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摘要:从商品肉鸭场采集鸭粪及垫料,以实验室保存的沙门菌为宿主菌,采用双层平板法分离到1株烈性噬菌体.对分离到的噬菌体进行纯化、效价测定、裂解谱测定、形态观察,并且进行了最佳感染复数、温度跟pH值稳定性和一步生长曲线的生物学特性研究.结果表明,该噬菌体形成的蚀斑均匀透亮,效价能达到109 PFU/mL以上,并能裂解多株沙门菌菌株,为宽裂解谱噬菌体,透射电镜显示,该噬菌体为长尾噬菌体;最佳感染复数为0.001;一步生长曲线测定表明,该噬菌体的潜伏期为15 min,暴发期为30 min,暴发量约为320;该噬菌体的温度、pH值耐受性良好;紫外线照射60 min后效价降低3个梯度,由此可见该噬菌体分离株可作为潜在开发的生物消毒剂菌株....
摘要:蛭弧菌是一种能够捕食裂解细菌的小型细菌.本文主要从蛭弧菌的形态、宿主范围、生活周期、分布与分离鉴定等生物学特性以及在生产中的应用等方面进行了介绍.蛭弧菌作为一种新型的微生态制剂具有广阔的发展前景. 蛭弧菌是原核生物界中唯一一类小型的周质型专性捕食性细菌,与噬菌体相似,细胞内寄生.1962年Stolp和Petzold[1]首次从菜豆叶斑病假单胞菌中分离到蛭弧菌,以后相继从土壤、污水中分离得到.蛭弧菌的分布十分广泛,凡是有细菌存在的地方几乎都能发现蛭弧菌的存在.蛭弧菌能够寄生和裂解大多数革兰阴性菌.鉴于这一特性,蛭弧菌受到国内外学者的广泛关注,在微生态研究领域已经作为一种新型的绿色微生态制剂得到了初步的开发、利用,在农业、工业和医学领域方面显示了良好的应用前景.下面就蛭弧菌的生物学特性及应用情况进行简要介绍....
[硕士论文] 马建伟
预防兽医学 青岛农业大学 2017(学位年度)
摘要:沙门氏菌是常见的人畜共患病原菌,在畜牧业和公共卫生领域造成重大影响,目前沙门氏菌耐药性越来越严重,治疗难度越来越大。本研究从临床分离沙门氏菌及沙门氏菌噬菌体,对分离到的沙门氏菌噬菌体进行生物学特性的研究,并对其中一株进行全基因组测序和基因注释。
  本研究主要内容包括:⑴使用沙门氏菌的invA基因的PCR方法对分离到的菌株进行检测,从病鸡和病鸭中总共分离到25株沙门氏菌。对分离到25株沙门氏菌及实验室保存的7株沙门氏菌检测对26种抗生素的敏感情况,32株沙门氏菌均存在不同程度的耐药性,且大多数菌株都存在多重耐药。⑵从商品肉鸭厂采集鸭粪和垫料,采用双层平板法分离到2株沙门氏菌噬菌体,两株噬菌体在双层平板上形成的噬菌斑均匀透亮,直径约2mm,通过效价和裂解谱的测定,2株噬菌体效价均能达到109PFU/mL,除宿主菌外均能裂解多株其它沙门氏菌,均为宽裂解谱烈性噬菌体,电镜观察2株噬菌体均为长尾噬菌体,分别命名为BS3和BS4。⑶对分离到2株沙门氏菌噬菌体进行最佳MOI、一步生长曲线、温度、pH、紫外线稳定性等生物学特性的研究,噬菌体BS3和BS4的最佳MOI分别为0.001和0.01;两株噬菌体的在40℃下作用1h后基本能保持原效价;噬菌体BS3在pH4~12范围内基本能保持原效价,噬菌体BS4在pH5~11范围内基本能保持原效价;紫外线稳定性方面,噬菌体BS3和BS4在紫外灯下连续照射1h后,效价分别下降3个和4个数量级。⑷对沙门氏菌噬菌体BS3的全基因组序列进行测序,测得基因组全长为43696bp,为双链DNA,对其全基因组序列进行了注释,噬菌体BS3共注释得到64个开放阅读框,对预测到的开放阅读框进行分析,大部分为假设蛋白,有注释结果的29个蛋白中有裂解相关蛋白、结构蛋白、核酸相关蛋白等,分析了主要蛋白的一级、二级、三级结构,主要的二级结构为α螺旋、延伸链、β折叠、无规卷曲,对噬菌体BS3的全蛋白进行SDS-PAGE检测,结果显示总共跑出5条带,大小从39KD到90KD不等,蛋白质谱分析结果显示,跑出的五条带包括宿主蛋白、尾刺蛋白、门户蛋白、尾部蛋白、衣壳蛋白。
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