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摘要:目的观察慢性庆大霉素中毒后豚鼠前庭上皮的损伤和修复过程,探讨前庭毛细胞凋亡和再生的关系.方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口末端标记(terminal deoxyuncleotidyl transferase-mediate d deoxyuridine triphosphate nick end labeling, TUNEL)法,观察前庭感觉上皮细胞的 凋亡,采用5'-溴-2-脱氧尿苷(bromodeoxyuridine, Brdu)免疫细胞化学法观察前庭 上皮的再生过程.结果对照组没有观察到TUNEL和Brdu阳性细胞 .停止庆大霉素注射1天至3周均可观察到 TUNEL 阳性细胞,但1天组阳性细胞数量最多,3 周仍有阳性细胞存在,阳性细胞主要位于毛细胞层.停止庆大霉素注射后1天组支持细胞层和毛细胞层均有 Brdu 标记阳性细胞,3 d 组支持细胞层阳性细胞显著增多,1周组毛细胞层也出现较多阳性细胞,2周组 Brdu 标记阳性细胞主要位于毛细胞层,3周仍可观察到 Brdu 标记阳性细胞.结论慢性庆大霉素耳中毒后豚鼠前庭上皮细胞凋 亡增加,凋亡与增殖伴随存在,前庭毛细胞的损伤可能是其增殖的触发因素.增殖过程表现 为支持细胞增生向毛细胞增生移行的趋势,支持细胞增殖并转化成毛细胞可能是前庭上皮细胞损伤修复机理之一....
摘要:目的研究庆大霉素慢性损伤后豚鼠前庭终器蛋白激酶C(PKC)活性的变化及其βⅠ,βⅡ,γ亚型的表达,探讨PKC与前庭损伤修复的关系. 方法采用免疫细胞化学法观察椭圆囊斑、球囊斑和壶腹嵴PKCβⅠ,Ⅱ,γ亚型的表达;应用γ-32P示踪检测前庭终器PKC活性的变化. 结果 PKCβⅠ,Ⅱ,γ亚型在前庭感觉上皮细胞均呈阳性表达,上皮下结缔组织呈阴性表达. βⅡ,γ亚型较β1亚型表达稍弱,不同亚型抗原分布不完全相同. 与对照组相比,PKCβⅠ,γ在停止注射庆大霉素后1 d其表达明显减弱,随后其表达逐渐增加,至1 wk其表达已高于对照组,3 wk仍未恢复. PKCβⅡ表达各组变化不明显. 豚鼠前庭终器PKC活性检测结果与PKCβⅠ,γ表达变化规律基本相似. 结论庆大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感觉上皮PKCβⅠ,γ亚型表达及PKC活性均发生变化,且不同亚型抗原分布不完全相同. 提示PKC在前庭感觉上皮损伤修复过程中发挥重要作用,不同亚型可能具有不同的作用....
[硕士论文] 马晓莉
耳鼻咽喉科学 第四军医大学 2001(学位年度)
摘要:目的:观察慢性庆大霉素中毒后豚鼠前庭上皮的损伤和修复过程,探讨前庭毛细胞凋亡和再生的关系;研究庆大霉素慢性损伤后豚鼠前庭终器蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)Cα、Cβ亚型的表达和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性的变化及其βⅠ、βⅡ、γ亚型的表达,探讨PKA、PKC与前庭损伤修复的关系;方法:1.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine tripho-sphate nick end labeling,TUNEL)法观察前庭感觉上皮细胞的凋亡,采用5-溴脱氧尿核苷(bromodeoxyuridine,Brdu)免疫细胞化学法观察前庭上皮的修复过程.2.采用免疫细胞化学法观察椭圆囊斑、球囊斑和壶腹嵴PKACα、Cβ亚型的表达变化及分布特点.3.采用免疫细胞化学法观察椭圆囊斑、球囊斑和壶腹嵴PKCβ<,Ⅰ,Ⅱ>、γ亚型的表达变化及分布特点:应用<'32>γ-P示踪检测前庭终器PKC活性的变化. 结论: 1.慢性庆大霉素耳中毒后豚鼠前庭上皮细胞凋亡增加,凋亡与增殖伴随存在,前庭上皮细胞的凋亡可能是其增殖的触发因素.增殖过程表现为支持细胞增生向毛细胞增生移行的趋势,支持细胞增殖并转化成毛细胞可能是前庭上皮细胞损伤修复机理之一. 2.庆大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感觉上皮PKCβ<,Ⅰ>、γ亚型表达及PKC活牲均发生变化,且不同亚型抗原分布不完全相同.提示PKC在前庭感觉上皮损伤修复过程中发挥重要作用,不同亚型可能具有不同的作用. 3.停止应用庆大霉素2wk、3wk PKACα、Cβ表达发生变化,提示PKACα、Cβ与前庭毛细胞的增殖分化有关系,PKACβ可能具有促进增殖分化效应,而PKA Cα亚型可能与抑制增殖分化有关系.
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