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摘要:目的 探讨乳腺浸润性导管癌(IDC)超声特征与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类上皮生长因子受体2(CerB-2)、增殖细胞核抗原(Ki-67)表达的相关性.方法 收集2015年6月至2019年2月我院收治的189例IDC患者的临床资料,对超声资料及分子病理学指标进行分析.结果 ER、PR、CerB-2、Ki-67蛋白在IDC中的阳性表达率分别为63.4%(120/189)、52.9%(100/189)、45.5%(86/189)、65.6%(124/189).IDC超声表现为肿块边缘有毛刺征患者的ER、PR阳性率高于无毛刺征患者,差异有统计学意义(70.0%vs.56.2%,60.0%vs.44.9%,P<0.05),有微钙化患者的CerB-2、Ki-67阳性率高于无钙化患者,差异有统计学意义(53.4%vs.38.8%,73.2%vs.59.2%,P<0.05),血流信号丰富患者的CerB-2、Ki-67阳性率高于乏血供患者,差异有统计学意义(52.2%vs.35.8%,72.1%vs.56.4%,P<0.05),有腋窝可疑淋巴结患者的CerB-2阳性率高于无可疑淋巴结患者,差异有统计学意义(54.3%vs.34.8%,P<0.05).结论 IDC的超声特征与ER、PR、CerB-2、Ki-67的表达有相关性,超声检查可为乳腺癌的术前诊断、治疗及评估预后提供重要依据....
摘要:目的:分析腮腺Warthin's瘤和基底细胞腺瘤的临床资料及超声声像图特征,为术前两者的鉴别诊断提供依据.方法:回顾性分析经病理证实的52例腮腺Warthin's瘤和27例基底细胞腺瘤(BCA),比较两组患者的发病年龄、性别、病程、发病部位,肿瘤的最大径、形态、边界,其超声检查结果内部回声、有无包膜、后方回声是否增强及血流分布情况.结果:Warthin's瘤多发生于中老年男性,而基底细胞腺瘤患者年龄通常较Warthin's瘤为轻,且女性多见(P<0.05).大多数Warthin's瘤肿瘤最大径较基底细胞腺瘤大,网格样回声常见,有较丰富血流信号.而基底细胞腺瘤常为均匀一致的实质性肿块,常见液化,有完整包膜,肿块后方回声增强,无或有少许血流信号.结论:根据患者年龄、性别等临床资料结合超声声像图特征性表现,可于术前有效鉴别腮腺Warthin's瘤和基底细胞腺瘤,为手术方案的选择及进一步的临床治疗提供依据....
摘要:根据近60多年皖西地区6个站点的月降水量等资料,研究ENSO事件对皖西地区四季、各月降水的影响以及对事件当年和次年的降水的影响,分析皖西地区旱涝灾害与ENSO事件之间的关联.结果表明:ENSO事件对皖西地区降水量的影响随季节、月份的不同而产生不同的变化;在春夏季,降水量较常年变化为50.4%,而在秋冬季,降水量较常年的变化为-42%.ENSO事件对次年降水也有影响,春季开始的ENSO事件次年年均降雨量减少了23.8%,夏秋季开始的ENSO事件次年春夏季降水量增加了71.1%,而秋冬季减少了30.3%.在 ENSO事件当年或次年,皖西地区出现旱涝灾害的可能性约为75%....
