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摘要:目的 建立MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导成骨细胞模型,为进一步了解成骨细胞形成机制打下实验基础.方法 MC3T3-E1 Subclone 14细胞培养至贴壁,加入条件培养基:L-抗坏血酸(50μg/mL)、β-甘油磷酸钠(10mmol/mL)、地塞米松(10-8mol/mL),培养至21d.倒置显微镜观察细胞形态;碱性磷酸酶(ALP)、Von Kossa染色鉴定成骨细胞和骨细胞;RT-PCR、Western-blot检测成骨细胞相关基因骨钙素、骨唾液酸蛋白、骨桥蛋白等相关生物学指标mRNA和蛋白表达水平,以鉴定成骨细胞体外形成.结果 1.体外诱导MC3T3-E1 Subclone 14至7d,倒置显微镜观察细胞成梭形;2.10d ALP染色结果显示:成骨细胞呈红色;3.14d Von Kossa染色结果显示:细胞表面有矿化结节形成;4.相关基因骨钙素,骨桥蛋白,骨唾液酸蛋白的mRNA和蛋白水平在14d均发生变化.结论 成功建立了MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导成骨细胞形成模型....
摘要:目的 构建BSP干扰表达载体,有效沉默小鼠成骨样细胞MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,研究其对MC3T3-E1 Subclone 14增殖分化过程中OCN等成骨相关基因表达的影响.方法 ①利用互联网资源针对BSP基因mRNA序列设计四条可能的小干扰RNA(siRNA),将这四条小干扰RNA插入到RNA干扰载体pGPU6/GFP/Neo中构建成四条干扰载体.②将构建好的BSP siRNA 表达载体pGPU6/GFP/Neo-siBSP-1、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-2、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-3、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-4通过阳离子脂质体将表达质粒分别转染MC3T3-E1 Subclone 14细胞,48h后荧光显微镜下观察不同浓度质粒的转染效率,以RT-PCR 检测BSP和OCN等成骨相关基因mRNA的表达.结果 ①成功构建四条正确的BSP siRNA 表达载体;②成功筛选出一条对BSP有明显抑制作用的siRNA干扰载体,阻断BSP表达后,成骨相关基因cbfa1和OCN的表达均受到明显抑制.结论 构建的BSP siRNA 表达载体可以有效抑制MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,同时抑制相关基因cbfa1和OCN的表达,从而影响该成骨细胞形态与功能,为骨转移等相关疾病的治疗提供了一定的实验基础....
摘要:目的 探讨小鼠多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律.为多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族各成员间结构相似但功能不同的特征提供一定的依据.方法 采用生物信息学软件和网上数据库对核酸、蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制.结果 小鼠多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性,系统进化树显示各成员来源于同一祖先并在不同时期分野.结论 各成员来自于同一祖先的同一家族,结构相似,但其进化方式属于趋异性进化....
摘要:目的:比较凯纷(氟比洛芬酯)与曲马多治疗原发性肝癌栓塞化疗后疼痛的临床疗效及不良反应.方法:对40例肝癌介入后疼痛患者,随机分为两组,分别于术后使用凯纷及曲马多进行治疗,凯纷剂量为50mg、曲马多剂量为50mg.治疗前后分别观察临床疗效、记录恶心、呕吐、便秘等不良反应,比较两组疗效与不良反应的发生率.结果:凯纷与曲马多的疼痛缓解率分别为85%与35%(X2=12.665,P<0.05)及其不良反应发生率低,主要有恶心、呕吐等,未发现有明显严重不良反应,其中曲马多的恶心、呕吐发生率高于凯纷(X2=17.857,P<0.05),其他不良反应的发生率两组无显著差异.结论:凯纷给药方式、疗效均优于曲马多,且副作用少,更适合用于肝癌栓塞化疗术后疼痛的治疗....
摘要:一、民事裁判遗漏救济程序的现状与反思 民事裁判遗漏是指法院对当事人所提之诉讼请求之一或一部分未作裁判的情形.目前,民事诉讼法关于裁判遗漏救济程序的规定仅有一条,即在第二百条将裁判遗漏增列为再审事由之一.就司法解释层面来看,1992年颁布的最高人民法院《关于适用民事诉讼法若干问题的意见》(以下简称《适用意见》)第182条对一审遗漏当事人诉讼请求的二审处理作出了规定,即首先调解,调解不成的发回重审.而对于诉讼费用的遗漏,《适用意见》第166条将其归为“判决书中的笔误”,由原审法院直接作出“更正裁定”,可以视为裁判遗漏救济程序中的一项特别条款....
