国毛皮动物胴体在处理过程中存在的问题,与我国饲料用肉骨粉在使用过程中存在的不足,参照GB/T20193-2006中对饲料用肉骨粉的相关规定,起草拟定了符合我国的毛皮动物胴体加工成饲料用肉骨粉的标准体系,可最大化的开发利用毛皮动物胴体。本标准技术体系主要包括肉骨粉加工厂建设标准、毛皮动物处死标准、胴体收购标准以及加工环节技术标准、肉骨粉中各项指标的检测标准、饲料用肉骨粉的包装、储存与运输标准等内容。
  本标准的制定明确了我国毛皮动物胴体的处理方向,为加工成饲料用肉骨粉提供了重要的指导依据,希望能够尽快被作为林业行业推荐性标准在全国范围内颁布实施,早日整顿和规范我国毛皮动物养殖过程中对动物胴体的不规范处理,以减轻对环境污染破坏以及填补我国动物性饲料原料的短缺,为促进、完善我国毛皮动物养殖业健康发展提供科学依据。
[硕士论文] 毕玉芳
食品科学 华中农业大学 2016(学位年度)
摘要:本课题围绕鸡蛋风味将电子舌、电子鼻系统相结合,应用于鸡蛋风味特征分析,以及两种不同类型饲料对鸡蛋风味特征影响的分析,提供了一种快速、直观分析鸡蛋风味特征的方法,还研究了贮藏期间,鸡蛋风味相关成分以及挥发性成分的变化规律,主要研究结果如下:
  (1)用电子舌、电子鼻智能系统对对照组与实验组鸡蛋的风味进行分析,电子舌结果表明,实验组与对照组鸡蛋的蛋黄滋味特征中苦味值、涩味值、咸味值及鲜味的回味响应值有极显著差异,苦味回味值、涩味回味响应值有显著差异。实验组与对照组鸡蛋的蛋清的滋味特征中苦味及其回味值、涩味值、鲜味的丰富度方面有极显著性差异,两组蛋清的酸味值、鲜味值及涩味的回味值有显著性差异。电子鼻分析结果表明,实验组的熟蛋清挥发性气味特征与对照组明显不同,但是,两组蛋黄气味特征区别不明显。电子鼻、电子舌结合的方法能够发现发酵饲料组鸡蛋与普通饲料组鸡蛋的风味品质有明显区别。
  (2)鸡蛋在4±1℃、23±1℃贮藏40d,每10d取样一次,电子舌结果表明,蛋清的苦味、苦味回味、鲜味、鲜味回味、酸味变化明显,涩味、涩味回味、咸味变化不明显;4±1℃、23±1℃贮藏,蛋清苦味输出值、鲜味输出值均分别在第20d、10d出现较大变化;两组蛋清的酸味输出值均于第30d变化最大。蛋黄的酸味值、苦味值、苦味回味值、鲜味值变化明显,涩味值、涩味回味值、鲜味丰富度值、咸味值变化不显著;4±1℃、23±1℃贮藏至第10d,苦味输出值变化最大,第20d鲜味输出值最大;两组蛋黄的酸味输出值均于第30d时变化最大。电子鼻结果表明:23±1℃贮藏条件下,蛋清、蛋黄的气味特征呈现出一定的规律。
  (3)4±1℃贮藏30d,蛋黄总脂质与磷脂中不饱和脂肪酸含量有明显下降,之后变化不大。23±1℃贮藏期间,蛋黄脂质中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸的含量变化不明显。23±1℃贮藏到20d时,磷脂中不饱和脂肪酸略有下降,20d-50d变化不大,贮藏到60d时,含量明显下降,此时可能发生严重降解。4±1℃贮藏180d与23±1℃贮藏60d相比,蛋清、蛋黄氨基酸含量减少更多。
  (4)蛋黄在23±1℃贮藏到30d时,各种挥发性化合物含量出现峰值,可能风味品质较好;4±1℃贮藏期间,蛋黄各类化合物含量的峰值分别出现在120d-180d,贮藏后期风味品质较好。醛类化合物是蛋黄在贮藏过程中,很重要的一类风味化合物,主要为中、长碳链长度的醛类;1,2-苯二甲酸二(甲基丙基)酯也是水煮蛋的一种特征风味化合物。蛋清中芳香族化合物含量明显高于其他化合物,且各类化合物含量变化不明显,说明贮藏时间和温度对蛋清风味品质影响不大。
[硕士论文] 苏念思
农业信息分析学 中国农业科学院 2016(学位年度)
摘要:随着经济发展和养殖技术水平的提升,畜产品已成为居民生活的重要消费品。畜产品供需波动关乎养殖者收入和居民生活质量,是重要的民生问题。近年来,由供需失衡引发的畜产品价格剧烈波动时常发生,不仅使养殖户面临较大的市场风险,也使得中低收入消费群体面临较大的消费困扰。此外,较高的产业关联度加剧了供需失衡的负面效应。如何对畜产品供需形势开展预警,逐渐成为畜牧业研究的热点之一。
  为此,本文以供需均衡理论、预警机制理论、风险理论、系统理论为指导,针对目前研究中存在的不足,开展了以下研究:
  一是系统回顾了畜产品供需形势。供给方面,畜产品产量总体持续增长,供给结构不断优化调整,畜产品进口额和进口量呈上升趋势;需求方面,人均畜产品消费量逐年增加,消费结构明显改善,但城乡仍有显著差异,畜产品出口较为弱势。从市场反应——价格角度看,畜产品年度间供需形势多为紧平衡状态,月度间具有周期性波动特点,猪肉和禽蛋供需波动剧烈。
  二是分析了畜产品供需影响因素。供给影响因素主要有生产成本、价格、疫病、科技、产业支持政策等;需求影响因素主要有人口、收入、价格、质量安全、国际关系等。
  三是分别构建了畜产品供需预警理想指标体系和月度实用指标体系。理想指标体系以“供需失调度指数”为警情指标,以“主要生产投入品价格变动率”等17个指标为警兆指标。后根据月度预警的实际情况和需求,构建了以“畜产品价格与饲料价格比值”为替代警情指标,以其变动率为辅助警情指标,以“主要生产投入品价格变动率”等10个指标为警兆指标的实用指标体系。
  四是以生猪为例,开展了月度预警的实证分析。分析中以“猪粮比”为警情指标,以其变动率为辅助警情指标,以经过时差相关分析进一步筛选出的“玉米价格变动率”等6个指标为先导警兆指标,根据所划分的警度及对应警限开展预警。具体预警方法有:景气预警指数法(以上述6个指标与辅助警情指标的相关系数为权重依据构建景气预警指数,并根据其数值判断供需形势)和支持向量机(以上述6个指标为输入变量,以辅助警情指标为输出变量,利用辅助警情指标计算出的警情指标来判断供需形势)。结果表明,所研建的先导警兆指标可填补现有“猪粮比”缺乏先导警兆指标的空白;景气预警指数法和支持向量机在生猪月度供需预警上均取得了较好的效果,可为其它畜产品的月度供需预警提供借鉴。
  最后,本文提出了加强畜牧业数据统计和发布工作、提高畜产品供需预警水平、合理利用调控手段的政策建议,以期更好地促进我国畜牧业健康发展。
[硕士论文] 杨连
动物营养与饲料科学 中国农业科学院 2016(学位年度)
摘要:角蛋白酶具有降解角蛋白的能力,在饲料、织物处理、清洁剂、医药等行业具有广泛的应用价值,能够产生巨大的社会和经济效益。本研究旨在筛选获得快速羽毛降解菌株,解淀粉芽孢杆菌 K11(Bacillus amyloliquefaciens K11),并通过遗传操作获得角蛋白酶高效表达菌株pBSlac-kerK-SCK6和羽毛降解工程菌K1127,为角蛋白酶的工业应用奠定理论及技术支持。
