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摘要:目的:探讨在急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞株SRA01/04内衰老标记蛋白30 (SMP30)、Caspase-3、Ca2+-ATP表达的变化.方法:通过慢病毒转染建立SMP30过表达(OE)组、过表达空载对照(NC-OE)组、SMP30沉默(KD)组及沉默空载(NC-KD)组SRA01/04细胞,RT-PCR和Western blotting检测SMP30含量鉴定细胞是否转染成功;用300μmol/L H2 O2作用2h,构建急性氧化应激状态时,PCR检测各组细胞SMP30基因的表达情况,Western blotting检测各组细胞SMP30、Caspase-30和Ca2+-ATP蛋白的表达量.结果:在正常状态时,OE组SMP30基因及其蛋白表达量高于NC-OE组(P<0.05),KD组的SMP30基因及其蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05).OE组及KD组细胞SMP30基因表达量均出现增加(P<0.05),与正常状态时相比,急性氧化应激状态时OE组细胞SMP30蛋白表达上调(P<0.05);正常状态时,OE组Caspase-3蛋白表达量低于NC-OE组,KD组Caspase-3蛋白表达量高于NC-KD组(P<0.05).急性氧化应激状态时,OE组Caspase-3蛋白表达量低于NC-OE组,KD组Caspase-3蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05).在急性氧化应激状态时OE组Caspase-3蛋白表达量低于正常状态时;KD组的Caspase-3蛋白表达量高于正常状态时KD组(P<o.05).在正常状态时,OE组Ca2+-ATP蛋白表达量高于NC-OE组,KD组Ca2+-ATP蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05).在急性氧化应激状态时,OE组Ca2+-ATP蛋白表达量高于NC-OE组,KD组Ca2+-ATP蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05).在急性氧化应激状态时OE组的Ca2+-ATP蛋白表达量高于正常状态时(P<0.05).结论:在急性氧化应激状态时,SMP30含量出现反应性增加,过表达SMP30可能对人晶状体上皮细胞株SRA01/04具有抗氧化、抗凋亡、增加钙调节活性的作用....
摘要:目的 初步探讨衰老标记蛋白30 (senescence marker protein 30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用.方法 将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L-1、200 μmol·L-1、250 μmol·L-1、300 μmol·L-1、350 μmol·L-、400 μmol·L-1、450μmol·L-1H2O2的培养基作用2h,CCK-8法选取最佳H2O2浓度;使用慢病毒对SRA01/04进行转染建立SMP30高表达模型,实验分3组:SMP30过表达(over expression,OE)组、SMP30过表达相应空载(negative control over expression,NCOE)组及对照(control,CON)组.通过超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)定量检测试剂盒、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/总谷胱甘肽(total glutathione,T-GSH)测定试剂盒测量细胞内SOD活力及GSSG/T-GSH比值的变化.结果 经分析,建立模型的最佳H2O2浓度为300 μmol·L-1.在此浓度下,与CON组(5.783±0.192)U·mg-1及NCOE组(5.837±0.182)U·mg-1相比,OE组细胞内SOD活力升高,为(10.251±0.110)U·mg-;与CON组(29.943±0.241)及NCOE组(30.037±0.433)相比,OE组细胞内GSSG/T-GSH比值(20.990±0.342)降低;差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 当SRA01/04处于H2O2诱导的急性氧化应激初期时,SMP30表达的增加可通过增加SOD活力和降低GSSG/T-GSH比值,加强SRA01/04的抗氧化能力....
