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摘要:采用静水法研究了在水温18±0.5℃、饵料密度1.0×104 cell/ml下栉孔扇贝面盘幼虫滤水率的昼夜节律;在水温24℃±0.5℃、饵料密度3.0×104 cell/ml下栉孔扇贝稚贝(壳长1.177~2.017 mm)滤水率的昼夜节律.栉孔扇贝面盘幼虫和稚贝的滤水率分别于17:00、21:00、01:00、05:00、09:00和13:00测定.栉孔扇贝面盘幼虫和稚贝的滤水率均具有明显的昼夜节律,且二者相似.在白天滤水率较低,最低值出现在09:00~13:00,幼虫为0.002 6 ml/h · ind,稚贝为0.1231 ml/h·ind;在夜间有较高的滤水率,最大值出现在凌晨21:00~01:00,幼虫达0.025 8 ml/h·ind,稚贝达0.509 6 ml/h·ind.统计分析表明,栉孔扇贝稚贝和面盘幼虫的滤水率昼夜差异显著(P<0.01)....
摘要:在水温为22 ~24℃,盐度29.6,溶解氧6.9 mg/L,pH 8.01的条件下,研究了多棘海盘车(Asterias amurensis)对4种贝类栉孔扇贝(Chlamys farreri)、贻贝(Mytilus edulis)、东方缝栖蛤(Hiatella orientalis)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)的摄食与食物选择性,以期了解多棘海盘车摄食生理生态学特性.结果表明:当只有一种贝类作为饵料时,多棘海盘车对不同贝类的摄食率差异极显著(P<0.01).其中,对东方缝栖蛤的摄食率最大,为0.0057~0.0080 g干重/(h·只)(壳长为7~20 mm),其次是贻贝为0.003 5~0.004 9 g干重/(h·只)(壳长为10 ~21mm),对栉孔扇贝的摄食率最小,为0.0014 ~0.002 8 g干重/(h·只)(壳长为14~31mm).同时,多棘海盘车的摄食率还表现出一定的昼夜差异,夜间的摄食率大于白天,但差异并不显著(P>0.05).当4种贝类同时作为饵料存在时,多棘海盘车对东方缝栖蛤的摄食率最大,为0.003 0 g干重/(h·只),其次是贻贝为0.0017g干重/(h·只),以摄食率评价摄食选择,多棘海盘车对于该4种贝类具有明显的选择性(P<0.05),其摄食选择性的顺序为:东方缝栖蛤,贻贝,菲律宾蛤仔,栉孔扇贝....
[硕士论文] 高亚平
发育生物学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:半胱氨酸组织蛋白酶cathepsin B主要存在于溶酶体中,是一种嗜酸性蛋白酶,能够水解胞内破损细胞器和蛋白质等,并且能够随小泡分泌到细胞外降解胞外基质中组分。斑马鱼中cathepsinb基因存在两种基因亚型,cathepsin ba(ctsba)和cathepsin bb(ctsbb)。
  本论文利用CRISPR/Cas9技术敲除了斑马鱼cathepsin ba基因,并在子一代筛选获得cathepsin ba杂合突变体。通过ctsba杂合突变体互交获得子二代,部分胚胎在50%下包期胚胎发育出现停滞,其中一部分死亡,死亡数占全部胚胎的6.9%左右。另一部分胚胎在停滞约1-2h后恢复迟缓的发育,在咽囔期出现明显的形态畸形,包括心包囊肿、尾部折叠和弯曲等,发育至2-3天后死亡,这部分胚胎占全部胚胎数量的19.3%,经基因鉴定结果显示这些死亡胚胎均为纯合突变体。胚胎死亡率大概占全部胚胎数量的四分之一,符合孟德尔遗传定律,说明ctsba基因存在隐性致死效应。RT-PCR检测ctsba-/-突变体中发生非编码的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD),说明ctsba基因敲除成功。利用RT-PCR技术和原位杂交技术分析表明,cathepsin ba为母源性和合子表达的基因,集中表达于动物极,在斑马鱼胚胎中广泛表达,且在卵黄合胞体层与神经管中表达量较高。利用背、腹部标记基因chordin和gata2进行原位杂交,发现在ctsba杂合体和纯合突变体shield期chordin、gata2基因并未出现异常表达,但75%下包期chordin在ctsba-/-突变体背中线表达量减少。50%下包期是斑马鱼原肠胚期的开始,是三胚层分化形成的关键时期,利用内、中、外三胚层标记基因sox17、eve1、gsc在ctsba杂合突变体自交后代中进行原位杂交,根据原位杂交结果和基因型鉴定结果分析,在ctsba-/-胚胎中sox17、eve1、gsc均出现异常表达:sox17在75%下包期开始表达出现扩散现象,并且bud期内胚层前体细胞明显减少;eve1在咽囔期胚胎尾部出现表达异常;gsc表达量从75%下包期开始比野生型明显降低。实验结果提示ctsba基因可能参与了斑马鱼背部发育,在斑马鱼原肠胚时期可能参与了细胞运动和三胚层形成,ctsba基因缺陷可能因此而导致广泛的胚胎畸形和致死效应。
  本论文还利用CRISPR/Cas9技术敲除了斑马鱼cathepsin bb基因,并筛选获得cathepsin bb突变体。
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