  解淀粉芽孢杆菌K11(B. amyloliquefaciens K11)菌株可以利用羽毛作为唯一碳源和氮源,并在24 h内将羽毛完全降解。通过SDS-PAGE以及LC-ESI-MS/MS,确定了角蛋白酶的内肽序列,进一步获得了其完整的kerK基因序列。利用POE-PCR的方法,成功构建了pUB110-kerK表达载体,并实现了其在枯草芽孢杆菌 SCK6中的表达。通过牛奶平板以及羽毛降解实验,证明了 kerK基因是羽毛降解的关键基因。角蛋白酶 KerK的酶学性质分析表明:以羽毛粉为底物,其最适 pH为11.0,并且在pH6.0-12.0均具有较好的稳定性,最适温度为50 ℃,热稳定性较好,在50 ℃处理30 min酶活力仍保持在70%。
  在体外羽毛降解实验中,纯化的角蛋白酶KerK(150 U/ml)在还原剂DTT的共同作用下,50 ℃水浴振荡反应30 min能快速降解完整羽毛。酶解产物分析(HPLC-Chip/ESI-QTOF-MS)表明KerK主要是在丝氨酸和一些疏水性氨基酸间将结构牢固且难以再利用的羽毛降解,产生1-3 kDa富含多种必需氨基酸的可溶性寡肽, VVIQPSPVVVTLPGPILSS, IQPSPVVVTLPGPILSS,和ILSEEGVPISSGGF,为羽毛的循环利用尤其是作为饲料原料提供了可能性。
  为了提高角蛋白酶 KerK的表达量,本研究构建了 pBSlac-kerK诱导型表达载体,并成功的在枯草芽孢杆菌SCK6中实现了表达。在15升发酵罐水平,重组菌最高酶活力可达3500 U/ml,高于目前报道的大多数细菌来源的角蛋白酶酶活力。同时,本研究将构建的pUB110-kerK表达载体转化到原始K11菌株中,构建了kerK基因高拷贝的重组K1127菌株,其羽毛降解效率得到进一步提高:在12 h内能将羽毛几乎完全降解,且在羽毛培养基中的角蛋白酶活力能达到1500 U/ml,比原始菌株提高了6倍。高效的羽毛降解能力,使得该重组工程菌在羽毛粉的制备以及废弃羽毛的处理上具有良好的应用前景。
  综上所述,本研究通过羽毛降解实验筛选获得了快速羽毛降解菌株B. amyloliquefaciens K11,从中克隆获得了羽毛降解基因kerK,构建了pUB110-kerK组成型表达载体和pBSlac-kerK诱导型表达载体,成功在枯草芽孢杆菌SCK6中进行了表达,并对重组酶进行了纯化、酶学性质分析以及水解产物分析。同时,将构建的组成型表达载体转化到原始 K11菌株中,获得了重组 K1127菌株,该菌株对羽毛的降解效率进一步提高,为羽毛的规模化处理及循环利用奠定了基础。
[硕士论文] 胡徐登
动物产品加工 浙江大学 2015(学位年度)
摘要:本课题主要研究:(1)鸭蛋壳膜酶水解的预处理方法比较;(2)鸭蛋壳膜双酶水解提取粘多糖工艺研究;(3)鸭蛋壳膜酶水解制备蛋白多肽工艺研究;(4)鸭蛋壳膜酶水解液护肤品研制。
  分别用熔融尿素法、3-巯基丙酸还原法、硫化钠还原法来预处理鸭蛋壳膜,以鸭蛋壳膜分解率与D-葡萄糖醛酸提取率为指标衡量水解效果,最终筛选出硫化钠还原法为最佳的鸭蛋壳膜预处理方法。
  采用硫化钠还原法来打开鸭蛋壳膜角蛋白中的二硫键,设计了五因素四水平正交试验,考察了固液比、十二烷基硫酸钠用量、氨水用量、时间和硫化钠用量五个因素。结果表明:各因素对蛋壳膜二硫键打开的效果影响从大到小为固液比>十二烷基硫酸钠用量>氨水用量>时间>硫化钠量,优化后的工艺条件为每克蛋壳膜添加十二烷基硫酸钠0.37g、硫化钠0.80g,固液比1∶20,氨水占总液比67%,反应时间3.5h。
  采用还原-双酶解法水解鸭蛋壳膜提取粘多糖,通过二次回归正交旋转组合试验探索了双酶水解的酶用量、双酶比例、总水解时间三个因素对粘多糖得率的影响,得到最佳条件为:碱性蛋白酶与胰蛋白酶比例0.10678,水解总时间15.364h,酶总用量66820u/g。在此条件下进行验证试验,D-葡萄糖醛酸得率为6.75mg/g,与理论极值为6.90mg/g接近。
  采用还原-酶解法水解鸭蛋壳膜制备蛋白多肽,设计了三因素三水平正交试验,考察了时间、固液比、酶量三个因素。结果表明:在试验范围内三个因素三个水平的氮得率均在92%左右且差异不大,三个因素的变化对氮得率的影响都很小;三种因素对多肽含量的影响从大到小依次是时间>固液比>酶量;三种因素对氨基酸含量影响从大到小依次是酶量>时间>固液比。最佳条件为反应时间6h,固液比1∶15,酶用量20000u/g,在此条件下鸭蛋壳膜水解液的氮得率约92%,产物多肽中分子量属于活性多肽的占90%以上。
  用制得的鸭蛋壳膜水解液制作护肤品,设计了三因素三水平正交试验,考察了鸭蛋壳膜水解液用量、丙三醇用量、聚乙烯吡咯烷酮用量三个因素。结果表明:三个因素对吸湿率的影响由大到小为丙三醇用量>鸭蛋膜水解液用量>聚乙烯吡咯烷酮用量,对保湿率的影响由大到小为鸭蛋壳膜水解液用量>丙三醇用量>聚乙烯吡咯烷酮用量,保湿率最佳的组合为:鸭蛋壳膜水解液25%,丙三醇15.4%,聚乙烯吡咯烷酮2.93%;吸湿率最佳的组合为:鸭蛋壳膜水解液20%,丙三醇15.4%,聚乙烯吡咯烷酮2.93%。
[硕士论文] 许堃瑞
农业电气化与自动化 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:新鲜鸭蛋在腌制过程,由于其产地、品种、饲养条件的迥异,还有本身的大小、形状和蛋壳厚度都会影响新鲜鸭蛋从鲜蛋到逐渐腌制成为成熟的咸蛋的进程,再加上腌制条件、腌制工艺、腌制技术、腌制设备和操作腌制流程的工人的素质参差不齐,使得咸鸭蛋在腌制完成后品质不一。咸蛋产品出厂包装前需要进行检测并分级,而我国目前的禽蛋分级绝大都数是采用人工操作的,速度慢、效率低、分级准确性差。为了解决上述问题,本文提出了一种群体咸蛋品质在线分选模型。
  该模型利用工业相机、光电传感器和计算机采集输送带上的群体咸鸭蛋动态图像,先对图像进行预处理,去除与咸蛋分级无关的环境图像,然后采用数学形态学运算及去除小面积对象法来确定二值图像的目标区域;根据图像的凸凹程度来判断目标区域是否漏光,应用搜索突变点来消除漏光区域,再用最小二乘法拟合漏光的鸭蛋图像边界;对咸蛋二值图进行标记并提取单个目标区域,应用彩色空间法提取图像的特征描述参数,并建立基于RGB与HSV模型的线性、非线性回归方程,采用最小误差选择法确定分类阈值,最后对咸蛋品质模型进行检验。
  取另外一组咸蛋,将各品质咸蛋样本由人工仔细定级,并做好标记,再将所有的咸蛋不分类别的混合在一起,随机放置于在线分级系统上进行自动分级。分级完成后与事先做好的定级标记进行比较,统计模型正确判断咸蛋类型和误判的数量。结果发现好蛋的最高识别正确率为93%,退溶蛋的识别率为90%,黑黄蛋的识别正确率为97%,最高的总体识别正确率为93%,分级效率为5400枚/小时,表明模型对咸蛋的分级是可行的。
[硕士论文] Abdul Fatah
农产品加工及贮藏工程 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:鸡蛋是大量蛋白质和脂肪的廉价、优质来源,也是人们日常生活中常见的食品。鸡蛋在功能性食品和食品服务场所需求的增加,使得人们对鸡蛋的储藏越来越重视。许多行业用不同方法保存和处理鸡蛋,以期能够进一步改善其营养物质,使之容易消费。