摘要:[目的]探讨在高钙诱导细胞氧化应激下,高表达衰老标记蛋白30(SMP30)对人晶状体上皮细胞(HLEC)株SRA01/04增殖活力及抗氧化能力的影响.[方法]实验分3组:SMP30高表达组(OE,实验组)、NCOE组(阴性对照组)及SRA01/04组(空白对照组).用OE及NCOE慢病毒载体分别转染SRA01/04细胞.15mmol/LCaCl2处理细胞24 h建立高钙诱导模型.BrdU法检测细胞增殖、超氧化物歧化酶(SOD)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)/总谷胱甘肽(T-GSH)法检测细胞氧化指标.[结果]荧光显微镜下可见各组转染细胞有大量绿色荧光蛋白(GFP)表达,转染效率接近80%,提示SMP30高表达SRA01/04细胞模型构建成功.在高钙状态下,OE组细胞相对增殖活力(3.89±0.20)和SOD活力(U/mg,47.5±4.3)均高于NCOE组(2.82±0.34、30.6±4.2)及SRA01/04组(2.96±0.25、26.8±1.5),OE组GSSG/T-GSH比值(2.36±0.51)低于NCOE组(16.36±2.48)及SRA01/04组(20.12±2.54),上述差异均有统计学意义(n=3,P<0.05),NCOE组与SRA01/04组相比差异均无统计学意义(n=3,P>0.05).[结论]高表达SMP30增加SRA01/04 (HLEC)细胞增殖活力、SOD活力及下降GSSG/T-GSH水平,提示SMP30在一定程度上可缓解高钙诱导细胞氧化损伤的进程,可能对HLEC有保护作用....
摘要:目的 探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)基因多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发之间的关系.方法 选取2013年3月~2017年3月笔者医院收治的300例膀胱癌患者为研究对象,其中初发膀胱癌150例、复发膀胱癌150例,同期选取100例体检健康者作为对照组,利用限制性内切酶片段长度多态性PCR(poly-merase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测TLR4、TLR9基因多态性,分析TLR4 rs10759932、TLR91486T/C、C2848T基因多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发之间的关系.结果 3组TLR4 rs10759932、TLR91486T/C、C2848T基因多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡.与对照组比较,初发膀胱癌组及复发膀胱癌组TLR4rs10759932基因多态位点T/C、C/C基因型频率及C等位基因频率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),T/T、T等位基因明显升高(P<0.05),且复发膀胱癌组TLR4rs10759932基因多态位点T/C、C/C基因型频率及C等位基因频率明显低于初发膀胱癌组(P<0.05),T/T、T等位基因明显高于初发膀胱癌组(P<0.05).3组TLR91486T/C、C2848T基因多态性比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 TLR4基因rs10759932多态性与浅表性膀胱癌肿瘤复发密切相关,该基因位点T/C、C/C基因型及C等位基因可能会降低浅表性膀胱癌复发风险....
摘要:目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)T1349G基因多态性与膀胱癌易感性的关系.方法 采用前瞻性研究,选取2013年1月至2017年1月诊治的膀胱癌患者297例为研究对象,选取同期健康体检者300例为对照组.采集各受试者外周静脉血并提取基因组DNA,采用两对引物-聚合酶链式反应(PCR-CTPP)检测APE1基因多态性并分析是否符合哈迪-温伯格平衡(HWE)定律;采用Logistic回归分析APE1基因多态性与膀胱癌易感性之间的关系.结果 APE1在1349位点存在单核苷酸多态性,分别为野生型纯合子TT型、突变杂合子TG型、突变纯合子GG型.APE1 T1349G基因多态性基因型频率分布符合哈迪-温伯格平衡(HWE)定律.APE1 1349GG基因型发生膀胱癌的风险显著高于APE1 1349TT基因型(OR=2.18,95%CI=1.99~2.39,P <0.05),APE1 1349TG基因型发生膀胱癌的风险高于APE1 1349TT基因型(OR=1.12,95%CI=0.95~1.32,P >0.05);APE1 1349位点等位基因T颠换为G,发生膀胱癌的风险显著升高(OR=1.89,95%CI=1.69~2.11,P <0.05).APE1 T1349G多态性位点各基因型与膀胱癌患者的病理分级和TNM分期无明显相关性(P >0.05).结论 APE1 T1349G基因多态性与膀胱癌发病有关,该基因位点GG基因型以及G等位基因可增加膀胱癌的发病风险....
