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摘要:后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)是白内障术后最常见的并发症,该病亦是引起术后视力下降的主要原因.近年来随着PI3K-AKT信号通路的深入研究,发现该信号通路在PCO的发生发展中发挥重要作用.现就PI3K-AKT信号通路在PCO发病中作用与机制作一简要综述....
[硕士论文] 邵陈沙
眼科学 桂林医学院 2017(学位年度)
摘要:目的:
  后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)也称后囊膜混浊,是白内障术后及晶状体外伤后最常见的并发症。研究表明残留的晶状体上皮细胞增殖在PCO的发病机制中发挥着十分重要的作用,但其增殖的具体原理尚未完全阐明,本研究探讨体外应用血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)及PI3K(phosphatidylinositols-kinase)信号通路抑制剂LY294002分别或同时刺激人源晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)株SRA01/04,以探讨PI3K-AKT信号通路在PDGF促进人晶状体上皮细胞增殖中的作用。
  方法:
  人晶状体上皮细胞株SRA01/04常规传代培养,用不同浓度的PDGF(0ng/ml,0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml),不同浓度LY294002(0μM,5μM,10μM,20μM,40μM)以及不同浓度的PDGF(10ng/ml)+LY294002(0μM,5μM,10μM,20μM,40μM)分别作用于SRA01/04细胞24小时,MTT法检测各组细胞的增殖率或增殖抑制率;根据MTT结果,选定各药物组浓度,将实验分为四组,即空白对照组、PDGF组(PDGF浓度为10ng/ml)、LY294002组(LY294002浓度为40μM)、PDGF+LY294002组(10ng/ml的PDGF+40μM的LY294002),各组细胞培养24h,倒置显微镜下观察各组晶状体上皮细胞增殖、抑制的情况;蛋白印迹法检测各组细胞中总AKT及P-AKT的蛋白表达量差异。
  结果:
  1、人晶状体上皮细胞SRA01/04的增殖率与PDGF的浓度呈正相关(P<0.001);
  2、人晶状体上皮细胞SRA01/04的增殖的抑制率与LY294002的浓度呈正相关(P<0.001);
  3、PDGF促人晶状体上皮细胞SRA01/04的增殖作用与LY294002的浓度呈负相关(P<0.001);
  4、PDGF、LY294002分别或同时干预人晶状体上皮细胞SRA01/04时细胞总AKT表达无明显差异(P=0.066);
  5、PDGF单独干预人晶状体上皮细胞SRA01/04时细胞p-AKT表达量增加,差异有统计学意义(P<0.001);
  6、LY294002单独干预人晶状体上皮细胞SRA01/04时细胞p-AKT表达量减少,差异有统计学意义(P<0.001);
  7、PDGF和LY294002同时干预人晶状体上皮细胞SRA01/04时细胞p-AKT表达量较PDGF单独干预时减少而较LY294002单独干预时增加,差异有统计学意义( P<0.001)。
  结论:
  1、PDGF能促进人晶状体上皮细胞的增殖;
  2、LY294002能抑制人晶状体上皮细胞的增殖;
  3、PDGF促进人晶状体上皮细胞的增殖作用能被LY294002抑制;
  4、PDGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进人晶状体上皮细胞的增殖。
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