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CSTPCD 北大核心
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摘要:本试验旨在从大熊猫粪便中筛选出能够降解纤维素的菌株,并对该菌株进行鉴定和产酶条件的优化. 利用羧甲基纤维素钠( CMC?Na)为唯一碳源的培养基,结合碘液染色法、滤纸分解试验和纤维素酶活力测定,从大熊猫粪便中筛选得到1株纤维素降解菌DL. 结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,初步鉴定该菌株为Paenibacillus cookii LZ033,它是一种产芽孢且好氧的革兰氏阳性菌. 为确定菌株DL的最佳产酶条件,选取培养基初始pH、培养温度、摇床转速以及装液量4 个因素,在单因素试验结果的基础上,利用正交试验,确定菌株 DL 的最佳产酶条件为培养基初始 pH 为 6、培养温度为 35 ℃、摇床转速为125 r/min、250 mL三角瓶装液量为100 mL,在此条件下纤维素酶活力(以滤纸酶活力表示)为102.3 U/mL....
[期刊论文] 张智 尹文哲 雅男 马建章
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CSTPCD 北大核心
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摘要:本试验旨在从大熊猫粪便中筛选出能够降解纤维素的菌株,并对该菌株进行鉴定和产酶条件的优化.利用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源的培养基,结合碘液染色法、滤纸分解试验和纤维素酶活力测定,从大熊猫粪便中筛选得到1株纤维素降解菌DL.结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,初步鉴定该菌株为Paenibacillus cookii LZ033,它是一种产芽孢且好氧的革兰氏阳性菌.为确定菌株DL的最佳产酶条件,选取培养基初始pH、培养温度、摇床转速以及装液量4个因素,在单因素试验结果的基础上,利用正交试验,确定菌株DL的最佳产酶条件为培养基初始pH为6、培养温度为35℃、摇床转速为125 r/min、250 mL三角瓶装液量为100 mL,在此条件下纤维素酶活力(以滤纸酶活力表示)为102.3 U/mL....
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CSTPCD 北大核心
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摘要:采用高通量测序技术分析复合益生菌对昆明雄性小鼠肠道菌群的影响.利用0.9 mg/ (g·d)青霉素钠灌胃建立肠道菌群失调小鼠模型.将50只小鼠随机分为5组:空白对照组、自然恢复组、复合菌液高、中、低3个剂量组(复合益生菌浓度分别为109、108、107 CFU/mL).0.2 mL/(d·10 g)连续灌胃14d后,收集小鼠粪便,采用高通量测序技术对各组小鼠粪便菌群进行分析.结果表明:复合菌液高剂量组小鼠肠道菌群物种多样性最高(ACE值为22 101.63和Chaol值为13 791.40),自然恢复组最低;另外,小鼠肠道中有益菌与致病菌比例在各组之间差异显著,复合菌液各剂量组中有益菌群的比例均大于自然恢复组,而致病菌比例最高的为自然恢复组(56.36%),因此复合菌液对小鼠的肠道菌群失调具有调节作用....
[硕士论文] 雅男
食品科学 东北林业大学 2017(学位年度)
摘要:纤维素是自然界中最丰富、来源最广泛的有机物质,它是地球上重要的可再生资源。黑龙江省有着丰富的纤维素资源,但大部分纤维素被焚烧、废弃、对环境造成严重污染。要使纤维素被分解转化成小分子化合物或其它营养物质,筛选分离出能够降解纤维素的优良菌是关键。本文对纤维素降解菌的筛选、产酶条件的优化、酶学性质并对纤维素酶降解菌基因组进行了初步研究,主要研究内容和结果如下:
  1.纤维素降解菌的筛选
  利用羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基、结合碘液染色法、滤纸分解实验和纤维素酶活力测定,从熊猫粪便中筛选出一株纤维素降解菌。结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,初步鉴定为Paenibacillus cookii LZ033,它是一种产芽孢且好氧的革兰氏阳性细菌。
  对小鼠灌胃Paenibacillus cookii LZ033菌液,采用一次性灌胃,灌胃菌液浓度为3×108CFU/mL、3×107CFU/mL、3×106CFU/mL,并设置阳性对照组,灌胃剂量均为0.2mL/10g体重。观察14天,未出现中毒症状,无死亡现象,肝脏、脾脏及胸腺无异常改变。
  2.纤维素降解菌发酵产酶条件的优化
  Paenibacillus cookii LZ033菌株的液体发酵产酶培养基:葡萄糖添加量0.99%、蛋白胨添加量0.97%、硫酸镁添加量0.076%、磷酸二氢钾添加量0.31%,在此条件下纤维素酶活力为92.2U/mL。
  Paenibacillus cookii LZ033菌株的液体发酵产酶条件:培养基初始pH6.6、培养温度36℃、摇床转速121r/min,装液量120mL/250mL三角瓶,在此条件下纤维素酶活力为97.8U/mL。
  3.酶学性质的研究
  纤维素酶活力在60℃~70℃之间比较稳定;纤维素酶活力在pH3~4.6之间比较稳定;酶促反应最适温度为70℃;酶促反应最适pH为3。
  金属离子浓度为1mmol/L的条件下,Fe2+、Mn2+对纤维素酶具有明显的激活作用。Mg2+、Zn2+、Co2+、Cu2+对纤维素酶具有明显的抑制作用。添加少量的 Fe2+、Mn2+有利于提高菌株的产酶能力。
  4.基因组初步分析
  采用 Illumina公司开发的Miseq测序平台进行测序,根据基因组序列对Paenibacillus cookii LZ033的基本遗传信息进行了初步分析。
  Paenibacillus cookii LZ033基因序列全长为3978050bp,GC含量为46.46%。通过使用Cenemark软件对基因组进行预测,使用COG、GO及 KEGG等数据库进行了注释。共预测到4049个基因,编码基因的序列占整个染色体序列的88.7%,平均长度为878bp。对COG、GO及KEGG注释结果进行检索,Paenibacillus cookii LZ033一共含有10个编码纤维素酶的基因,这些基因编码的酶包括β-葡萄糖苷酶和内切葡聚糖酶。
  Paenibacillus cookii LZ033含糖酵解途径、柠檬酸途径、磷酸戊糖途径及淀粉和蔗糖代谢途径,可以为自身提供能量,维持正常的生理活动。Paenibacillus cookii LZ033基因组测序为它的应用和研究提供了良好的理论基础。
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