摘要:目的 探讨过氧化氢诱导的急性氧化应激对人晶状体上皮细胞形态、生存率及衰老标记蛋白30(senescence marker protein30,SMP30)表达的影响.方法 采用不同浓度过氧化氢(0μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-1、300 μmol·L-1)处理人晶状体上皮细胞24 h,建立不同浓度急性氧化应激模型,通过光镜观察、MTT分析细胞形态、生存率,Western blot检测SMP30蛋白的表达情况.结果 不同浓度过氧化氢处理细胞24 h后,100 μmol·L-1处理组和200 μmol·L-1处理组细胞密度、生长活力下降,细胞形态改变,开始出现变圆变大的细胞,胞体拉长,边界不清;300 μmol·L-1处理组细胞密度明显降低,细胞出现破碎,溃解.随着过氧化氢浓度的增高,细胞生存率逐渐下降,各处理组与对照组(Oμmol·L-)间相比,差异均有统计学意义(均为P <0.05).在对照组及100 μmol·L-1处理组、200 μmol·L-1处理组晶状体上皮细胞SMP30蛋白相对表达量分别为0.273±0.055、0.464±0.058、0.442±0.050,100 μmol·L-1处理组、200 μmol·L-处理组SMP30蛋白的表达均较对照组提高,差异均有统计学意义(均为P <0.05),100 μmol·L-1处理组和200 μmol·L-1处理组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 在急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞形态改变,生存率下降,SMP30蛋白表达上调,SMP30蛋白可能参与晶状体上皮细胞急性氧化应激损伤过程....
摘要:目的 探讨高钙培养对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)株SRA01/04氧化应激水平的影响.方法 选取处于对数生长期的HLEC均匀接种96孔板(每孔2×103个细胞),对照组:正常培养的HLEC,实验组:正常培养的HLEC+CaCl2(3 mmol·L-1、5 mmol· L-1、7 mmol· L-1、9 mmol· L-1、11 mmol·L-I、13 mmol·L-1、15 mmol· L-1、17 mmol·L-1、19 mmol·L-1)培养0h、12 h、24 h、36 h,采用CCK-8法检测各组细胞存活率.利用定量检测试剂盒测量细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总谷胱甘肽(total-glutathione,T-GSH)含量及氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/T-GSH比值的变化.结果 3 mmol·L-1、5 mmol·L-1、7 unol·L-1 CaCl2处理SRA01/04细胞24h,细胞存活率随CaCl2浓度增高先呈显著下降趋势,当浓度增高到9 mmol·L-1后细胞存活率又逐渐恢复,各实验组HLEC活力差异有统计学意义(P<0.05).对照组细胞活力(0.592±0.055)与15 mmol·L-1CaCl2组(0.293±0.020)细胞活力相比差异有统计学意义(t=7.811,P<0.05).CaCl2引起HLEC凋亡的最合适浓度和作用时间为15 mmol·L-1处理24h.与对照组相比,15 mmol·L-1CaCl2处理24h后,细胞核碎裂、溶解,细胞内SOD活力增高(t=-6.417,P<0.05),T-GSH含量下降(t=13.816,P<0.05),GSSG/T-GSH比值增高(t=-4.396,P<0.05).结论 CaCl2诱导的高钙状态抑制HLEC的活力,引起细胞内SOD活力和GSSG含量增加,诱发并加剧细胞内氧化应激反应....
摘要:目的:了解泌尿系统感染病原菌的分布及耐药性.方法:对本院2011-2014年泌尿系统感染患者尿液标本进行培养分离得到病原菌,用KB法进行药敏试验.结果:共分离出病原菌597株,其中革兰阴性杆菌472株,占79.1%,以大肠埃希菌为主.革兰阳性球菌71株,占11.9%,以粪肠球菌为主.真菌54株,占9.0%,以白色念珠菌为主.对革兰阴性杆菌敏感性最高的抗菌药物是碳青酶烯类,耐药率较高的为左氧氟沙星.对革兰阳性球菌敏感性最高的抗菌药物是替考拉宁,耐药率最高的为红霉素.结论:泌尿系统感染病原菌分布及耐药性不断变化,临床上应合理选择抗菌药物....
