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摘要:建立了同时测定麦田环境中三种磺酰胺类除草剂残留的改进QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定方法.样品经乙腈振荡提取,小麦籽粒和小麦植株以石墨化碳黑(graphitized carbon black,GCB)对提取液进行净化处理、土壤样品采用乙二胺-N-丙基硅烷(primary secondary amine,PSA),UPLC-MS/MS外标法检测定量.结果表明,唑嘧磺草胺、双氟磺草胺和五氟磺草胺在0.01 ~1 mg/L范围内线性良好,相关系数(r)分别为0.9998、0.9997和0.9997,检出限均为0.01 mg/L.小麦籽粒、小麦植株和土壤中的三种磺酰胺类除草剂的平均加标回收率为85.9%~105.5%,相对标准偏差(RSDs)不大于9.8%.方法简便、快速,能够满足麦田环境中上述3种磺酰胺农药残留同时检测的需要....
[硕士论文] 邵百惠
植物保护;农药学 东北农业大学 2018(学位年度)
摘要:马铃薯传入中国已有几百年,现在已经成为中国重要的粮食作物,并且农业部要大力发展中国的马铃薯产业,因此中国的马铃薯产业即将进入一个新的发展阶段。杂草是中国马铃薯田一种重要危害,最早中国基本都是小面积种植马铃薯,因此杂草的防除主要依靠人工和机械除草,随着种植面积的不断增大,除草剂的使用已成为马铃薯田防除杂草的一种重要手段。马铃薯田存在多种杂革,阔叶杂草是其中比较主要的一种。马铃薯田防除阔叶杂革主要是通过乙革胺、乙氧氟草醚、二甲戊灵等药进行土壤封闭处理,处理时间是在播后苗前。然而马铃薯苗期,没有既药效好又安全的除草剂来防除阔叶杂草。灭草松是一种杂环类选择性除草剂,能够防除阔叶杂草和莎草科杂草,但同时也导致了灭草松在防除阔叶杂草的同时也会对一些阔叶类作物产生药害,这就限制了灭草松的使用范围。抗灭草松作物的成功培育可以有效的降低除草成本,提高除草效率并且能够进一步开拓灭草松的应用市场。近年来转基因作物发展非常迅速,但目前对于转基因作物安全性问题公众存在很大的异议。因此在转基因作物有争议的情况下,通过非转基因技术培育抗除草剂作物是一条更加安全有效的途径。本研究应用植物组织培养技术,筛选培育出对灭草松具有抗性的马铃薯突变体,同时利用室内生物测定、田间试验和分子生物技术研究了其对灭草松的抗性机制并对生理生化及分子机理进行了探讨。主要研究结果如下:
  (1)灭草松浓度为60mg/L时马铃薯块茎存活率和发芽数相对适中,且能够形成愈伤组织;而灭革松浓度为40mg/L时,马铃薯块茎存活率和发芽数相对过高,且愈伤组织基本不受灭草松的影响,不利于抗性的形成;灭草松浓度为80mg/L时马铃薯块茎存活率和发芽数过低,愈伤组织受到严重的影响。因此将60mg/L作为最佳筛选浓度。
  (2)用700mg/L的灭草松水剂对培育出马铃薯无菌苗进行茎叶处理后,4号-11、4号-21、4号-8、4号-19、大-50和4号-40这六个品种存活率较高,存活率分别达到了84%、90%、92%、88%、82%和96%,表现出了对灭草松一定的抗性。
  (3)利用盆栽试验,将具有抗性的马铃薯无菌苗移栽后,用1296g a.i./ha的灭草松水剂对其进行茎叶处理。6个不同具有抗性的无菌苗,仅4号-19和4号-40这两个品种对灭草松表现出了一定的抗性,存活率较高,存活率分别达到了75%和95%。
  (4)分别用1296g a.i./ha、648g a.i./ha、324g a.i./ha的灭草松对4号-CK、4号-19和4号-40三种马铃薯苗进行茎叶处理后,三种不同的马铃薯苗对灭草松的抗药性程度存在差别,灭草松浓度为324g a.i./ha时,三种抗性水平的马铃薯苗的叶片都未见损伤;灭草松浓度为648g a.i./ha时,敏感类型4号-CK的部分叶片焦枯,中抗类型4号-19和高抗类型4号-40的叶片未见损伤;当灭草松浓度为1296g a.i./ha时,敏感类型4号-CK的叶片发生了全叶焦枯,中抗类型4号-19的部分叶片焦枯,高抗类型4号-40的叶片未见损伤。
