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摘要:抗菌肽在试验室研究、生产实践以及安全性评价过程中,存在定量测定方法不统一,结果重复性差,缺乏比较依据等问题.以硫酸多粘菌素B为代表,以铜绿假单胞菌为指示菌,采用琼脂扩散法建立抗菌肽浓度对数值与抑菌圈直径之间的线性关系,以重复性和精密度为指标,对指示菌菌龄、菌浓、琼脂浓度和培养基厚度等影响因素进行优化,确定琼脂扩散法测定抗菌肽效价的最佳测定条件为:指示菌的最佳培养时期为稳定期,浓度为106 cfu/mL,培养基厚度为3.15 mm(Φ90 mm,20 mL),琼脂浓度为1.5%.在此条件下,选用其它抗菌肽和指示菌进行验证,结果重复性好,精密度高(R2=0.997),该研究将为抗菌肽在试验和生产过程中的定量测定提供参考和依据....
摘要:以蟹壳粉为培养基的主要成分,研究一株枯草芽孢杆菌UMN-26在其中产蛋白酶的最适培养条件,以期为使用微生物发酵法脱除蟹壳中的蛋白质打下基础.以发酵液中的蛋白酶酶活力作为指标,采用单因素试验和响应面法优化蟹壳粉培养基的发酵条件.试验结果表明,优化的培养基组成为:蟹壳粉浓度5.5%,蔗糖浓度11.81%,初始pH 7.27.最适培养条件为培养温度37℃,转速200 r/min,培养时间108 h.在此条件下,发酵液的蛋白酶酶活力达到1465.86 U/mL,为优化前的7.86倍,蛋白质的脱除率为70.71%....
摘要:为筛选红树莓酵素发酵过程中的优势菌株,对自制红树莓发酵饮料进行稀释涂布和划线分离,共得到酵母菌5株,产酸菌1株。对分离菌株进行形态学鉴定、生理生化鉴定以及分子生物学鉴定,5株酵母菌中 F211和 S1是酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae);Z3和P21是库德毕赤酵母(Pichiakudriavzevii);B31为盔形毕赤酵母(Pichiamanshurica);产酸菌 RS13为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。本研究结果将为红树莓酵素发酵剂的制备提供参考和理论基础。...
摘要:为研究谷朊粉酶解物对AA肉鸡屠宰性能和肉品质的影响,本试验选取1日龄健康白羽肉鸡400只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复20只,试验期为42 d,分两个阶段饲养(1~21 d和22~42 d)。Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别以0.8%、1.2%、1.6%小麦谷朊粉酶解物替代对照组中等量的鱼粉。结果表明,在日粮中添加谷朊粉酶解物能够提高肉鸡屠宰性能、改善肉品质,对肉质的保鲜也有一定的作用效果,其中1.2%添加量效果最好。...
[硕士论文] 魏东东
农产品加工及贮藏工程 河北农业大学 2018(学位年度)
摘要:抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)具有抑菌谱广、对热稳定、不易产生耐药性等优点,有望成为化学防腐剂的替代品,在食品加工、贮藏等方面具有广阔的应用前景。然而在实验室研究、生产实践及安全性评价过程中,抗菌肽还存在定量测定方法不统一,结果重复性差,缺乏比较依据,与抗生素不易区分等一系列问题。
  以琼脂扩散法为基础,对相关因素进行优化,确定了抗菌肽定量测定方法的最优条件。本研究以硫酸多黏菌素B为代表,以铜绿假单胞菌ATCC9027为指示菌,采用琼脂扩散法建立了抗菌肽浓度对数值与抑菌圈直径之间的线性关系(以下简称“线性关系”)。以代表线性关系重复性的斜率、截距和代表线性关系精密度的决定系数R2为指标,对指示菌菌龄、菌浓,琼脂浓度和培养基厚度等影响因素进行优化,确定琼脂扩散法测定抗菌肽效价的最佳测定条件为:指示菌的最佳培养时期为稳定期,浓度为106cfu/mL,培养基厚度为3.15mm(Φ90mm,20mL),琼脂浓度为1.5%。在此条件下,选用其它抗菌肽和指示菌进行验证,结果重复性好,精密度高(R2=0.997)。
  通过多种抗菌肽与指示菌的相互作用,确定抗菌肽与指示菌之间存在相关性。本研究以杆菌肽、硫酸多粘菌素B、乳酸链球菌素(Nisin)为抗菌肽,以大肠杆菌ATCC25922、铜绿假单孢菌ATCC9027、蜡样芽孢杆菌ATCC10876为指示菌,采用抗菌肽定量试验中确定的试验条件,进行琼脂扩散试验,探究线性关系中斜率和截距的变化情况。研究发现当抗菌肽相同而指示菌不同时,其斜率和截距均存在显著性差异;当指示菌相同而抗菌肽不同时,斜率和截距也不相同,即线性关系中斜率和截距能够反映抗菌肽与指示菌间的相关性。故当指示菌及影响因素一致时,线性关系中斜率和截距可作为抗菌肽性质变化的评价指标;当抗菌肽的性质发生变化时,斜率和截距的变化规律可作为抗菌肽定性方法的判别依据。
  通过对影响抗菌肽与指示菌相关性因素进行研究,探讨了区分抗菌肽与抗生素的相关方法。以硫酸多粘菌素B为抗菌肽,以铜绿假单孢菌ATCC9027为指示菌,采用抗菌肽定量试验所确定的方法,以线性关系中斜率、截距的变化情况为分析对象,对影响抗菌肽性质的相关因素,如溶剂pH、盐离子的种类及浓度、热处理时间以及酶处理对抗菌肽定性试验的影响进行研究。结果表明,抗菌肽在经过不同时间热处理和不同种类酶处理后,对抗菌肽定性试验影响较小、干扰少,能够反映抗菌肽性质的变化情况。在定性方面,将抗菌肽(硫酸多粘菌素B、杆菌肽)和抗生素(氨苄青霉素、卡那霉素)分别热处理不同的时间和经不同种类的酶处理。结果显示抗生素在热处理过程中,斜率没有显著性变化(p>0.05),截距变化显著或不发生变化;酶处理对斜率和截距均无显著性影响(p>0.05)。抗菌肽使用热处理斜率无显著性变化(p>0.05),截距有下降趋势;部分酶处理后斜率和截距均无显著性(p<0.05)。
  本研究确定了基于琼脂扩散法的抗菌肽定量测定方法的最优条件,同时以所发现的抗菌肽与指示菌的相关性规律为依据,对抗菌肽定性相关工作进行研究。为抗菌肽的实际应用提供了参考和依据,为相关标准的制定提供了数据支持。
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