摘要:目的:探讨前列腺按摩液(EPS)中锌离子浓度对Ⅲ型和Ⅳ型前列腺炎诊疗的意义和参考价值. 方法:根据NIH前列腺炎分型标准,将入选的173例研究对象分为ⅢA型(n=65)、ⅢB型(n=69)、Ⅳ型(n=39)前列腺炎,并以35例门诊健康体检、无前列腺炎症状者为对照组,检测4组EPS中锌离子浓度,并分析其与慢性前列腺炎症状评分(CPSI),年龄,EPS中白细胞计数、pH值等指标的相关性. 结果:ⅢA型及ⅢB型前列腺炎患者EPS中锌离子浓度[(162.2 +10.8)、(171.2± 12.0) μg/ml]显著低于Ⅳ型及对照组[(234.6±17.9)、(259.5±14.6)μg/ml),P均<0.05].EPS中锌离子浓度与疼痛评分、生活质量(QOL)评分、症状严重评分以及CPSI总评分均呈显著负相关(r分别为-0.284、-0.232、-0.270、-0.281,P均<0.01),与排尿症状评分无相关.EPS中锌离子浓度与白细胞计数、年龄无明确相关,与pH值呈负相关(r=-0.208,P<0.01). 结论:Ⅲ型和Ⅳ型前列腺炎患者EPS中锌离子浓度低下可能与疼痛等前列腺炎相关症状有关,EPS中锌离子浓度检测对Ⅲ型和Ⅳ型前列腺炎的诊疗具有潜在参考价值....
摘要:目的 观察ⅢA型前列腺炎患者前列腺液(EPS)中锌离子、前列腺特异性抗原(PSA)浓度变化,并探讨其临床意义. 方法 招募ⅢA型前列腺炎患者71例(观察组)及健康查体者44例(对照组). 采用化学比色法、ELISA法分别测定其EPS中锌离子、PSA浓度. 以湿玻片法在显微镜下完成EPS中WBC等级,用pH试纸测定EPS中pH值. 锌离子、PSA浓度及其与慢性前列腺炎症状指数( NIH-CPSI)评分的关系采用Pearson线性相关分析;锌离子、PSA浓度与pH值、WBC等级的关系采用Spearman秩相关分析. 结果 观察组与对照组EPS中锌离子浓度分别为(155.93 ±68.65)、(206.54 ±65.18)μg/mL,PSA浓度分别为(2.27 ±2.03) ×105、(3.78 ±2.84) ×105 ng/mL,两组比较,P均<0.05. 观察组WBC等级偶见0例、1+为32例、2+为21例、3+为17例、4+为1例,对照组均为偶见. 观察组与对照组EPS中pH值分别为6.85 ±0.52、6.58 ±0.42,两组比较,P<0.05. EPS中锌离子浓度与PSA浓度呈正相关(r=0.330,P<0.001). 锌离子浓度与NIH-CPSI评分中的疼痛评分、生活质量影响评分及NIH-CPSI总评分均呈负相关(r分别为-0.278、-0.224、-0.248,P均<0.05);而与NIH-CPSI排尿症状评分无线性相关(r=-0.067,P>0.05). PSA浓度与NIH-CPSI评分中的疼痛评分、生活质量影响评分及NIH-CPSI总评分均呈负相关(r分别为-0.255、-0.217、-0.250,P均<0.05);而与NIH-CPSI 排尿症状评分无线性相关(r=-0.106,P>0.05). 锌离子浓度、PSA浓度与pH值均呈负相关(r分别为-0.429、-0.333,P均<0.001). PSA浓度与WBC等级呈负相关( r=-0 .306 , P<0 .05 );锌离子浓度与WBC等级无明显相关关系( r=-0 .216 , P>0.05).结论 ⅢA型前列腺炎患者EPS中锌离子和PSA浓度显著下降,检测EPS中锌离子、PSA浓度有助于ⅢA型前列腺炎的诊断及病情评估....
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北大核心 CSTPCD CA CBST
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摘要:目的:探讨NIH-ⅢA、ⅢB及Ⅳ型前列腺炎患者的前列腺液中白细胞( WBC)、卵磷脂小体( SPL)及慢性前列腺炎症状指数( NIH-CPSI)之间的相关性。方法收集泌尿男性科门诊183例ⅢA、ⅢB及Ⅳ型前列腺炎患者的前列腺液,患者填写NIH-CPSI量表,并测定前列腺液中WBC及SPL计数,分析不同分型前列腺炎患者CPSI评分、前列腺液WBC、SPL计数的相关性及特点。结果ⅢA型前列腺炎患者前列腺液WBC、SPL计数与CPSI量表评分均无秩相关关系(P>0.05),并且前列腺液中WBC与SPL计数无秩相关关系(P>0.05);ⅢB型前列腺炎患者CPSI量表评分与SPL计数无秩相关关系( P>0.05),Ⅳ型前列腺炎患者前列腺液中WBC与SPL计数无秩相关关系( P>0.05)。结论不同分型前列腺炎患者前列腺液中WBC、SPL计数与患者症状严重程度之间无明确相关性,WBC与SPL计数用于评估慢性前列腺炎病情可靠性差,慢性前列腺炎负面影响主要源于症状,临床诊疗中应重视并改善患者症状。...