[专利] 发明专利 CN201310058854.0
苏州大学 2013-06-19
摘要:本发明制备一种硅基氮化铌薄膜超导材料,包括Si基底、TiN过渡层,以及NbN层。由于直接在Si基片上生长NbN薄膜有较大的晶格失配度,会导致NbN薄膜中存在一定厚度非超导的界面畸变层,严重降低NbN的超导性能。而TiN和NbN同属面心立方结构,而且晶格失配度较小,因此使用TiN过渡层大幅减小了NbN薄膜中的界面畸变层厚度,同时NbN结晶性得到改善,从而提高了其超导性能;并且NbTiN本身是一种Tc较高的超导材料,TiN中的Ti和N两种元素即使进入到NbN薄膜不会降低,反而会提升其超导性能。同时,本发明还提出了该硅基氮化铌薄膜超导材料的制作方法。
[硕士论文] 郑磊
凝聚态物理 苏州大学 2013(学位年度)
摘要:目前,超导氮化铌(NbN)薄膜是制备高性能单光子超导器件(SSPD)和超导热电子测辐射热仪(HEB)的首选超导材料,受到广泛的研究和关注。NbN具有较高的超导临界转变温度(Tc>16K)和临界电流密度。通常,采用磁控溅射的技术在和NbN晶格常数相近的单晶基片(如MgO)上生长出高质量的NbN薄膜。但是,MgO基片在THz频段损耗较大,同时微纳加工较困难。硅基NbN薄膜器件相比MgO基器件其主要优势在于:
  ①工作在THz频段损耗极低;
  ②微纳加工工艺技术成熟;
  ③容易实现超导探测器件与半导体器件的集成;
  ④成本较低。
  但是,由于NbN与Si基片的晶格失配度较大(19﹪),导致硅基NbN薄膜很难实现外延生长,使其超导性能严重下降。本工作提出使用氮化钛(TiN)作为Si和NbN的过渡层的设想:一方面,两者均为面心立方结构,晶格常数相近,因此TiN过渡层有利于NbN的生长;另一方面,TiN中的Ti和N两个元素在制备过程中即使扩散到NbN薄膜,不仅不会损害反而有利于提高其超导性能。
  本实验采用直流反应磁控溅射法在Si(100)基片上来制备TiN和NbN薄膜,首先我们对制备TiN薄膜的工艺参数进行了优化,所制备的TiN薄膜的质量与薄膜制备时的沉积压强、氮气和氩气的流量比、沉积时的功率等工艺参数密切相关,其次我们使用优化后的TiN薄膜作为Si基片上生长NbN薄膜的过渡层。通过XRD、AFM、SEM、TEM、PPMS等测试手段对NbN/TiN/Si(100)双层薄膜的相结构、表面形貌、界面形貌和超导性能进行了表征。
  实验结果表明:TiN过渡层上生长的5-80nm厚的NbN薄膜的超导转变温度比直接在Si(100)基片上生长的薄膜提高了1-3k左右。我们对TiN薄膜作为生长NbN薄膜的过渡层可以提高NbN薄膜的超导性能这一现象作出了解释,使NbN薄膜超导性能提高的原因有三点;其一是TiN薄膜过渡层的存在为NbN薄膜的生长提供了晶格匹配的模板;其二是TiN薄膜过渡层的存在提高了NbN薄膜的结晶性能;其三是TiN薄膜过渡层的存在减小了NbN薄膜与基片的界面层的厚度。这些都是提高NbN薄膜超导性能的重要原因。
  本文的研究为进一步提高NbN薄膜转变温度和成膜质量提供了有用的实验依据。
[硕士论文] 郑磊
生物化学与分子生物学 苏州大学 2012(学位年度)
摘要:目的:
   探讨细胞表面α2,3唾液酸对成骨的影响和可能的作用机制。
   方法:
   1.建立MC3T3-E1 Subclone14成骨细胞培养模型,倒置显微镜观察细胞形态,RT-PCR和Western-Blot检测成骨细胞相关因子骨钙素、骨唾液酸蛋白等mRNA和蛋白水平的表达,碱性磷酸酶、Von Koss染色以鉴定骨基质和骨矿化的形成。