摘要:原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)作为精细胞的祖细胞,广泛用于研究精子的发生.成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族对PGCs的形成至关重要.为了探究成纤维生长因子8(FGF8)的具体功能,本研究通过构建家鸡(Gallus domesticus) FGF8的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)慢病毒干扰载体,获得稳定低表达FGF8的鸡胚胎干细胞株,并进一步研究FGF8在鸡胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向PGCs分化中的功能.根据家鸡FGF8的转录本设计3个RNA干扰靶点,连接到pGMVL-SC5干扰载体,瞬时转染鸡胚成纤维细胞DF1.以qRT-PCR技术检测各靶点对FGF8的干扰效率,将干扰效率最佳的shRNA载体进行慢病毒包装.在以慢病毒敲低FGF8的ESCs中进行视黄酸(retinoic acid,RA)诱导,观察各组细胞形态变化,收集不同时间的各组细胞,利用qRT-PCR、间接免疫荧光以及流式细胞术等方法,分析检测生殖相关标记基因的表达变化和PGCs形成效率.结果表明,FGF8慢病毒干扰载体构建成功,分别命名为shFGF8-1、shFGF8-2、shFGF8-3,其中shFGF8-2干扰效率最佳.将shFGF8-2进行慢病毒包装,获得滴度为5×108 TU/mL、干扰效率为(70±4.31)%的慢病毒载体.对于FGF8表达抑制的ESCs,体外RA诱导4d后,PGC样细胞显著增加,ESC标记基因Nanog表达极显著下调(P<0.01),PGC标记基因Cvh C-kit表达极显著上调(P<0.01).此外,免疫荧光及流式细胞术分析结果也进一步证实,诱导4d后与对照组比较,FGF8低表达使CVH+PGCs比例显著增加(P<0.01).本研究成功构建了稳定转染鸡胚胎干细胞的FGF8特异性慢病毒载体,并证实FGF8在体外参与调控PGCs的形成....
摘要:原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)作为配子的原始祖细胞,参与胚胎生殖细胞的发育过程.类固醇激素通路中3β羟基类固醇脱氢酶2(3β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,Hsd3β2)能促进细胞分化,但其对原始生殖细胞的形成具体调控机制还不得而知.本研究旨在通过构建类固醇激素合成过程中关键基因Hsd3β2的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰载体并研究其对鸡(Gallus gallus)胚胎干细胞分化为原始生殖细胞的影响.通过慢病毒包装Hsd3β2感染鸡胚胎干细胞并进行RNA干扰(RNAinterference,RNAi)诱导,分别于2、4、6d观察细胞形态变化并收集细胞样品,qRT-PCR检测Hsd3β2、生殖标记基因鸡Vasa基因同系物(chicken vasa homologue,Cvh)、鸡KIT原癌基因受体酪氨酸激酶(chicken KIT proto-oncogene receptor tyrosine kinase,C-kit)及甾类激素合成信号通路下游基因细胞色素P450亚酶(cytochrome P450 subenzyme,Cyplal)、葡萄糖醛酸转移酶1A1 (UDP glucuronosyltransferase family 1 member A1,Ugt1a1)和17β羟基类固醇脱氢酶7(17beta-hydroxysteroid dehydrogenase7,Hsd17b7)表达;流式细胞检测诱导产生类胚体阳性率;在鸡胚孵化过程中鸡胚注射慢病毒干扰载体,孵化4.5 d后收集生殖嵴,qRT-PCR检测Cvh、C-kit及下游基因Cyp1a1、Ugt1a1和Hsd17b7表达;流式细胞分析原始生殖细胞生成效率.本实验成功构建sh-Hsd3β2慢病毒载体,挽救实验表明过表达Hsd3β2能使shRNA引起的基因表达下降回升;在体外诱导过程和鸡胚孵化过程中,qRT-PCR结果表明干扰Hsd3β2后,甾类激素合成信号通路中的下游基因的表达显著下调(P<0.01);在RA诱导实验过程中,随诱导时间推进,类胚体数量逐渐增加.Hsd3β2抑制后,类胚体形成数量减少.Cvh、C-kit在诱导过程中上调表达,但Hsd3β2干扰后,其表达显著降低(P<0.01),流式细胞分析表明干扰Hsd3β2后,诱导4d后产生类胚体阳性细胞(3.27±0.19)%显著低于对照组(7.39±0.09)%;体内实验结果表明干扰Hsd3β2后,Cvh、C-kit表达显著降低(P<0.01),生殖细胞数量显著减少.本研究结果表明Hsd32能通过甾类激素合成信号通路促进原始生殖细胞的形成,为研究该通路对原始生殖细胞形成具体机制提供理论基础....