[期刊论文] 陈曦 汪小明
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北大核心 CSTPCD CA
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摘要:创伤性睾丸脱位是指外界钝性暴力直接或间接作用于阴
  囊或会阴部导致睾丸移位至周围组织当中,常见于11~30岁
  男性,这种病例罕见,在临床中容易被忽略,造成漏诊或者误诊。本院于2014年2月收治创伤性右侧睾丸脱位合并腹股沟斜疝1例,现报道如下。...
摘要:目的:了解广西医科大学在校大学生人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的感染情况.方法:应用酸醚离心沉淀法粪检,抽查3个年级共1 433人,统计分析民族、性别、生源地、不同年级组别之间B.h感染率.结果:广西医科大学在校大学生B.h平均感染率为14.93%;汉族感染率13.48%,壮族感染率18.38%,其他民族感染率为17.24%.各年级感染率最低为13.19%,最高达16.28%.男性感染率为14.74%;女性感染率为15.06%.广西本地生源感染率为15.06%;外地生源感染率为13.94%.结论:广西医科大学在校大学生B.h感染率较高,并且存在校内感染的可能性.壮族学生B.h感染率高于汉族....
摘要:目的通过对两次全国范围人类免疫缺陷病毒(HIV)毒株分子流行病学研究(National Molecular Epidemic Study, NMES)中发现的CRF01_AE重组HIV-1毒株的分析,研究该重组型毒株在我国的流行特点和基因变异特征.方法从HIV感染者血液中提取前病毒DNA,使用套式聚合酶链反应(nested-PCR)扩增HIV-1的env基因C2~V4区,PCR产物直接测序并使用GCG软件包进行序列分析.结果到2002年底,从全国31个省市自治区采集的标本中发现CRF01_AE重组型样本169份,分布在17个省.虽然CRF01_AE重组型仍然以性传播人群为主[NMES1为62.2%(23/37),NMES2为55.3%(73/132)],但吸毒人群中感染该重组型的比例明显增加,由NMES1的27%(10/37)增加到NMES2的41.6%(57/137).系统树分析可明显看到NMES2吸毒人群流行毒株远离NMES2中性传播人群和NMES1吸毒人群流行毒株.NMES2吸毒人群流行毒株的V3区氨基酸较保守,但C3区第6、8、9、10、12、15、16位氨基酸呈现出规律性变化.结论 CRF01_AE亚型已从东南沿海和西南边境扩散至内陆,吸毒人群中该亚型比例不断上升.NMES2吸毒人群和NMES1吸毒人群中流行的CRF01_AE重组毒株序列明显不同,显示其可能有新的来源,并呈现扩大流行的态势....
摘要:通过医学留学生全英有机化学教学实践,从师资培养,教材选择,教学改革和学生成绩评价体系,学生管理等方面介绍体会和认识,为进一步提高教学质量提供意见和参考....
摘要:对蛇床子的名称、生境分布与产地、采集加工与炮制、植物形态特征与混淆植物、性味归经、主治功效、用法用量、应用禁忌等进行本草医籍文献考证.蛇床子药用历史久远,具有温肾助阳、祛风、燥湿、杀虫功效,作用广泛.虽然有多种植物品种可入药,但是以伞形科植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cuss.为正品,质量最佳.通过综述,以期为蛇床子应用的深入研究提供本草学资料....
摘要:花椒毒酚属于香豆素类化合物,是伞形科中药植物的主要成分之一,具有多种生物活性以及药理作用.从它的结构与中药植物来源,分离提取工艺以及花椒毒酚的生物活性、药理作用进行综述,以期为临床、基础研究以及药物开发提供参考....