  在这项研究中所采用的设计是CRD(完全随机设计因子)法。采取5个不同的处理方式,每个处理进行三次平行试验,并保留最好的结果。这项研究由四部分组成:第一部分准备蛋清蛋白水解物;第二部分通过SDS-PAGE电泳检测蛋白质的分子量;第三部分利用红外光谱分析蛋白质的结构;第四部分对已取得的蛋清水解物进行进一步的分离并测定各个部分的抗氧化性。
  不同时间、不同水解速度处理的三种蛋清的抗氧化活性的测定使用DPPH自由基清除法进行测量。结果显示,0.799mg/ml水解2小时的鸡蛋清蛋白水解物、0.846mg/ml水解3小时的鸡蛋清蛋白水解物和0.969mg/ml水解3小时的鸭蛋清蛋白水解物对DPPH的自由基清除率都达到了50%。在这三种处理方法下的蛋清水解物抗氧化性最高可分别达到88.22%,89.40%和85.13%。
  SDS-PAGE分析显示对照(三种禽蛋的蛋清)组中卵清蛋白(45kDa)和卵转铁蛋白(75kDa)为主要的蛋白质,含量最高。而三种蛋清的水解物条带要明显降低,大概出现在10-15kDa之间。FT-IR分析显示了三种蛋清水解物具有抗氧化性的结构,如醇、羟基化合物、脂肪族和芳族硝基化合物。
  利用离子交换色谱法分离了具有最高抗氧化能力的两种蛋清水解物。经分离后得到三个洗脱峰,其中峰2得到的蛋白水解物的DPPH活性最高,为60.56%。本研究为进一步发现蛋清中的抗菌蛋白奠定了基础。
[硕士论文] 王晶
农产品加工及贮藏工程 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:本文以鸡蛋蛋清中的卵白蛋白(ovalbumin)、溶菌酶(lysozyme)以及卵粘蛋白(ovomucin)为研究对象,以三种蛋白质的结构与功能为核心,在制备出高纯度和高活性蛋白质的基础上,研究了三种蛋白质在贮藏期间结构与功能性质的变化情况,对三种蛋白质的结构变化与全蛋清功能活性之间的相关性进行了初步探究。主要研究内容和结果如下:
  首先,对ovalbumin在贮藏期间的结构变化情况进行了检测。结果显示在贮藏期间ovalbumin内源荧光强度由125上升至330,推测这种现象主要是由于分子间聚集情况的发生而导致的。圆二色谱中0d的ovalbumin含有大量的α-螺旋和β-折叠结构,是属于高度有序的α+β型蛋白质,其中β-折叠含量最高,占35.3%。Ovalbumin在贮藏期间其结构的有序性下降,无序性上升,无规卷曲结构在贮藏第0d与第50d分别为20.6%与27.5%,红外光谱中显示贮藏0d的ovalbumin的无规卷曲结构含量占20.14%,而贮藏第50d无规卷曲含量上升至24.02%;ovalbumin的Trp拉曼强度由0d的0.45下降至50d的0.14;PHe强度由0.78下降至0.42;505cm-1处的二硫键强度由0.43下降至0.18;在整个贮藏期间Tyr的下降幅度最小,仅下降0.02个单位值。二硫键谱峰强度的下降说明ovalbumin的分子内二硫键发生了断裂,ovalbumin的分子结构变的松散。
  其次,对lysozyme在贮藏期间的结构变化情况进行了检测。Lysozyme的荧光强度在贮藏期间由52上升至723,这说明,lysozyme的三种发色氨基酸(Trp、Tyr以及PHe)的微环境极性在不断下降,推测主要是由于在贮藏期间Trp残基不断包埋于分子内部而导致的。圆二色谱结果显示贮藏0d的lysozyme也含有大量的α-螺旋和β-折叠结构,其中,α-螺旋含量最高,占34.72%。无规卷曲结构由贮藏0d的24.25%上升至贮藏50d的36.52%,说明分子无序度在不断上升。红外谱图中无规卷曲含量第0d与第50d分别为27.62%和37.27%。拉曼结果显示,lysozyme含有4对二硫键,贮藏期间可以观察到二硫键谱峰由520cm-1处逐渐向507cm-1方向移动,这说明链接lysozyme两个结构域的二硫键首先发生了断裂,其次才是lysozyme分子内部的二硫键发生断裂。
  第三,采用多种检测方法对ovomucin贮藏期间的结构变化进行了分析。贮藏期间ovomucin的内源荧光强度由365下降至176。表明在贮藏期间,ovomucin不断变性降解,聚合成程度降低,分子间碰撞程度增加。Ovomucin本身为聚合型分子,在贮藏期间其分子聚合度在下降,分子无序性上升,无规卷曲由26.6%上升至35.8%。Ovomucin的红外光谱结果显示ovomucin的无规卷曲含量在贮藏期间有所下降,表现为1660-1640cm-1处的谱峰面积由0d的28.36%下降至50d的26.34%。这跟其自身聚合程度在不断下降有关。与红外光谱相比,溶液状态下的ovomucin在某种程度上更能代表ovomucin在贮藏期间的改变。
  第四,利用ovomucin与其抗体的特异性结合,采用间接ELISA方法建立了一种快速高效的ovomucin含量检测方法。该方法用于卵粘蛋白的免疫分析,标准曲线的浓度范围是50ng/mL-1000ng/mL;抗体与鸡蛋蛋清内的其他主要杂蛋白(卵白蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶等)间交叉反应率均小于0.01%,说明该方法不仅灵敏度高而且特异性强,可应用于检测禽蛋蛋清内ovomucin的含量。
  最后,本实验对贮藏期间三种蛋白质及蛋清的乳化活性、乳化稳定性、起泡性、泡沫稳定性以及lysozyme和蛋清的溶壁活性、ovomucin和蛋清的凝胶特性进行了测定,并对其进行了双变量相关性分析。分析结果显示,蛋清的乳化活力与ovalbumin的β-折叠和ovomucin的无规卷曲结构呈极显著性相关,显著性差异P<0.01,相关系数分别为-0.936与0.919;蛋清乳化稳定性主要受lysozyme的α-螺旋和无规卷曲影响,相关系数为0.859和0.908,显著性差异P<0.05,属显著性相关;蛋清起泡能力主要与ovalbumin的β-转角有关,相关系数0.914,显著性差异P<0.05;泡沫稳定性主要与lysozyme的有序结构(α-螺旋、β-折叠和β-转角)有关,其中与β-转角为极显著性相关,显著性差异P<0.01,与α-螺旋与β-折叠为显著性相关,P<0.05;溶壁活性与凝胶特性分别与lysozyme的β-折叠和ovomucin的无规卷曲高度相关,显著性差异均小于0.01。
[硕士论文] 钟雄斌
农业电气化与自动化 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:我国是猪肉消费大国,猪肉品质关系到消费者的健康安全和市场经济效益。采用光谱技术所建立的猪肉品质多元校正模型的预测性能是否具有稳定性,直接影响着分析结果的精确度和准确度。多元校正模型包含的样本信息(如品种、产地、粒度等)变化或者测量条件变化(如温度、湿度等)可能会导致已建立的模型不适宜预测新样本,故利用光谱技术对猪肉品质进行检测时,由于品种的不同可能导致已有光谱模型对其他品种样本的预测性能降低,模型缺乏稳健性和适用性。然而,重新建立一个稳健、可靠、准确的检测模型是一个需要消耗大量人力、物力和时间的复杂过程。因此,开展猪肉品质检测模型的维护方法研究以提高光谱检测模型的适用性和可靠性具有重要的科学意义和良好的应用前景。