摘要:为克隆如皋黄鸡Stra8基因的3'UTR,寻找靶向Stra8基因的microRNA(miRNA),以鸡精原干细胞的cDNA为模板,根据NCBI数据库Stra8的CDS序列设计引物,通过3'RACE技术克隆Stra8基因的3'UTR,并构建相应的荧光素酶表达载体和突变载体;利用生物学预测软件对靶向Stra8 3'UTR的miRNA进行预测,选择评分最高的miRNA进行慢病毒载体构建;以pRL-TK为内参,分别将miRNA与Stra8 3'UTR荧光素酶表达载体和突变载体共转染DF-1细胞,利用双荧光素酶基因报告系统对miRNA进行活性检测.结果表明,采用3'RACE技术成功克隆Stra8 基因的3'UTR;Targetscan生物在线软件预测到靶向Stra8基因的4个特异性较高的miRNA,并成功构建其相应的慢病毒载体;双荧光素酶活性检测结果显示,gga-miR-1a、gga-miR-31、gga-miR-218均可通过3'UTR序列抑制Stra8基因的表达,其中gga-miR-31抑制效果最佳.该结果可为后续深入探讨gga-miR-31介导调控的Stra8基因在雄性生殖细胞分化中的调控网络提供依据....
摘要:目的:探讨超声造影(CEUS)在体检初次发现的肝脏低回声病灶定性诊断中的临床应用价值。方法对53例患者共69处体检发现的肝脏内低回声病灶进行 CEUS 检查,以病理学诊断或其他影像学诊断结合随访结果为对照,比较 CEUS 与常规超声在体检初次发现的肝脏低回声病灶定性诊断中的效能。结果69个低回声病灶中良性病灶共计48个(69.6%),恶性病灶21个(30.4%)。常规超声对良、恶性低回声病灶诊断的符合率分别为91.7%(33/36)、52.4%(11/21),诊断准确性为77.2%(44/57);CEUS 对良、恶性低回声病灶诊断的符合率分别为100%(46/46)、95.5%(21/22),诊断准确性为98.5%(67/68),CEUS 对恶性低回声病灶诊断的符合率及准确性显著高于常规超声(c2=10.471,P=0.001、c2=13.034,P=0.000),而对良性低回声病灶诊断的符合率两者间无显著性差异(c2=1.966,P=0.161)。常规超声及 CEUS 对69个低回声病灶中不同病变的总检出率分别为37.68%(26/69)及94.2%(65/69),CEUS 的检出率显著高于常规超声(c2=46.592, P<0.0001)。结论 CEUS 对常规超声发现的肝脏低回声病灶有较高的定性诊断价值,可作为判定健康体检初次发现的肝脏低回声病灶性质的常规方法。...
摘要:论文旨在确定Dazl基因核心启动子活性调控区,并比较不同诱导剂的诱导效率,筛选出最佳基因诱导剂.用PCR技术扩增不同长度的Dazl基因启动子,插入到pEGFP-N1和/或pGL3-basic载体中,构建重组载体;再将这些重组载体分别转染DF-1细胞系和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Dazl基因启动子核心活性区域;添加单因素或多因素诱导因子,比较不同诱导剂以及诱导剂组合对鸡Dazl基因启动子活性的影响大小.如皋黄鸡Dazl基因的-932 bp~-186 bp区域在DF-1和GC-1两种细胞中,都有不同程度的启动活性,而-186 bp~-39 bp启动子活性几乎完全丧失;诱导剂筛选结果表明,FSH+E2组和Am80组、E2组能够显著提高Dazl基因启动子的活性,RA组、ATRA组、FSH组和睾酮组都不同程度地提高了启动子的活性,而睾丸提取液和BMP4对启动子活性没有显著影响.通过体外诱导实验筛选出如皋黄鸡Dazl基因最适诱导剂,为鸡ESCs体外向雄性生殖细胞分化的细胞诱导剂进一步筛选奠定了基础....
