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摘要:以不同菌种制作的四种米发糕为原料,采用体外模拟消化方法,研究其胃肠水解物的成分及其抗氧化活性,为米发糕营养评价提供依据.结果表明,发酵微生物种类对米发糕胃肠水解物的组成及抗氧化活性有显著影响.胃肠水解物中的肽具有良好的·OH清除能力和Fe2螯合能力,以酵母菌ZSM-001和乳酸菌ZSM-002、安琪酒曲和酵母粉发酵制作的米发糕胃肠水解物中的可溶性肽含量较高.胃肠水解物中的蛋白质具有良好的·OH清除能力和还原能力,酵母菌ZSM-001和米根霉ZSM-003发酵制作的米发糕,其胃肠水解物的还原能力较强.可溶性糖的Fe2+螯合能力最强,以安琪酵母和酒曲制作的米发糕胃肠水解物的可溶性糖含量最高.
摘要:植物SnRK1 蛋白激酶家族(Sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 1 )属于Ser/Thr类蛋白激酶,广泛存在于生物体中,在维持生物体内能量稳态方面发挥着重要作用.本文主要对植物SnRK1 蛋白激酶复合体的结构、活性调节、SnRK1 参与植物生长发育和品质的调控以及参与植物抗逆4个方面进行综述,并对SnRK1 蛋白激酶在育种应用方面进行了讨论.
摘要:本文采用文献计量的方法,对1994年至2017年3月期间发表在中国知网中所有主题为"教师工作满意度"的文献统计分析发现:教师工作满意度的研究已经历了起步期、积累期、发展期;研究成果发布范围分布非常分散;研究者重复率较低、新增量较高、未形成成熟的核心作者群.
摘要:以‘早佳’(8424)西瓜为供试材料,在6 mmol· L-1 K+0 mmol·L-1 Na、0.01 mmol· L-1 K+0 mmol· L-1 Na、0 mmol· L-1 K+0.01 mmol· L-1 Na、0.01 mmol· L-1 K+5.99 mmol· L-1 Na、0 mmol· L-1 K+0.01 mmol· L-1 Na、6 mmol· L-1K+6 mmol·L-1 Na条件下水培处理10d,分别测定植株干质量,叶绿素含量、光合速率、气孔导度、K、Na浓度.结果表明,以正常供钾(6 mmol·L-1K+0 mmol·L-1 Na)为对照,0.01 mmol·L-1 K+0 mmol·L“Na和0 mmol·L-1 K+0.01 mmol·L-1Na处理下西瓜植株的干质量、光合速率和钾浓度的降低程度相当,叶片干质量分别下降了57%和58%,表明低浓度的钠起到了代替钾生理功能的作用;相反,0.01 mmol·L-1 K+5.99 mmol·L-1 Na和0 mmol· L-1 K+6 mmol· L-1 Na处理加重了低钾胁迫对西瓜植株生长的抑制作用,植株干质量和光合速率显著下降,叶片干质量分别下降了63%和67%,光合速率下降了66%和68%,表明低钾下较高浓度的钠对西瓜产生了毒害作用;6 mmol· L-1 K+6 mmol· L-1 Na处理对西瓜植株的干质量无显著影响,但光合速率和钾浓度有所降低,光合速率下降了28%,表明正常钾水平下较高浓度的钠对植株具有一定伤害,但比低钾下钠的伤害要轻.本研究结果表明,低浓度的钠能代替钾的部分生理功能,而较高浓度的钠会对植株产生伤害,尤其是西瓜植株处于较低钾水平的情况下.
摘要:矿质营养对西瓜甜瓜植株的生长发育至关重要,合理的矿质营养供应有利于提高果实的产量和品质.本文综述了矿质营养对西瓜甜瓜生长发育的影响,分析了西瓜甜瓜对矿质营养的需求规律,总结了提高西瓜甜瓜化肥利用效率的技术措施,并对未来的研究方向进行了展望,旨在为西瓜甜瓜矿质营养研究和化肥减量增效栽培提供参考.