   2.在成骨细胞培养模型中加入不同浓度的α2,3神经氨酸苷酶,使用荧光标记的具有识别α2,3唾液酸结构特异性的凝集素MALⅡ检测细胞表面的α2,3唾液酸,并通过流式细胞仪验证效果;同时观察其对成骨功能及相关细胞因子mRNA和蛋白水平的影响和可能的作用机制。
   结果:
   1.成功建立了MC3T3-E1 Subclone14成骨细胞培养模型,证明MC3T3-E1Subclone14细胞培养至10d左右碱性磷酸酶染色呈强阳性反应,即成骨细胞大量形成,Von kossa染色至14d左右呈强阳性反应,说明成骨细胞分泌的骨基质进入矿化期。
   2.利用流式细胞仪验证荧光标记的凝集素MALⅡ能有效结合细胞表面的α2,3唾液酸;细胞表面α2,3唾液酸对成骨细胞无明显的影响,但对骨矿化有一定的影响。它可能通过影响维生素D受体VDR的表达,从而影响骨的矿化,但对成骨细胞分化无明显影响。
   综上所述,我们成功建立了MC3T3-E1 Subclone14成骨细胞培养模型;证实细胞表面α2,3唾液酸主要影响骨的矿化,但对成骨细胞无明显影响。它可能通过影响维生素D受体VDR的表达,从而影响骨的矿化。
[硕士论文] 郑磊
影像医学与核医学 苏州大学 2010(学位年度)
摘要:目的:通过枕大池二次注血法建立兔蛛网膜下腔出血(SubarachnoidHemorrhage,SAH)诱发迟发性脑血管痉挛(Delayed Cerebral Vasospasm,DCVS)动物模型,研究脑池内局部灌注rt-PA(重组组织型纤溶酶原激活剂,Recombinant Tissue-typePlasminogen Activator,rt-PA)对预防SAH后DCVS的作用,探讨SAH后rt-PA预防DCVS的最佳时间点,为临床应用提供依据。
   材料和方法:40只健康清洁级新西兰大白兔,实验动物随机分为正常对照组(4只)、SAH组(4只)、实验组(依治疗时间分为24h、48h、72h、96h四个组,每组8只)。于PET-CT及脑血管造影检查后,采用枕大池二次注血法制作SAH动物模型,正常对照组注入等量生理盐水作为SAH阴性对照。实验组于建模成功后12h,再次行PET-CT检查;后分别于建模成功后24h、48h、72h、96h,脑池内局部灌注含rt-PA1mg的生理盐水1ml:第二次建模成功后第8天,各组再次行PET-CT、血管造影检查;灌洗固定取脑观察大体变化,取基底动脉(BasilarArtery,BA)作光学显微镜检查。
   结果:各组动物间体重无显著性差异(P>0.05)。PET-CT检查:治疗各组显示各组在注血后12h SUV值(标准化吸收值,standardized uptake value,SUV)均有不同程度下降,治疗后可有不同程度恢复,各组间比较F=7.533(P=0.001),有显著性差异;24h治疗组、48h治疗组恢复较好,其与72h治疗组间存在显著差异(P=0.040)。脑血管造影检查:各组建模前及建模后8天BA直径有不同程度下降,各组间比较F=5.088(P=0.003),有显著性差异;24h、48h治疗组下降较少,其与72h治疗组间存在显著差异(P=0.045)。两组检查均显示48h治疗组与72h治疗组间存在显著差异(P<0.05)。组织学检查:24h、48h治疗组动物脑底有少量血凝块,BA有轻度内膜内褶;而72h、96h治疗组血管周围有血凝块,BA有内膜内褶、弹力层断裂、内膜平滑肌细胞增生等病理改变。
   结论:本研究结果提示:1.脑池一次给予rt-PA可溶化动物蛛网膜下腔血凝块,预防DCVS的发生;2.在48h内治疗,可更好的溶化蛛网膜下腔中血凝块,为进一步研究rt-PA预防DCVS提供了合理的时间窗。
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