[专利] 发明专利 CN201910810444.4
扬州大学 2019-11-22
摘要:小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法,其特征是,设置不同浓度的小分子化合物组合体系,细胞形态学观察、毒性试验及qRT‑PCR检测相关基因的表达,验证小分子化合物在鸡CEFs诱导重编程中是否适用及其适宜诱导浓度;然后利用剔除法结合qRT‑PCR、间接免疫荧光、细胞流式分析技术、AKP染色、EDU细胞增值技术手段优化诱导体系,建立适宜鸡CEFs重编程诱导体系。本发明解决了器官来源及免疫排斥问题,同时为个体发育及遗传修饰与保存的研究提供了新方法;为后续诱导多能干细胞的使用奠定理论和技术基础,也为其他物种的化学诱导重编程研究提供参考。
[专利] 实用新型 CN201822247115.7
摘要:本实用新型公开了穿刺活检医疗器械领域内的一种乳腺穿刺固定装置及其使用方法,包括超声高频探头、探头电缆与超声诊断仪,超声高频探头放置在探头支架中部的定位槽内,探头支架的前后两侧均铰接有定位夹板,两块定位夹板之间设有弹性压紧机构,定位夹板的一侧底部设有弹性保护垫,探头支架的左右两侧均可拆卸连接有穿刺引导模块,穿刺引导模块上设有至少4个穿刺针引导槽;所述方法包括步骤:对乳腺消毒,用定位夹板固定乳腺和超声高频探头,通过超声诊断仪分析后,找出穿刺引导路线。本实用新型能够定位好高频超声探头与乳腺肿块的位置关系,提高探头稳定性,更精确地选择穿刺进针路径。
[专利] 发明专利 CN201910563547.5
扬州大学 2019-09-27
摘要:本发明涉及一种通过羽色结合分子遗传标记鉴别PGC移植后代鸡的鉴定方法,属于生物技术领域。为了解决PGC移植后代的鉴别问题,本发明采用后代鸡羽色和微卫星标记分析的方法成功对后代鸡的遗传来源进行鉴别。本发明适用于禽类的种质资源的保护和物种复原,本发明可行性强,鉴定准确,成本低。能够有效鉴别后代鸡的遗传组成,为基因编辑模型鸡生产提供技术支持。
[专利] 发明专利 CN201910593543.1
扬州大学 2019-10-18
摘要:本发明提供一种研究PGCs分化过程中Wnt信号与组蛋白联合作用于靶基因机制的方法,涉及生物技术领域,所述方法通过体内外实验验证组蛋白是否具有调控Wnt信号通路的靶基因的作用、分析在ESCs、PGCs和SSCs三个过程组蛋白是否在靶基因的启动子区差异性富集、检测组蛋白甲基化/去甲基化是否影响靶基因对Wnt信号的响应、检测组蛋白去甲基化修饰酶对β‑Catenin与靶基因启动子结合位点的结合能力的影响;根据检测结果判断在PGCs分化过程中,Wnt信号联合组蛋白作用于靶基因的作用机制。利用本发明所述方法对PGCs形成过程中Wnt信号协同组蛋白作用于靶基因进行研究,有利于渗入了解PGCs形成的网络机制。
[专利] 发明专利 CN201910514421.9
扬州大学 2019-09-06
摘要:本发明涉及一种新型鸡CEF重编程为PGC的诱导体系的建立方法,属于生物技术领域。在分离的原代CEF中,慢病毒外源导入OCT4,SOX2,NANOG,LIN28重编程因子,连续培养21天后,利用SSEA‑1抗体进行iPSC细胞株鉴定,鉴定为阳性的细胞株进行更换为BMP4/BMP8b/EGF诱导体系,诱导成为iPGC。本发明解决了濒危品种鸡PGC获取的数量低的问题,实现了濒危鸡品种的种质资源保护和物种复原工作。
[专利] 发明专利 CN201910593462.1
扬州大学 2019-09-24
摘要:本发明提供一种寻找胚胎干细胞向原始生殖细胞分化过程中Wnt信号通路的靶基因的方法,涉及生物技术领域,本发明所述方法首先对Wnt信号通路的关键转录因子TCF7L2进行靶基因预测,对预测靶基因进行GO功能注释,筛选出其中共同参与生殖细胞发育及干细胞分化的保守性靶基因作为待选靶基因;通过体内外试验验证Wnt信号对待选靶基因转录水平的调控作用,检测待选靶基因的启动子中所述转录因子结合位点缺失时、Wnt信号对待选靶基因转录水平是否有调节作用,通过ChIP‑qPCR验证β‑Catenin/转录因子复合物与待选靶基因的结合作用,从而确定待选靶基因是否对Wnt信号具有靶向响应作用。本发明所述方法简单易行。
摘要:为探究lncRNA在鸡生殖细胞中的调控作用,以如皋黄鸡受精蛋为试验材料,基于高通量测序筛选结果,利用RACE技术获取lncRNA-CEPT8序列全长,通过荧光定量检测和核质分离试验确定lncRNA-CEPT8的富集位置,并进行ORF开放阅读框预测及构建原核融合表达载体,提取蛋白质后利用Western blot技术检测lncRNA-CEPT8编码的小肽.结果 表明:lncRNA-CEPT8全长为1 248 bp,在鸡原始生殖细胞质中富集,具有大小为246 bp且编码81个氨基酸的ORF,Western blot检测结果表明lncRNA-CEPT8编码一条大小约为9 ku的小肽.这一研究为进一步探究lncRNA-CEPT8编码的小肽在鸡原始生殖细胞中的调控作用及其对生殖细胞的影响奠定了基础....