  该文以湖北地区山黑猪、零号土猪两个品种样本作为研究对象,研究了基于高光谱成像技术的猪肉样本pH值定量检测方法和嫩度等级定性检测方法。通过比较不同光谱预处理方法和建模方法对光谱检测模型性能的影响,确定了猪肉不同品质模型的最优预处理方法和最优建模方法。对猪肉品质光谱检测模型的适用性进行检验研究,并比较不同模型修正和模型传递等维护方法对模型的维护效果,确定了猪肉不同品质模型的最优维护方法。主要研究结果如下:
  1)研究了不同样本集划分方法对猪肉pH值定量分析的划分结果及其对模型性能的影响,确定了SPXY法最适用于猪肉pH值定量分析的样本集划分。分别采用随机法、KS法和SPXY法3种样本集划分方法对山黑猪pH值数据进行划分,并采用偏最小二乘法建立模型。结果表明:随机法和KS法所建模型性能较差,SPXY法划分样本集所建模型的交叉验证相关系数Rc和预测相关系数Rp均优于其他两种方法。
  2)比较了不同光谱预处理方法和定量建模方法对山黑猪pH值定量分析模型的性能影响,确定了归一化方法为山黑猪pH值定量分析的最优光谱预处理方法和偏最小二乘法为山黑猪pH值定量分析的最优建模方法。采用SPXY法将山黑猪样本划分了校正集和测试集,分别采用不同光谱预处理方法对猪肉高光谱数据进行处理,并采用主成分回归法、偏最小二乘法和支持向量机法3种定量建模方法建立模型。结果表明,采用偏最小二乘法对山黑猪pH值进行检测的效果较其他两种建模方法更优,当采用该法建模时,光谱经归一化预处理后所建立的pH值定量分析模型性能最优,该模型对校正集和测试集的Rc、Rp、RMSECV以及RMSEP分别为0.885、0.864、0.1129和0.1059。
  3)开展山黑猪pH值定量分析模型的适用性检验研究。采用主成分得分空间分布图、马氏距离分布图定性地对山黑猪pH值检测模型的适用性进行检测,并首次提出采用Fisher值图定量地对模型的适用性进行分析,随后采用模型交叉验证方法进行验证,结果表明山黑猪pH值定量分析模型直接对零号土猪待测样本的预测相关系数Rp仅为0.415,预测误差RMSEP达到0.1804,这表明山黑猪模型直接用于零号土猪样本时的预测性能较差,因此需要对山黑猪模型进行传递修正。
  4)基于SPXY法添加样本的模型更新方法可在一定程度上改善山黑猪pH值检测模型对零号土猪样本的预测性能。比较了RS法、KS法和SPXY法选取典型零号土猪样本添加到山黑猪pH值校正模型中对模型适用性的影响。结果表明,选取的新样本分布情况对山黑猪模型的修正效果有影响,SPXY法因同时兼顾样本的光谱特征和浓度特征而能选择出分布范围广的代表性样本,故确定SPXY为模型更新算法中代表性新样本的选取方法。当采用该法向山黑猪pH值模型校正集添加14个零号土猪新样本时,修正后模型对零号土猪待测样本的预测相关系数Rp由0.415提高至0.797,提高幅度为92.05%,RMSEP由0.1804降低为0.1121,下降37.86%。
  5)研究了斜率/截距方法对山黑猪pH值检测模型的适用性影响。试验结果表明,斜率/截距方法对山黑猪pH值检测模型的修正效果有限,故该方法仅可降低高山黑猪pH值检测模型对零号土猪样本的预测均方根误差,RMSEP由0.1804降低为0.1343,仅下降了25.54%。
  6)提出了一种基于光谱值校正传递算法的模型维护方法,以改善山黑猪pH值模型对零号土猪待测样本的预测性能。该方法不改变山黑猪原模型,通过消除品种之间的光谱值差异达到改善模型适用性的效果。采用该方法对待测零号土猪样本的光谱校正后,山黑猪原模型对零号土猪样本的预测相关系数Rp由0.415提高至0.837,提高了101.69%,预测误差RMSEP由0.1804降低至0.0856,下降了52.55%。
  7)建立了基于高光谱成像技术的山黑猪猪肉嫩度等级定性识别模型。分别采用无处理、标准化、去趋势变换、多元散射校正以及归一化及其各种方法的组合等预处理方法对光谱数据进行处理,并采用K-最邻近法(KNN)、偏最小二乘-判别分析法(PLS-DA)和支持向量机-判别分析法(SVM-DA)3种模型识别方法建立嫩度等级识别模型。结果表明,归一化处理光谱所建SVM-DA模型对山黑猪样本嫩度等级的识别效果最优,其对校正集和测试集样本的识别正确率均达到100%。
  8)全局混合模型、模型更新方法和光谱信号补正方法均有助于提高山黑猪嫩度识别模型对零号土猪样本嫩度的识别正确率。建立了全局混合模型对不同品种猪肉样本的嫩度等级进行识别,结果表明模型对不同品种猪肉样本的识别正确率均达到80%以上,模型的适用性优于单一品种所建模型;采用模型更新方法向山黑猪嫩度等级SVM-DA原模型校正集添加20个零号土猪样本时,修正后模型对零号土猪样本的识别正确率由50%提高至76.7%;光谱信号补正方法通过补正不同品种猪肉样本的光谱信号差值后,模型对零号土猪样本的识别正确率由直接预测时的50%提高至73.3%。
  9)光谱值校正方法可有效地改善山黑猪嫩度等级SVM-DA原模型的适用性。该法首先分别计算不同嫩度等级样本的光谱转换矩阵,然后以所得的矩阵重构零号土猪待测样本光谱数据。当待测样本光谱重构后,山黑猪嫩度等级原模型对零号土猪样本的识别正确率从直接识别时的50%提高至100%。
[硕士论文] 李春艳
农产品加工及贮藏工程 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:鸡蛋中的卵黄高磷蛋白(phosvitin)是已知所有蛋白质中磷酸化程度最高的蛋白质,含磷量占蛋黄总磷量的80%,是鸡胚骨骼发育中矿物质磷的主要来源。本文以phosvitin作为研究对象,围绕着phosvitin对鸡胚胎骨骼发育的影响开展了系列工作。主要研究内容和研究成果摘要如下:
  研究了鸡胚胎发育期间与骨骼发育相关指标的变化规律。发现鸡胚胎发育9-10d是一个转折点:蛋清pH在9d胚龄以后,逐渐趋于稳定,保持在pH7.5左右;蛋黄pH在10d胚龄时突然上升,达到最大值8.19,之后呈小幅度下降,在pH7.5附近相对稳定;蛋黄总磷含量在10d胚龄时出现急剧下降,这与胚胎在9d胚龄开始骨化有很大相关性。比较分析蛋黄磷含量的降低速率、碱性磷酸酶活力变化以及鸡胚体长的增长发现三者的变化趋势基本一致,先上升后下降。在14-16d总磷下降速率最快,平均达到0.027mg/g.d,ALP活力也达到最大值1.12U/gprot,体长增长率的变化有一定滞后,在17d胚龄增长率达到最大,1.17cm/d,这与蛋黄中的磷被转移到胚胎然后被胚胎骨骼发育利用需要一定时间有关。