[硕士论文] 陈晨
蔬菜学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:以钾低效基因型西瓜早佳(ZJ),钾高效基因型西瓜勇士(YS)为材料,通过构建不同嫁接组合以及外源施用生长素类似物(NAA)、生长素极性运输抑制剂(NPA和TIBA),以正常钾(3mM)为对照,对低钾(0.01mM)条件下三方面进行了研究:(a)ZJ和YS根系构型差异及生长素相关转运基因的表达特点;(b)不同西瓜接穗对砧木根系钾吸收和生长素含量的影响;(c)外源生长素及抑制剂对ZJ和YS钾吸收的影响。研究结果如下:
  1.研究了低钾对西瓜根系构型特点、以及钾吸收和生长素转运基因的影响,结果表明,在受到低钾处理12d后,ZJ和YS幼苗均受到抑制,但YS受到的抑制程度相对较轻。ZJ和YS在低钾下根系和叶片的钾含量比对照均下降,ZJ根系及叶片的钾含量下降幅度大于YS,高亲和钾吸收基因Cla012760(HAK5)在YS中的表达量相对于对照上调幅度更大,生长素转运基因Cla017975(AUX1)、Cla018455(PIN1)等在YS植株根系内的相对表达量更高,暗示了生长素可能在西瓜钾吸收中发挥作用。
  2.研究了不同接穗对西瓜幼苗生长、钾吸收和生长素含量及转运基因表达量的影响,结果表明,耐低钾西瓜YS作为接穗提高了低钾敏感西瓜ZJ在低钾下的适应能力,与Z/Z自嫁相比,Y/Z西瓜幼苗的根系总长、根系体积、根系表面积以及根尖数量均有所增加,叶片和根系的组织钾含量也显著提高,低钾下根系和叶片生长素的含量均显著增加,相关基因Cla012760(HAK5),Cla017975(AUX1),Cla018455(PIN1),Cla01887(PIN2)的相对表达量显著提高,表明植株对低钾的耐受型与其地上部分通过生长素调控钾的吸收存在联系。
  3.研究了外源生长素类似物NAA、生长素运输抑制剂NPA和TIBA对ZJ、YS根系生长及钾吸收能力的影响,结果表明,正常钾条件下,NAA能够提高ZJ和YS根系及叶片钾含量,但在低钾条件下对ZJ和YS的影响存在差异,从根系构型和基因表达的结果看,YS对外源NAA更为敏感,可能与本身内部已经具有较高的生长素含量有关。抑制剂NPA、TIBA对正常和低钾下ZJ和YS生长存在抑制作用,NPA和TIBA处理同时提高了低钾下ZJ和YS的根系钾含量,降低了叶片钾含量。
  本研究结果表明,嫁接西瓜接穗能通过生长素调控砧木根系生长和钾吸收,但是详细的作用机制还需要进一步研究。
摘要:人民陪审团制度是我国一项重要制度,为完善现有的不足、更好发挥陪审员的审判、调解和宣传的作用,2015年最高人民法院印发的《办法》体现其创新方向在于人民陪审员由精选走向大众、长期走向随机、专业走向常理,以真正实现代表人民、为民发声的初衷.
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:本研究旨在鉴定猪miR-135a-5p靶向脂肪发育的相关基因.首先,利用生物信息学软件分析发现,结肠腺瘤性息肉病(APC)基因的3’非翻译区(3' UTR)具有两个与猪miR-135a-5p结合的潜在位点.其次,构建APC基因野生型(APC 3'UTR)和突变型(APC 3'UTR m1、APC 3'UTR m2、APC 3'UTR m3)3' UTR双荧光素酶载体,并分别将其与miR-135a-5p mimics、阴性对照(NC)共转染PK-15细胞后检测荧光活性.结果显示:miR-135a-5p mimics显著降低APC 3 ' UTR和APC 3'UTR m2载体的荧光活性(P<0.05),而APC 3'UTR m1和APC 3' UTR m3载体的荧光活性得到完全恢复,表明miR-135a-5p主要结合在预测的第一个位点.进一步的分析表明,miR-135a 5p抑制猪前体脂肪细胞内源APC基因的mRNA和蛋白质表达水平.研究结果证实,猪miR-135a-5p靶向APC基因,且调控其表达.本试验为深入研究猪miR-135a-5p的生物学功能及其调控脂肪形成的作用机制提供了基础.