[硕士论文] 陈曦
眼科学 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:观察调控衰老标记蛋白30(Senescence Marker Protein30,SMP30)含量的改变对人晶状体上皮细胞株(Human Lens Epithelial Cells,HLEC)SRA01/04增殖和凋亡的影响,为白内障病因和预防机制的研究提供新的思路。
  方法:①预感染实验确定SRA01/04细胞是否易于被慢病毒感染及其最佳感染条件:将处于对数生长期的SRA01/04细胞按2×103/孔的密度接种96孔板,待细胞密度增至20%时,用慢病毒GV115-NC(pGcsil-004)在四种培养液(完全培养基、含5μg/ml助感染试剂的完全培养基、感染增强液、含5μg/ml助感染试剂的感染增强液)及三种复感染指数(1、10、100)的培养条件下感染SRA01/04细胞,每组三个样本、所有实验至少重复三次。②SMP30过表达和沉默稳定株构建:确定好感染条件和最佳病毒滴度后,将处于对数生长期的SRA01/04细胞按5×104/孔接种6孔板,待细胞密度增至20%时采用两组RGN(Regucalcin,SMP30)慢病毒LV-RGN(Lentivirus-Regucalcin)和LV-RGN-RNAi(Lentivirus-Regucalcin-RNA interference)以及相应的阴性对照组病毒感染细胞,24h后将感染溶液换成正常完全培养基,感染后72h在荧光显微镜下观察荧光强度。当细胞密度达到90%时,加入2μg/ml嘌呤霉素(Puromycin)杀死未感染细胞,后续细胞传代培养中维持1μg/ml嘌呤霉素持续筛除未被慢病毒感染的细胞。转染成功后,运用WB(Western Blot,蛋白质印迹)和q-PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,实时定量聚合酶链反应)检测SMP30/RGN过表达和沉默效率,以明确细胞株构建成功。③细胞增殖和凋亡检测:使用细胞计数试剂盒Kit-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测量细胞活力,运用5-溴脱氧尿苷(BrdU)测定各组细胞增殖;通过PI FACS周期试剂盒测量细胞周期,并运用流式细胞术通过膜联蛋白-ⅤAPC测定细胞凋亡;运用western印迹测定SRA01/04中caspase-3的含量,间接反映细胞凋亡率。
  结果:①通过转染预实验,确定Normal Medium+Polybrene(5μg/ml)(含5μg/ml助感染试剂的完全培养基)和病毒滴度MOI=5为SRA01/04细胞的最佳转染条件。②使用q-PCR和WB技术来确定SMP30过表达(Overexpression,OE)和沉默(Knock Down,KD)SRA01/04细胞系的转染效率,OE组(19.373±1.445)的RGN表达量为NC-OE(Overexpression Negative Control Group)组(1.023±0.253)的19.373倍(t=-21.659,p<0.01),相对于NC-KD(Knock Down Negative Control Group)组(1.003±0.1),KD组(0.039±0.003)的沉默效率为96%(t=16.729,p<0.01)。与相应空载组相比,OE组SMP30蛋白表达量(1.338±0.186)显著增高(t=-9.039,p<0.01),KD组SMP30蛋白表达量(0.137±0.048)下降(t=13.006,p<0.01)。