  研究了胚胎发育的9-20d phosvitin的变化。变性凝胶电泳和非变性凝胶电泳的实验结果分析发现了胚胎发育期间phosvitin分子量逐渐下降,磷氮比的测定结果和对红外原始图谱的分析都证明了孵化期间phosvitin磷酸根含量下降,通过红外光谱和圆二色谱数据分析发现phosvitin二级结构在孵化期间γ-无规则卷曲和β-转角结构向α-螺旋结构发生了转化,phosvitin向有序性变化。综合分析P/N比、二级结构、与上一章中的ALP、体长增长率,这些指标的变化最快最高的阶段在时间和区间上都表现出一致性,在13-16d胚龄phosvitin的磷酸根含量降低最明显,蛋白质结构有序性增强,γ-无规则卷曲和β-转角结构向α-螺旋结构发生了转化,碱性磷酸酶、鸡胚体长大幅度的增加。证明了在phosvitin与鸡胚骨骼发育密切相关,并且是通过脱磷酸化提供鸡胚骨骼形成需要的磷。
  研究了0、50、100、500、1000μg/mL phosvitin处理MC3T3-E1细胞24h、48h后对细胞生长影响。CCK-8法检测phosvitin对MC3T3-E1细胞的增殖活力的影响,流式细胞仪法分析了phosvitin对细胞细胞周期和细胞凋亡的影响,结果表明:低浓度蛋白可以促进增殖,抑制细胞凋亡;高浓度蛋白会抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。phosvitin浓度100μg/mL时效果最好。100μg/mL phosvitin处理MC3T3-E1细胞48h后:细胞增殖活力达到108.61%,细胞增殖率达到23.49%,显著高于对照组及高浓度组;细胞正在凋亡率为6.42%,已经凋亡率为2.47%,显著低于对照组和高浓度组。
  研究了空白、Pv、Pv+Vc、Pv+β-GP、Vc+β-GP5种矿化诱导剂对MC3T3-E1细胞矿化的影响。实验首先确立诱导矿化实验中最佳接种密度为1×104/cm2。对诱导矿化期间细胞内ALP活力、矿化结节含量以及相关基因表达量结果分析发现phosvitin单独诱导不能引起细胞矿化但是可以促进细胞成骨活动,21d时ALP活力达到1.0U/gprot,显著高于阴性对照组,并且显著上调Col-ⅠmRNA、OCN mRNA的表达,对Runx-2 mRNA、BMP-2 mRNA表达量的影响较弱,茜素红染色结果呈阴性。Pv+β-GP组可以诱导矿化,21d时ALP活力达到2.1U/gprot,稍低于阳性对照组,对Runx-2 mRNA、BMP-2 mRNA、Col-ⅠmRNA、OCN mRNA都有显著上调作用,茜素红染色结果呈阳性,与阳性照组相比均无显著差异。我们推测诱导矿化的过程中phosvitin替代了Vc的作用,作为强抗氧化剂/还原剂参与合成胶原,进而促进成骨活动。Phosvitin可能是通过上调Col-ⅠmRNA和OCN mRNA的表达,促使其下游产物ALP表达水平增加,进而诱导矿化活动增强。但是phosvitin对成骨细胞影响详细的细胞学和分子学机制仍需进一步研究确定。
[硕士论文] 王伟煜
安全技术及工程 哈尔滨理工大学 2014(学位年度)
摘要:随着生活水平的提高,牛奶作为一种营养丰富的食品被人们所接受。近年来,牛奶行业规模不断扩大,产量与销量不断攀升,但牛奶食品安全问题也暴漏出来。本文通过光电检测技术的引入对牛奶食品安全问题进行了以下工作:
  1.以牛奶中最具代表性的纯牛奶、牛奶食品安全问题多发环节之一生产环节、牛奶生产的典型工艺超高温灭菌为研究方向。确定检测对象为牛奶中蛋白与脂肪含量、检测方法、检测方式为生产中在线检测、检测节点:研究超高温灭菌纯牛奶生产工艺流程;根据工艺划分对超高温灭菌纯牛奶进行预先危害性分析,把危害性显著的工艺定为关键工艺;对于某一关键工艺如果采取相应措施可以把危害控制在可接受范围,则认定其为可以引入检测的节点。
  2.设计检测装置包括:光源、光源驱动电路、光电接收转换、前置放大电路、模数转换电路、温度控制电路、最小系统、人机界面及通信电路;分析影响生产中在线检测及检测准确性的因素,完成软件流程设计与硬件测试。
  3.综合之前的危害分析,运用重要度与层次分析的方法说明牛奶蛋白脂肪与牛奶食品安全的关系并根据检测结果划分牛奶食品安全等级。
  综上所述,本文通过对牛奶中蛋白脂肪进行检测进而对牛奶中蛋白脂肪与食品安全的相关性作出了研究。
[硕士论文] 陈建文
农业机械化工程 华中农业大学 2013(学位年度)
摘要:牛肉质量分级,经济效益显著。分级的牛肉比不分级的牛肉,价钱要高出几倍,甚至上十倍。
   牛肉大理石花纹等级是评价牛肉质量的最重要的指标。分形维数、大理石花纹面积比率与大理石花纹等级密切相关。对牛肉质量进行分级,主要是观察牛眼肌处的大理石花纹。眼肌是指牛背最长肌的横断面,大理石花纹是牛胴体第12至13或第6至7胸肋间背最长肌肌内脂肪。
   当前世界各国的牛肉分级方法,主要是视觉评定。由专业的牛肉质量等级评定师,观察牛的第12至13或第6至7胸肋处的背最长肌肌内脂肪的丰富程度,然后再与各国制定的牛肉大理石花纹标准图版进行比较,依据经验确定大理石花纹等级。这种方法存在着主观性。
   本课题吸纳了一些前人牛肉分级研究方面的成果,建立了预测牛肉大理石花纹等级的数学模型。本论文主要完成了以下几方面的工作:
   1)对中美两国牛肉大理石花纹标准图版,研究了它们的背最长肌的提取方法和分形维数计算方法。找到了提取背最长肌的方法,逐步提取出背最长肌。针对赘肉与背最长肌连接紧密的特殊图像,运用了人工添加椭圆法、迭代腐蚀膨胀法、人工添加曲线法。经过比较,这三种方法中最好的方法是人工添加曲线法。分形维数的计算,采用了传统的计盒维数法、差分计盒维数法、信息维数法、改进过的计盒维数法。四种方法进行比较,最佳方法为改进的计盒维数法。
   2)采集了60个牛肉眼肌样本,拍摄了样本的图片,并进行分级。运用Matlab软件,分几个步骤,逐步提取出背最长肌。针对赘肉与背最长肌连接紧密的样本,使用人工添加曲线法,来获取背最长肌。
   3)测定了样本大理石花纹中与等级密切相关的两个特征参数,即改进的计盒维数值和大理石花纹面积比率,并进行了单因素分析,得出这两个特征参数对等级有极显著性的影响。
   4)基于BP神经网络建立了大理石花纹等级的预测模型。等级为3、4、5、6、7的样本,每个等级随机选出两个样本。使用50个样本的数据,运用BP神经网络,预测这10个样本的等级,准确率为73%。
   总之目前国内外,牛肉等级的评定主要是采用人工视觉评定的方法,主观性较强。本论文使用了机器视觉、BP神经网络等方面的知识,对牛肉的质量分级,进行了较好的研究。机器视觉、分形理论,以及计算机图像处理,被各国肉类科学家认为是研究实现牛肉分级最有前途的技术手段,这些技术手段在论文中都有体现。
[博士论文] 李慧
农产品加工及贮藏工程 内蒙古农业大学 2013(学位年度)