摘要:为了建立新城疫病毒(NDV)耐热弱毒株的反向遗传操作平台,以NDV TS09-C耐热弱毒株为研究对象,构建了TS09-C株的全长cDNA克隆质粒和3个分别表达NP、P和L的辅助质粒.通过4个质粒共转染预感染有表达T7 RNA聚合酶的痘病毒的BHK-21细胞,拯救出了重组病毒rTS09-C株.生物学特性试验结果表明,重组病毒rTS09-C株具有与亲本株相似的耐热、弱毒和细胞增殖特性.NDV耐热毒株反向遗传操作系统的建立为耐热活疫苗载体的研究,进一步研发新型多联(多价)耐热禽用活疫苗提供了技术平台,也为耐热机理的研究打下基础.
[硕士论文] 陈晨
农村与区域发展 华中农业大学 2016(学位年度)
摘要:小麦作为我国三大粮食作物之一,其价格的问题一直是社会关注的热点。自我国实行粮食市场化改革以来,市场机制在粮食价格的形成中逐步发挥着主要作用。在供求规律等因素的影响下,小麦价格的波动变得越来越频繁,区域间小麦市场发展的差距也逐步加大,这对小麦产业的整体发展产生不利影响。虽然我国小麦的生产实现了十二年连增,但我国普通小麦库存过多,优质小麦生产不足,产品价高质低,生产的结构不合理,面对进口小麦缺乏竞争力。因此在中央提出了“农业供给侧结构性改革”的背景下,研究小麦价格波动特点及其传导机制,对于稳定小麦价格、优化产品结构、促进小麦产业健康发展具有重要意义。
  本文针对小麦与面粉的价格传导机制问题,以市场整合相关理论为基础,首先对我国小麦产业进行一般性研究,阐述小麦与小麦加工业的发展现状、价格波动情况以及存在的问题;其次,以主产区小麦与面粉市场价格为例,运用协整检验、VAR模型、脉冲响应函数等方法,对我国小麦纵向市场价格传导机制进行研究;最后,运用协整检验、格兰杰因果检验等方法对区域间小麦和面粉的市场整合情况分别进行探讨,将理论研究与实证分析相结合,从而得出相关结论,并对小麦市场的发展有针对性的提出政策建议。
  研究显示,对于我国小麦产业发展现状而言,近几年小麦产量稳定,供需基本平衡,生产集中化趋势明显,但我国优质小麦生产不足,需进一步调整生产结构。对于小麦产业纵向价格传导机制研究而言,小麦市场存在着一定程度的协整,同时协整关系对短期价格具有修正作用,但各地差异明显,协整程度有待于进一步提高。另外,上下游市场存在着相互影响,更多的为上游市场影响下游市场。对于区域间小麦与面粉的市场整合研究而言,认为小麦与面粉市场各自存在着协整关系,各个市场联系较为密切,面粉市场间协整关系对短期价格的修正作用比小麦市场高,由于政策等因素的影响,我国小麦市场并未形成一个全国性的竞争市场。基于此,我国应继续发挥市场的决定作用,同时合理改进价格支持政策,不断提高小麦产业的市场效率。
摘要:[目的]采用超声波法提取苎麻叶片绿原酸,设定不同提取条件测定含量并得出最优提取条件.[方法]对苎麻头麻叶片烘干处理后,以一定浓度乙醇为提取液,设定乙醇浓度、料液比、温度、pH、提取时间为单因素,采用超声波法提取,并根据单因素实验结果,选取乙醇浓度、料液比、pH三个因素设计正交实验.[结果]各单因素对提取效果影响较大,温度设定常温,提取时间2h最佳;正交结果表明,最优提取条件为40%乙醇、pH =5、料液比1∶16.[结论]苎麻叶中含有0.745%的绿原酸,采用超声波法提取效果好,方法简便易行.
摘要:[目的]探讨玉米染色体片段导入系在氮胁迫下的生长反应.[方法]在正常供氮(N+)与氮胁迫(N-)条件下,对玉米染色体片段导入系产量和苗期性状进行了研究.[结果] Ye478与5个导入系产量和苗期性状有明显差异;与N-相比,N+条件下产量和不同处理时期苗期生物量均有增加,其中L58和L28产量因子增幅较小,是氮胁迫条件下氮高效利用的导入系;L8增幅较大,是氮胁迫条件下氮低效利用的导入系.[结论]为耐低氮玉米品种的选育提供了理论依据.