③通过CCK-8测定,与NC-KD(0.398±0.011)相比,KD组(0.355±0.008)细胞活力下降(t=7.466,p<0.01),OE组(0.415±0.01)与NC-OE组(0.402±0.009)相比没有差异(t=-2.189,p>0.05);Brdu增殖实验显示,与NC-OE组(0.682±0.006)相比,OE组(0.857±0.023)的细胞增殖有所增加(t=6.49,p<0.05),KD组(0.664±0.01)和NC-KD组(0.676±0.008)相比没有差异(仁1.61,p>0.05);PI FACS细胞周期测定结果显示,与相应空载组相比,KD组S期细胞减少(t=11.18,p<0.01)、G1期细胞增多(t=-12.97,p<0.01)、G2/M期细胞无明显变化(t=0.288,p>0.05),OE组S期细胞减少(t=12.643,p<0.01)、G1期细胞增多(t=-11.849,p<0.01)、G2/M期细胞增多(t=-12.447,p<0.01);膜联蛋白VAPC信号染色检测显示,与相应空载组比较,KD组细胞凋亡率较高(t=-5.986,p<0.01),OE组细胞凋亡率降低(t=13.181,p<0.05)。通过Western Blot检测发现,与各自对照组相比,OE组caspase-3的表达显著增加,KD组caspase-3的表达明显下降。
  结论:SRA01/04细胞易于被慢病毒感染,最佳感染条件为用病毒滴度等于5的病毒液在含5μg/ml助感染试剂的完全培养基中感染细胞。慢病毒转染SRA01/04细胞的沉默和过表达效率佳,成功构建的稳定株可以用于后续实验。衰老标记蛋白30含量的增加可以促进人晶状体上皮细胞SRA01/04增殖并抑制其凋亡,增加SMP30的表达量或许可以保护HLEC SRA01/04免受凋亡引起的白内障。
[硕士论文] 陈曦
外科学(泌尿外科) 广西医科大学 2016(学位年度)
摘要:目的:探究慢性非细菌性前列腺炎患者及正常对照组前列腺液中锌离子浓度和前列腺特异性抗原(PSA)浓度差异,探讨前列腺液中锌离子浓度、PSA浓度和前列腺液常规检查指标的检测对于慢性非细菌性前列腺炎患者病情评估以及指导治疗的临床应用价值。
  方法:研究对象为泌尿男科门诊就诊的ⅢA型、ⅢB型、Ⅳ型前列腺炎患者及正常对照人群,共计358例,其中ⅢA型144例、ⅢB型65例、Ⅳ型52例,正常对照组97例,并采用前列腺按摩的方法收集患者的前列腺液。采用美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)问卷评估和量化患者前列腺炎症状及其严重程度。采用化学比色法和(酶联免疫吸附测定)ELISA方法分别测定前列腺液中锌离子浓度和PSA浓度。用显微镜在400×高倍视野下对白细胞和卵磷脂小体进行计数,并用pH5.5~9.0精密pH试纸测定前列腺液pH值。
  结果:有慢性前列腺炎症状的ⅢA型和ⅢB型前列腺炎患者前列腺液中锌离子浓度均明显低于无慢性前列腺炎症状的Ⅳ型前列腺炎患者和正常对照组(均P<0.05);有慢性前列腺炎症状的ⅢA型组和ⅢB型组之间锌离子浓度无明显差异(P>0.05),无慢性前列腺炎症状的Ⅳ型组和正常组之间锌离子浓度亦无显著差别(P>0.05)。ⅢA型前列腺炎患者前列腺液中PSA浓度较正常对照组人群显著下降(P<0.05)。在总体样本中,前列腺液锌离子浓度与NIH-CPSI评分(疼痛评分、生活质量评分以及总评分)均呈负相关(均P<0.05),而锌离子浓度与NIH-CPSI排尿评分无明确相关性(P>0.05)。前列腺液中PSA浓度与NIH-CPSI评分(疼痛评分、生活质量评分、总评分)均呈负相关(均P<0.05),而PSA浓度与NIH-CPSI排尿评分无明确相关性(P>0.05)。并且,锌离子浓度与PSA浓度呈正相关关系(P<0.001);锌离子浓度和PSA浓度均与白细胞(WBC)计数和pH值呈负相关(均P<0.05)。锌离子浓度与卵磷脂小体(LB)计数呈正相关关系(P<0.05),而PSA浓度与LB计数无相关关系(P>0.05)。ⅢA型、IIIB型及IV型前列腺炎患者对应的NIH-CPSI量表评分、前列腺液WBC计数及LB计数之间均无明确相关关系(均P>0.05)。
  结论:前列腺液中锌离子和PSA浓度与慢性非细菌性前列腺炎患者疼痛症状严重程度相关。前列腺液中锌离子和PSA浓度的检测对于慢性非细菌性前列腺炎的病情评估和指导治疗具有的参考价值。WBC计数和LB计数对慢性非细菌性前列腺炎患者的病情评估并不可靠。
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