摘要:通过测定192头公猪背最长肌的肌纤维特性、糖酵解潜力、理化品质和感官品质,研究了皮特兰基因型、莱克多巴胺和免疫去势对肌纤维特性、糖酵解潜力和肉品质的影响,并分析了各项指标之间的相互关系。结果表明:
   1.如提高皮特兰基因型到50%,显著降低宰后24小时猪背最长肌主观色泽评分、大理石花纹分数(P<0.05);增加剪切力值、糖酵解潜力水平(P<0.05);提高猪肉感官品尝中的多汁性(P<0.05)、增加公猪异味(P<0.01);减少ⅡA型肌纤维比例和ⅡB型肌纤维比例和相对面积的趋势(P<0.10),有增加ⅡX型肌纤维比例和相对面积的趋势(P<0.10)。
   2.莱克多巴胺在P<0.05水平下显著降低肌肉亮度值、红度值、白度值及糖酵解潜力水平,增加ⅡX型肌纤维横截面积和剪切力值,极显著降低嫩度(P<0.001)。
   3.免疫去势在P<0.05水平下显著提高剪切力值和糖酵解潜力水平,降低大理石花纹评分,有增加TypeⅡA的肌纤维相对面积和公猪异味的趋势(P<0.10),在不添加莱克多巴胺的情况下,免疫去势增加猪背最长肌的多汁性。
   综合上述研究结果得到:相比莱克多巴胺和去势方法,皮特兰基因类型对肉品质的影响较大。25%皮特兰×75%杜洛克猪被选为最优猪种。皮特兰基因型、免疫去势、莱克多巴胺同时作用提高瘦肉率的同时,猪肉肌纤维特性有一定改变,但肌肉品质并未出现严重劣化。
[博士论文] 单媛媛
食品科学 华中农业大学 2013(学位年度)
摘要:粘蛋白是生物机体内最古老的防御体系的重要成分之一,在众多生命活动过程中发挥着极其重要的作用。然而几乎所有粘蛋白目前已知的功能均是在哺乳动物中发现的,对禽蛋中粘蛋白的研究相对较少。本文以鸡蛋蛋清中的粘蛋白(ovomucin)为研究对象,以ovomucin的结构与功能为核心,在纯化出高纯度和高活性蛋白质的基础上,研究了提高ovomucin溶解性的方法,并对其体外抗菌、抗病毒感染的活性与生化机制开展了系列研究工作。主要研究内容和结果如下:
   首先采用分步等电点盐析结合凝胶过滤色谱法从鸡蛋清中分离纯化ovomucin,其过程为:50 mmol/L CaCl2溶液制备较高含量的ovomucin,后用50 mmol/L MgCl2进一步除去溶菌酶,再经Sephacryl S-300 HR凝胶过滤法纯化,进样体积为2 mL,洗脱液为含0.05 mol/L MgCl2的Tris-HCl(20 mmol/L pH8.4),流速为0.5 mL/min。质谱鉴定结果表明所得蛋白质为ovomucin,不含其它蛋白质肽段信息。HPLC和SDS-PAGE分析结果显示其纯度为99.13%。采用此方法制备的ovomucin终产率为(57.03±1.22)%,总回收率为(40.87±0.76)%。纯化后的ovomucin对新城疫病毒(NDV)LaSota株的半数抑制浓度(IC50)为5.78±0.09μg/mL。酶联免疫吸附实验(ELISA)结果表明低浓度MgCl2可以显著提高ovomucin对NDV的粘附能力(P<0.05)。氨基酸分析显示获得的ovomucin富含Ala,Thr, Pro和Val,具有典型的粘蛋白特性,同时含有较多硫酸基、唾液酸、糖醛酸和己糖,具有作为抗菌抗病毒研究的潜在结构基础。
   研究了提高ovomucin溶解性的方法与机制。溶解性测定结果表明,水不溶性ovomucin在1 mol/L精氨酸中溶解度为(21.14±1.47)%,是其在蒸馏水(1.96%)中的10倍以上。荧光猝灭实验表明精氨酸在低浓度时通过静电作用与ovomucin形成静态复合物,二者在不同温度下结合常数Ka分别为:3.282 L.mol-1(298K)、2.404 L·mol-1(308K)和1.904 L·mol-1(313K),结合位点数n分别为1.141(298K)、1.130(308K)和1.118(313K)。电导法和芘荧光探针实验结果发现,精氨酸浓度小30 mmol/L时主要通过静电作用与ovomucin结合,未引起ovomucin结构的显著变化;精氨酸浓度在30-100 mmol/L时,复合体中出现大量疏水微区。ANS和FT-IR分析结果表明,在精氨酸浓度大于100 mmol/L以后,ovomuicn二级结构中的无规则卷曲增加,折叠结构及螺旋结构减少,分子间聚集程度减弱,ovomucin的表面疏水性显著降低。粘附试验结果表明,添加100 mmol/L精氨酸并未导致ovomucin对NDV粘附活性的显著降低(P>0.05),因此可以应用精氨酸实现ovomucin的非变性有效增溶。
   测定了ovomucin的抗菌活性及其对环境条件的稳定性。结果表明:ovomucin对大肠杆菌和沙门氏菌最小抑菌浓度分别为0.05 mg/mL和0.4 mg/mL,相应的抑菌率分别为(61.23±6.5)%和(34.34±4.4)%,而对金黄色葡萄球菌则无明显抑制作用。细菌生长曲线的测定结果发现,0.05 mg/mL的ovomucin可以有效抑制大肠杆菌的增殖,但其仅能延缓沙门氏菌的对数生长期。粘附试验结果表明,ovomucin对三种细菌均具有一定的粘附能力,ovomucin浓度由2.5μg/mL增大到30μg/mL时,其对大肠杆菌的粘附率由19.3%升高到64.4%,对沙门氏菌的粘附率由22.1%升高到68.3%,对金黄色葡萄球菌的粘附率由16.3%升高到68.5%,但相同粘度的ovomucin对不同细菌粘附效率之间无显著性差异(P>0.05)。不同pH处理对ovomucin抗菌活性影响显著(P<0.05),在酸性条件下ovomucin对大肠杆菌的抑制率较低,随着pH升高抑菌率增大,在pH7-9条件下对大肠杆菌的抑制效果最好。Ovomucin的抗菌活性对温度具有较好的耐受性,即使经100℃处理10 min,ovomucin对大肠杆菌的抑菌率仍可达60%以上。
   在建立ovomucin抗病毒模型的基础上,通过细胞病变程度、细胞存活率、病毒抑制率以及血凝抑制等指标,评价ovomucin对流感病毒H5N1、H1N1以及新城疫病毒LaSota、Ⅴ-4和Ⅳ系的抑制作用,结果发现ovomucin对五株不同毒株均具有一定的抑制效果,与病毒混合后能明显降低病毒感染力,0.25 mg/mL的ovomucin对H5N1、H1N1以及新城疫病毒Ⅱ、Ⅴ-4和Ⅳ系的血凝抑制率分别为(72.89±6.02)%、(64.29±7.94)%、(71.15±6.41)%、(60.32±9.16)%和(74.26±7.35)%。细胞实验发现ovomucin对H5N1早期吸附进入细胞的抑制效果最好,0.25 mg/mL的ovomucin对H5N1在MDCK细胞上的病毒抑制率为77.85%。不同来源粘蛋白对H5N1的抗病毒活性存在差异,ovomucin的对H5N1的抑制效果高于牛下颌腺粘蛋白,但是略低于猪胃粘蛋白。