摘要:中国-东盟自由贸易区的建立,推动了双方的经济合作,中国蔬菜在东盟的市场份额不断扩大。本文首先研究了近几年中国与东盟对世界蔬菜贸易的主要特征和变化趋势以及中国对东盟同期的蔬菜出口变化情况。认为中国与东盟的蔬菜贸易不断增加,但存在出口结构有待进一步优化,出口集中度较高等问题。对此,提出相应的政策建议以提升中国蔬菜出口竞争力。
摘要:本研究使用FUGENE HD转染试分别将miR-183 mimics及miR-183 control转染至3T3-L1细胞,对细胞进行诱导分化,收集不同分化阶段的细胞样品,对脂肪细胞分化标记基因进行Q-PCR检测分析。Q-PCR结果显示d7和d9 miR-183 mimics组和miR-183 control组的脂肪分化标记基因C/EBPa, PPARγ, FAS和adiponectin的表达量基本相同,而细胞分化前期,这些基因在miR-183 mimics组中高表达,推测miR-183可能促进脂肪细胞的分化。
摘要:本文用Q-PCR检测方法分析miR-135a-5p在脂肪细胞分化过程中的作用.Q-PCR结果表明,miR-135a-5p抑制脂肪细胞分化标记基因和脂肪形成基因的表达.油红O染色结果及甘油三酯含量的测定结果也证实,miR-135a-5p抑制3T3-L1细胞脂肪的形成.因此,miR-135a-5p通过抑制关键基因C/EBPα和PPARγ的表达来阻碍脂肪的形成.同时,靶基因的双荧光素酶报告基因检测结果说明,miR-135a-5p与APC具有明显的互相作用,推测APC很可能是miR-135a-5p的靶基因.研究已证实经典WNT通路脂肪细胞分化的负调控因子.APC是经典WNT信号向细胞内转导的主要成员,已有研究表明APC的敲除激活经典WNT通路.但miR-135a-5p是否通过调控经典WNT通路来影响脂肪细胞分化仍需要进一步深入研究.
[硕士论文] 陈晨
基础兽医学 华中农业大学 2014(学位年度)
摘要:新城疫(Newcastle Disease,ND)对禽类具有高度的传染性和致病性,世界范围内曾经发生几次大规模流行,对养禽业造成的损失巨大。病原体新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)是单股负链RNA病毒,结构蛋白包括核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、神经氨酸酶-血凝素(HN)和聚合酶蛋白(L)。疫苗接种是目前防控新城疫的行之有效的方法,新城疫疫苗中的弱毒活疫苗具有副作用小、接种方式便捷多样等优点,为养殖户节约免疫时间和人力成本,受到养殖企业尤其是广大偏远散养户的欢迎。
  本课题组前期进行了NDVV4株的选育工作,获得了耐热低毒且适应BHK-21细胞的TS09-C株,进一步成功构建了TS09-C株的反向遗传操作系统,实现了外源GFP基因在rTS09-C株的插入和表达,这些研究成果为本课题在分子水平继续筛选全长cDNA上合适的外源基因表达位点奠定了基础。参考了相关文献,我们在结构基因NP、M、L的转录起始点分别插入GFP基因,将GFPORF与病毒结构基因融合转录,同时为了降低GFP插入对结构基因表达的影响,在GFPORF的5'端加上结构基因转录起始点ATG后的60bp序列,GFP基因与结构基因(SG)整合为融合转录框5'UTR-60Head-GFP-2AUbi-SG-3'UTR,表达后的融合蛋白被裂解为GFP和病毒结构蛋白。