[专利] 发明专利 CN201910165488.6
扬州大学 2019-06-04
摘要:本发明涉及一种鸡胚胎成纤维细胞单克隆细胞系建立的方法,属于生物技术领域。在注射管中塞入干净干燥的棉球,将针管式滤器的大头连接注射器的针口,将橡皮管一头连接针管式滤器的小头,另一头连接处理过后的玻璃管,用于直接挑取细胞。本发明中口吸管采用的材料均容易购买,且价格低廉。组装完成后,成品操作简单,使用者可以挑取特定单个细胞进行单克隆培养,所采用的重组口吸管适用于所有类型的细胞。
[专利] 发明专利 CN201811632840.4
摘要:本发明公开了穿刺活检医疗器械领域内的一种乳腺穿刺固定装置及其使用方法,包括超声高频探头、探头电缆与超声诊断仪,超声高频探头放置在探头支架中部的定位槽内,探头支架的前后两侧均铰接有定位夹板,两块定位夹板之间设有弹性压紧机构,定位夹板的一侧底部设有弹性保护垫,探头支架的左右两侧均可拆卸连接有穿刺引导模块,穿刺引导模块上设有至少4个穿刺针引导槽;所述方法包括步骤:对乳腺消毒,用定位夹板固定乳腺和超声高频探头,通过超声诊断仪分析后,找出穿刺引导路线。本发明能够定位好高频超声探头与乳腺肿块的位置关系,提高探头稳定性,更精确地选择穿刺进针路径。
摘要:目的 探究情景模拟训练在低年资助产士产时服务护患沟通过程中的应用价值.方法 对本院12名低年资助产士进行情景模拟训练,内容包括确定相关指导教师,制定本次训练的目标、主题、场景,并开展产时服务预演练、正式演练,最终评价情景模拟训练实施效果.观察并比较训练前后低年资助产士产时服务护患沟通能力变化及患者对其满意度改变.结果 训练后低年资助产士在产时服务中的护患沟通能力较训练前显著提升,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);训练后患者满意度较训练前显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 对低年资助产士在产时服务护患沟通过程中施行情景模拟训练可明显提高其沟通交流能力,增强患者满意度,值得临床开展应用....
摘要:发展农业电子商务,是扬州市邗江区农业扩大销售和规模化发展的重要途径.主要通过问卷调查和信函采访的方式,对邗江区的农户、传统农业企业在电子商务上的发展现状以及现有的从事与农业相关的电商户/企业的发展现状进行了了解.目前,扬州市邗江区农业电子商务已经有了一定的发展,但仍然存在一定的问题.针对这些问题提出了相应的措施和方法....
[专利] 实用新型 CN201820385249.2
扬州大学 2018-11-27
摘要:本实用新型涉及一种简易的用于鸡胚显微注射的断针装置,属于生物技术领域。断针装置,包括电池组(1)、控制器(2)、马达(3)、砂轮(5),电池组(1)通过控制器(2)连接马达(3),马达(3)通过导线连接电池组(1),马达(3)通过联轴器(4)驱动连接砂轮(5)。本实用新型用于鸡胚显微注射针的断针,可以简便的根据需求对显微注射针进行断针,操作简便易行,结构合理简单,使用方便,成本低廉,易于推广应用。
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