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摘要:分别在静荷载25 N、振幅30μm、冲击数36000次/mm2的条件下对TC4钛合金进行超声表面冲击强化(UN-SM)处理、采用传统喷丸技术(硬度45~50 HRC且直径1 mm的钢丸,阿尔门强度0.10~0.15 mmA,覆盖率100%)对TC4进行喷丸处理,然后对比研究两种工艺对TC4生物相容性的影响,包括体液腐蚀行为、表面钙磷的矿化沉积及纤维软骨细胞早期黏附行为,并对处理后TC4钛合金的表面形貌、极化曲线、腐蚀形貌、细胞黏附等进行分析.结果表明:超声冲击可让TC4维持较好的平整度,而喷丸使材料表面粗糙度明显增加;UNSM处理和喷丸处理均在TC4表面产生点腐蚀坑,UNSM处理后的表面点腐蚀坑最多,而喷丸处理后TC4的耐体液腐蚀性能最差;两种表面处理均可增强TC4表面钙磷元素的沉积,且两种表面处理均可增进纤维软骨细胞的早期黏附,UNSM作用更佳....
[硕士论文] 赵雅君
生物工程 内蒙古大学 2018(学位年度)
摘要:2006年日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)首次利用病毒载体将四个转录因子(Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc)的组合转入体细胞中,成功建立小鼠诱导多能性干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)。实验证明iPSCs已经可以分化为心肌细胞、视网膜细胞以及造血细胞等,对临床研究具有极大意义。本研究室以自主开发的新型干细胞诱导技术为基础[1],将小鼠iPSCs放入添加四种生物活性因子ABCL(Activin A,BMP4,CHIR99021和mLif)的基础培养液中,使其诱导为一种更具多能性的新型干细胞(iPSC-advanced pluripotent stem cells,iPSC-ASCs)。
  实验结果如下:
  1、通过脂质体将六种转录因子Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc,Rarg及Lrh1的组合转入小鼠胎儿成纤维细胞(MEF),使其成功转化为iPSCs。两种不同iPSCs系在ABCL中培养,诱导出iPSC-ASCs,其AP染色均为阳性,与iPSCs无显著差异。
  2、免疫荧光染色检测了胚层分化基因Cdx1、Sox17、以及细胞周期调控因子c-Myc在蛋白水平的表达。结果显示所用的两种iPSC-ASCs细胞系的Cdx1和c-Myc蛋白表达均比对照组iPSCs高。
  3、RT-qPCR结果显示,iPSCs和iPSC-ASCs的多能性基因Oct4,Sox2,Nanog表达与MEF相比均显著提高。而且在形态扁状的Flat-iPSCs(F-iPSCs)诱导出的F-iPSC-ASCs中,发现Oct4,Sox2,c-Myc,T,K18,Gata4基因与iPSCs相比表达均上升,而在形态圆状的Round-iPSCs(R-iPSC)及R-iPSC-ASCs中未得到同样的结果。
  4、通过嵌合体制备检测iPSC-ASCs的发育潜能。实验结果显示iPSC-ASCs细胞系可贡献到10.5天的胎儿和卵黄囊,又可贡献到胎盘,而且iPSC-ASCs细胞系可进入13.5天胚胎的生殖嵴。
  5、把iPSC-ASCs和iPSCs直接培养在基础培养基N2B27中,观察其分化状态。在培养到第六天,iPSC-ASCs和iPSCs基本全部分化,相对于iPSCs,iPSC-ASCs更容易向中胚层分化。
  综上所述,本实验利用化学成分明确的培养条件建立了的iPSC-ASCs与iPSCs相比,在基因表达水平和发育潜能等方面,iPSC-ASCs更具有多能性,是一种新型诱导多能性干细胞系。
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