  (5)在施用低浓度灭草松时,三种抗性水平的马铃薯苗叶片光合指标(叶绿素含量、光合速率和气孔导度)无明显差异,随着灭草松浓度的增加,高抗型4号-40马铃薯叶片光合指标下降幅度明显低于中抗型4号-19和敏感型4号-CK;用1296g a.i./ha灭革松对三种抗性水平马铃薯苗做茎叶处理后,敏感型4号-CK的MDA含量明显高于中抗型4号-19和高抗型4号-40,且中抗型4号-19略高于高抗型4号-40。高抗型4号-40的ACC活性高于中抗型4号-19和敏感型4号-CK,且24h后,高抗型4号-40叶片中基本检测不到灭草松,而敏感型4号-CK和中抗型4号-19叶片中还有部分灭草松的残留。即表明高抗型4号-40代谢及清除活性氧、自由基、灭革松等物质的能力较强,使高抗型4号-40快速恢复正常的新陈代谢。这些差异是高抗型4号-40抗性水平较高的重要原因。
  (6)施药前抗性和非抗性突变体的显著性差异基因较少。在施药后非抗性突变体的基因表达出现了显著性变化,而抗性突变体则变化较小。在施药后抗性与非抗性突变体之间显著性差异基因也较多。从分子水平上进一步说明灭革松对经过诱导培养出的抗性突变体不会产生较为明显的影响,解释了施药后抗性品种和非抗性品种在表观上的差异。
[专利] 发明专利 CN201611191772.3
东北农业大学 2017-03-22
摘要:本发明公开了一种乙酰乳酸合成酶抑制剂抗性相关蛋白UVALS及其编码基因与应用。本发明提供的UVALS蛋白是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与生物对乙酰乳酸合成酶抑制剂的抗性相关的由序列1衍生的蛋白质。本发明还保护UVALS蛋白的应用:(c1)调控植物对乙酰乳酸合成酶抑制剂的抗性;(c2)促进植物对乙酰乳酸合成酶抑制剂的抗性增加;(c3)调控微生物对乙酰乳酸合成酶抑制剂的抗性;(c4)促进微生物对乙酰乳酸合成酶抑制剂的抗性增加。本发明对于培育对乙酰乳酸合成酶抑制剂具有高抗性的植物新品种具有很高的应用价值。
[专利] 发明专利 CN201610065444.2
东北农业大学 2016-05-04
摘要:本发明公开了一种与咪唑乙烟酸抗性相关蛋白BM-1及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白,命名为BM-1蛋白,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与咪唑乙烟酸抗性相关的由序列1衍生的蛋白质。编码所述BM-1蛋白的基因(BM-1基因)也属于本发明的保护范围。本发明可用于培育咪唑乙烟酸抗性增加的转基因作物品种或转基因微生物,具有很高的应用价值。
[专利] 发明专利 CN201610060452.8
东北农业大学 中国农业科学院作物科学研究所 2016-05-18
摘要:本发明公开了一种源自黄曲霉的抗草甘膦相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白,命名为EPSPS蛋白,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与草甘膦抗性相关的由序列1衍生的蛋白质。编码所述EPSPS蛋白的基因(EPSPS基因)也属于本发明的保护范围。本发明的基因可用于培育对草甘膦抗性增强的转基因作物或转基因微生物,具有很高的应用价值。
[专利] 发明专利 CN201610060445.8
东北农业大学 中国农业科学院作物科学研究所 2016-04-20
摘要:本发明公开了一种源自假丝酵母的抗草甘膦相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白,命名为EPSPS蛋白,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与草甘膦抗性相关的由序列1衍生的蛋白质。编码所述EPSPS蛋白的基因(EPSPS基因)也属于本发明的保护范围。本发明的基因可用于培育对草甘膦抗性增强的转基因作物品种或转基因微生物,具有很高的应用价值。
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