   为进一步探讨ovomucin抗H5N1的生化机制,通过改变加药方式,从体外细胞水平的抗病毒作用环节结合直接显微观察探讨ovomucin体外抗流感病毒的作用环节,结果表明ovomucin抗病毒作用是通过抑制病毒感染细胞早期的吸附或进入过程实现的。血凝实验和神经氨酸酶抑制实验结果证明ovomucin主要通过抑制H5N1表面血凝素(HA)识别细胞的过程达到抑制病毒侵染的目的,同时ovomucin也起到一定的保护细胞作用。ELISA和双偏振极化干涉测量(DPI)结果表明ovomucin可以与HA抗原发生有效结合;DPI实验进一步分析ovomucin与H5N1表面HA的相互作用过程,发现二者以嵌入式的方式发生结合。因此ovomucin抗H5N1感染的机制为:ovomucin与HA通过嵌入式结合,抑制HA对MDCK细胞受体的识别,从而影响H5N1侵染早期对宿主细胞的吸附和侵入,进而抑制病毒增殖,在这个过程中还伴随着ovomucin和宿主细胞表面发生相互作用来保护细胞免受病毒侵染的过程。
   采用傅里叶变换红外光谱法和二维相关分析技术研究了ovomucin构象转变与温度之间的关系。结果显示,25-95℃升温过程中ovomucin分子二级结构的变化次序依次为:α-螺旋,β-折叠,β-转角,无规卷曲。Ovomucin构象在pH8.4-9.0之间有中间体存在。红外光谱拟合结果表明低浓度Mg2+与ovomucin糖基结合,未造成ovomucin二级结构的显著改变。而高浓度Mg2+会影响ovomucin的肽骨架及其空间构象,使ovomucin的无规则卷曲结构减少,β-转角和β-折叠结构增加。动态光散射结果表明添加0.1倍质量浓度的Mg2+可以使0.5 mg/mL的ovomucin的平均粒度由60.23nm下降到51.39nm,说明Mg2+的加入会使ovomucin的分子结构变得更为紧密。pH诱导ovomucin构象与活性的分析结果表明,随着溶液中β-转角含量由20.7%增加到39%,ovomucin对H5N1血凝的抑制率也相应由53.9%提高到73.1%,Mg2+对ovomucin结构与功能的影响结果发现,加入Mg2+以后,ovomucin二级结构中的β-转角含量由19.11%增加到22.96%,相应的对病毒的粘附率可以由30%左右提高到68.9%。上述结果说明ovomucin结构有序性和紧密程度越高,其抗病毒活性越强。
[硕士论文] 孙铂
农业机械化 河北农业大学 2013(学位年度)
摘要:在农业工程中,肠衣生产是颇具价值经济活动。肠衣在测量长度过程中多为工人手工测量,测量效率低,误差大,因肠衣长度的误差极易引起交易双方的纠纷。针对此现状,本研究前期研发了一种基于PLC和触摸屏技术的肠衣长度测量设备,自动化程度高,可以提高测量肠衣的精度和速度,解决手工测量误差,提高生产效率。但在肠衣测量实验过程中发现,肠衣在湿润条件下具备光滑、油腻和弹性强等特性并且肠衣上存在水和油等物质,塑料和不锈钢制造的驱动轮经机械加工和抛光后表面光亮,平整,但与水、油有很好的吸附能力,肠衣与驱动轮之间有时发生粘连现象,影响肠衣测量机推广应用。如何使驱动轮表层产生疏油和疏水特性是解决肠衣粘连问题的重要研究途径。
   查新资料表明一些纳米材料具有疏油、疏水等特殊功能。前期研究发现磁控溅射TiN薄膜技术可在不锈钢基体制备纳米材料薄膜。在肠衣测量机驱动轮表面设计一层合适的纳米材料涂层,大幅度降低驱动轮表面的吸附能力,能消除与肠衣的粘连问题。磁控溅射技术是制备纳米薄膜方法之一,相比较其他薄膜制备方法具有沉积速度快、基体温升低、对膜层的损伤小、膜层与基片结合好、纯度高、致密性好,成膜均匀性好等优点。对于大部分材料,只要能制成靶材就可以实现溅射,在大面积零件上能够获得厚度均匀的薄膜,通过改变工艺参数和条件控制有可能形成纳米级薄膜。
   按照上述理论研究基础,本研究选择磁控溅射技术,应用了SP-0707AS型中频反应磁控溅射镀膜机。由于肠衣多用于食品和医疗等领域。因此,肠衣测量机驱动轮材料选用不锈钢制造,表面涂层材料需要选取Ti、N2等对人体无毒无害的材料。
   通过实验设计,开展多轮实验研究,通过调整溅射金属材料和工艺参数,使溅射形成的化合物产生堆积效应,在不锈钢试片上制备出纳米级薄膜材料。经过疏油疏水实验,验证不锈钢试片纳米级薄膜具备疏油疏水效果,采用扫描电镜观察和测量了不锈钢表面涂层形态和尺寸,使用盐雾试验机测定了涂层的抗蚀能力,采用划格试验法测试了涂层的附着力,在不锈钢试片上研究出制备疏油疏水性能良好的纳米材料涂层的工艺参数,为开展肠衣测量机驱动轮溅射化合物涂层建立了工艺基础。
   综上所述,论文研究了肠衣测量机驱动轮表面纳米化合物薄膜的工艺及参数,有效解决了实际零件薄膜在制备过程中产生的漏镀现象和肠衣在驱动轮上粘连问题。为肠衣测量机工业化生产和农业工程领域推广应用打下良好的基础。
[硕士论文] 刘竹青
食品科学 浙江大学 2013(学位年度)
摘要:我国是最大的鸭蛋消费国和贸易国,总产量为禽蛋总产量的20.3%,占世界鸭蛋总产量的70%。我国鸭蛋加工比重虽然高达80%以上,但产品一般是以成鸭蛋、皮蛋等再制蛋的形式进入消费领域,深加工产品很少。鸭蛋中的卵磷脂、胆固醇、蛋黄油等高附加值生物活性物质有待开发。本课题主要研究了鸭蛋黄中活性物质联产高效的分离提取技术,以此推进鸭蛋的深加工,赋予鸭蛋产品高附加值。主要研究:(1)乙酸乙酯精制蛋黄卵磷脂工艺的研究;(2)蛋黄油提取工艺的研究;(3)胆固醇分离工艺的研究;(4)蛋黄脂质脂肪酸成分分析及分布的研究。
   采用乙酸乙酯精制卵磷脂,设计了四因素三水平正交试验考察了时间、料液比、精制温度、精制次数四个因素。结果表明:各组试验的卵磷脂回收率均在92%以上,脱脂率均达到94%以上;四种因素对脱脂率的影响次序为时间>料液比>精制温度>精制次数;最佳组合为料液比1∶4、时间20min、精制次数5次、精制温度0℃,在最佳条件下的回收率和脱脂率均高达98%以上。经高效液相色谱测定,精制后卵磷脂中磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)含量分别为13.05%、65.39%。
   用乙醇从蛋黄渣里提取蛋黄油,采用二次回归正交旋转组合试验考察了料液比、提取温度、提取时间三个因素。结果表明:各因素对提取率的影响次序为料液比>提取温度>提取时间;最优条件为料液比1∶12、提取温度81.64℃、提取时间52.30min,理论极值为94.30%,在最佳试验条件下,提取率可达92.60%,与理论值接近。
   分别采用了β-环糊精包合法和沉淀法来分离胆固醇。采用β-环糊精分离胆固醇中,通过预试验和正交试验考察了温度、用水量、β-环糊精(β-CD)用量、搅拌时间四个因素。结果表明:四种因素对胆固醇分离的影响次序为温度>用水量>β-CD用量>搅拌时间;最佳组合为β-CD用量0.4(w/w)、加水量0.8(w/w)、温度30℃、搅拌时间20min;两次验证试验中,胆固醇含量由7.5%降低至2.65%,含量降低了64.67%。采用沉淀法分离胆固醇中,通过正交试验考察了静置温度、静置时间、稀释倍数和沉淀次数四个因素。结果表明:四种因素对胆固醇分离的影响次序为静置温度>稀释度>静置时间>沉淀次数,最佳组合为静置温度15℃、静置时间36h、稀释倍数2(w/w)、沉淀次数3次;两次次试验中,1/3以上的胆固醇被分离出来,所得胆固醇纯度为47%左右。β-环糊精包合法的胆固醇分离效果优于沉淀法,但β-环糊精包合法的油脂损失严重,沉淀法分离胆固醇的油脂损失少,操作和所需仪器简单。