  本课题中应用限制酶内切pTS09-C质粒,分别获得3个线性化载体,PCR扩增插入序列GFP和2AUbi,In-Fusion连接GFP、2AUbi和线性化载体,获得了3个全长质粒,外源序列的DNA测序结果及全长质粒酶切鉴定结果均与预期相符,说明3个全长质粒构建成功。利用反向遗传操作技术将3个全长质粒分别与辅助质粒共转染BHK-21细胞,在荧光显微镜下检测绿色荧光信号,及时收获阳性信号的细胞,细胞液的HA,real-timePCR和IFA的检测结果均为NDV阳性,Western-Blot检测GFP的结果为阳性,说明表达GFP的NDV拯救成功,按照GFP嵌入位置不同将重组病毒分别命名为rTS-GFP/NP、rTS-GFP/M、rTS-GFP/L,这也是首次利用融合表达自切割方式成功拯救出表达外源GFP蛋白的NDV。
  本课题比较了3株重组病毒rTS-GFP/NP、rTS-GFP/M、rTS-GFP/L的增殖速率和GFP表达效率。方法是将3株病毒均按0.1MOI病毒量接种BHK-21细胞,接毒后24h、48h、72h、96h时间点分别采集荧光图片、收取培养液上清和受感染的细胞。测定培养液上清的TCID50,并绘制病毒的一步生长曲线,结果显示rTS-GFP/M增殖效率最高,与亲本株rTS09-C基本一致,而rTS-GFP/M和rTS-GFP/L增殖效率都有不同程度降低。绿色荧光强度动态观测图结果显示rTS-GFP/M的荧光强度最高,对受感染细胞的GFP进行Western-Blot检测结果显示rTS-GFP/M的条带最亮,说明rTS-GFP/M既保持了细胞内高增殖特性又可以高效表达GFP,综合比较的结果表明结构基因M转录起始点是较合适的外源基因表达位点。纯化后的rTS-GFP/M株病毒颗粒进行GFP的Western-Blot检测,结果为阳性,表明GFP嵌入到病毒颗粒,激光共聚焦显微镜显示细胞核中也存在GFP,但rTS-GFP/M只存在细胞质中,说明rTS-GFP/M表达的GFP以嵌合和游离两种形式存在。
  疫苗免疫保护率试验中使用105.0EID50rTS-GFP/M和V4免疫1日龄SPF雏鸡,免疫2周后采血,结果显示rTS-GFP/M组血清HI抗体较低。进行攻毒保护实验,使用1060EID50致死剂量NDV强毒CA02,结果rTS-GFP/M组和V4组雏鸡达到完全保护率。
  综上所述,我们报道了3株表达GFP的NDV,即rTS-GFP/NP、rTS-GFP/M、rTS-GFP/L,通过比较它们的增殖速率和GFP的表达效率,确定了融合转录自切割方式,在M基因转录起始位点(rTS-GFP/M)是较为合适的外源基因表达位点。免疫rTS-GFP/M后的SPF雏鸡可以完全抵抗NDV强毒攻击,初步表明rTS09-C株重组病毒具有作为耐热疫苗载体的潜力。但是我们发现经过rTS-GFP/M单次免疫1日龄SPF雏鸡,体液免疫应答产生的血清HI抗体滴度较低(log2<3),这值得我们进一步思考如何对疫苗免疫效果进行评估,或许也说明了疫苗免疫应答反应中,有待进一步研究除了体液免疫之外的保护机制。
摘要:解没食子酸链球菌巴氏亚种既可以感染人也可以感染动物,在最近的相关报道中人类感染主要是引起新生儿的脑膜炎和菌血症,以及成年人的脑膜炎,解没食子酸链球菌巴氏亚种已逐渐成为感染新生儿脑膜炎的主要病原体.还报道了火鸡、鹅等家禽感染该菌,且死亡率较高.本研究主要是用此临床发病鸭脑组织分离到的解没食子酸链球菌巴氏亚种菌株感染雏鸭,采用不同的感染途径和日龄,建立疾病复制模型,研究雏鸭感染解没食子酸链球菌巴氏亚种的临床发病特点,剖检病理变化及组织学病理变化特点,研究不同的感染途径和日龄对雏鸭的致病特点.不同接种途径致雏鸭的临床症状、剖检病理变化和组织学病理变化基本一致,说明接种途径对雏鸭感染该菌没有明显影响;不同日龄接种比较,14日龄组的雏鸭,临床症状、剖检病理变化和组织学病理变化都较7日龄组轻微,可以提示解没食子酸链球菌巴氏亚种对一周龄的雏鸭致病性较强。颈部皮下感染途径对雏鸭的致死率较高,可能是由于没有粘膜屏障,细菌快速进入血液循环,且接种部位离胸腺最近,对雏鸭的胸腺损伤可能更严重,因此引起的死亡率也较高。
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