   根据所得的最优工艺条件,提取分离蛋黄油和卵磷脂,测定鸭蛋黄总脂质、甘油三酯及卵磷脂的脂肪酸组成和分布,测定结果与鸡蛋黄进行比较分析。鸭蛋黄与鸡蛋黄总脂质组成基本一致。鸭蛋黄总脂质的饱和脂肪酸(SFA)含量低于鸡蛋黄,而且不饱和脂肪酸(UFA)含量高于鸡蛋黄。鸭蛋黄的n-3系列的脂肪酸含量高于鸡蛋黄,其中鸭蛋黄的花生四烯酸(ARA)和α-亚麻酸含量高于鸡蛋黄,而且还含有二十碳五烯酸(EPA)。两种蛋黄总脂质的n-3/n-6均未达到最佳比例,PUFA/SFA均接近最佳比例。从必需脂肪酸的种类、含量及其比例看,鸭蛋黄总脂质比鸡蛋黄总脂质更佳。
   鸭蛋黄甘油三酯(TAG)脂肪酸与鸡蛋黄TAG脂肪酸基本相似,鸡蛋黄TAG中不含C20∶3n-6和EPA。鸭蛋黄TAG的SFA含量低于鸡蛋黄,UFA含量高于鸡蛋黄。鸭蛋黄TAG的亚油酸含量低于鸡蛋黄,但是鸭蛋黄TAG的花生四烯酸(ARA)、二十二碳五烯酸(DPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)都高于鸡蛋黄。两种蛋黄TAG的PUFA/SFA都符合世界卫生组织建议的最佳比例,但是n-3/n-6都未达到最佳比例。鸭蛋黄TAG的脂肪酸组成大部分与人乳相似,是母乳代替品中较理想的天然油脂。
   鸭蛋黄PL脂肪酸与鸡蛋黄PL脂肪酸基本相似,鸭蛋PL不含C20∶3n-9,而鸡蛋黄PL中不含EPA。鸭蛋PL的SFA含量低于鸡蛋黄PL,PUFA高于鸡蛋PL,鸭蛋黄PL的ARA、EPA、DPA都高于鸡蛋黄PL。鸭蛋黄PL的n-3系列和n-6系列的PUFA都高于鸡蛋PL。鸭蛋黄PL的n-3/n-6符合世界卫生组织建议的最佳比例,两种蛋黄PL的PUFA/SFA均未达到最佳比例。鸭蛋黄PL的脂肪酸比例比鸡蛋黄PL更合理,鸭蛋黄PL比大豆磷脂更加有益于人类健康。
[硕士论文] 姚冬芹
临床兽医学 南京农业大学 2012(学位年度)
摘要:羽毛中蕴含了大量潜在的有用蛋白质和氨基酸,我国羽毛角蛋白资源丰富,可以作为优质饲料蛋白。羽毛废弃物的处理方法很多,采用微生物发酵的方法生产的发酵羽毛粉蛋白饲料的营养价值得到极大的提高,但是在发酵过程中会产生大量的氨气等刺激性气体,造成严重的空气污染,而且导致了氮素的大量损失。目前国内外治理恶臭气体的各种技术中生物除臭具有处理效率高,无二次污染、费用低廉和管理维护方便等优点,被广泛的应用。本试验的主要目的是优化发酵工艺,从而减少氨气的产生,对于已经产生的氨气采用微生物重新吸收、利用的方法减少氨气的排放。
   首先对羽毛粉的发酵进程进行了监测,连续5d监测可溶性蛋白含量、氨态氮含量、发酵液pH、硼酸pH、发酵残渣的重量的变化趋势,通过上述指标的变化了解发酵过程中氨气释放规律。结果显示羽毛粉发酵过程中可溶性蛋白含量和氨态氮含量在前3d逐渐上升,第4d后开始降低。反映氨气释放的指标发酵液pH、硼酸pH在5d内一直持续上升,然后维持在较高的水平。发酵残渣的重量在5d内一直持续的下降。氨气的释放与羽毛粉的降解存在正相关。
   然后在了解氨气释放规律的基础上,通过优化发酵条件从而调控氨气的产生。对培养基的含水量、初始pH、羽毛粉和麸皮的比例等条件进行优化,结果显示在不降低发酵效率的同时最大限度的减少氨气释放的发酵条件为:培养基初始含水量为55 mL,初始pH为7.5,羽毛粉与麸皮比例1∶1,发酵周期为4d,培养温度为37℃,培养箱的湿度为50%。在这样的发酵条件下可以减少氨气的释放,同时说明可以通过控制发酵条件减少氨气的产生。
   最后在发酵条件优化的基础上,采用微生物混合发酵的方法消除释放出来的氨气。试验分别从新鲜粪便中分离能利用氨水的细菌,从发酵的鸡粪便中分离酵母菌,从堆肥中分离硝化菌,对分离到的微生物进行鉴定并对其混合发酵消除氨气释放的效果进行检测。结果从各种样品中分离到3种蜡样芽胞杆菌,2种酵母菌,1种粪肠球菌。除臭效果表明蜡样芽胞杆菌1能降低发酵过程产生的氨气且不影响发酵效果,但差异并不显著。其他各种菌的降低氨气的效果不好。
   通过试验初步表明通过调控发酵条件可以降低发酵过程中的氨气的产生,微生物降低氨气的产生还需要进一步的研究。
[硕士论文] 刘宝
临床兽医学 南京农业大学 2012(学位年度)
摘要:合理加工和利用我国丰富的羽毛资源,既可以减少羽毛对环境的污染,又能为社会生产、畜牧业发展等提供蛋白质资源。用微生物降解羽毛角蛋白的方法既经济又环保,近来受到人们广泛地关注。目前发现的可降解羽毛角蛋白的微生物中细菌种类最多,尤以芽孢杆菌最多,但是现在发现的大多数菌种的酶活力不高,离工业应用要求还有不少的差距。以人工诱发突变为基础的微生物诱变育种,具有速度快、收效大、方法简单等优点,是实验室研究及工业生产中最常采用的优良菌株选育方式。由于紫外线(ultraviolet ray, UV)和微波诱变设备成本低,实验操作简单,常用作实验室诱变育种。烷化剂是芽孢杆菌诱变育种中最常使用的诱变剂,而硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)又是最常用的烷化剂之一。诱变育种时一种诱变方法往往难以达到预期目的,可以采用使诱变方法之间具有协同作用的复合诱变。
   通过对紫外线、微波和DES诱变条件分别进行研究,得到了对NJQ3细菌最佳的诱变条件。原菌株在37℃、180 r·min-1恒温摇床中培养8~12h后,制成菌悬液,紫外诱变时间为2 min; DES最佳诱变条件为DES浓度1.5μL/mL,诱变时间为5 min;而微波辐射试验中,采用低温热分散法,间断累积诱变时间1~8min,致死率在60%以下,因此并不适合作为NJQ3的诱变选育方法。诱变后的菌株以角蛋白培养基降解圈为初筛条件,发酵液的可溶性蛋白含量和降解率为复筛条件,经过筛选后紫外诱变筛选出4个菌株,但是传代三次后均失去了正突变性状;DES诱变后筛选出5个菌株,其中D3在传代三次后仍然具有正突变性状,而微波诱变没有得到正突变菌株。
   用紫外线和DES复合诱变菌株NJQ3,方法为紫外诱变2min,在37℃、180r·min-1恒温摇床中培养12小时后制成菌悬液,DES浓度1.5μL/mL,诱变5 min。经过角蛋白培养基降解圈、可溶性蛋白含量和降解率三个指标的筛选,得到一个能够稳定传代10代以上的变异菌株YB5。YB5的降解圈角蛋白培养基直径为1.20 cm,比原菌株提高了37.08%;可溶性蛋白含量3.84 mg/L,提高了160.23%;降解率49.2%,提高了9.82%。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部