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摘要:目的 观察青少年低中度近视患者配戴角膜塑形镜前后泪膜稳定性的变化.方法 选取2017年3月至2017年9月就诊于中国医科大学附属第四医院眼科视光门诊,初次验配梦戴维等离子夜戴型角膜塑形镜的青少年近视患者50例(96眼),应用荧光素钠染色法及非侵入式眼表综合分析仪(Keratograph 5M,德国Oculus公司),观察患者配戴前及配戴后1周、1个月、3个月、6个月的侵入性泪膜破裂时间(IBUT)、泪河高度(TMH)、非侵入性第一次泪膜破裂时间[NIBUT(f)]、非侵入性平均泪膜破裂时间[NIBUT(av)].结果 戴镜后1周,IBUT、NITBUT(f)、[NITBUT(av)]较戴镜前均缩短,差异有统计学意义(P<0.05);戴镜后1个月,IBUT、NITBUT(f)、NITBUT(av)较戴镜前仍有下降(P=0.045,P=0.010,P=0.002),但较戴镜后1周有所提升(P=0.043,P<0.001,P=0.002),之后各测量时段IBUT、NIBUT(f)及NIBUT(av)与戴镜前相比,无统计学差异(P>0.05).配戴角膜塑形镜前后,TMH无统计学差异(P>0.05).Spearman相关分析结果显示,IBUT与NIBUT(f),IBUT与NIBUT(av),NIBUT(f)与NIBUT(av)均呈正相关(r=0.128,P=0.005;r=0.155,P=0.001;r=0.690,P<0.001).结论 青少年近视患者初次配戴角膜塑形镜后,早期可出现泪膜稳定性降低,但3个月后逐渐恢复至戴镜前水平,并趋于稳定.戴镜前后TMH无明显改变....
摘要:目的 应用频域光学相干断层扫描的增强深部成像技术(EDI-SD OCT)对配戴角膜塑形镜的低度和中度近视青少年患者的黄斑部脉络膜进行扫描,观察配戴角膜塑形镜前后黄斑部脉络膜厚度的变化.方法 选择2016年11月至2017年8月就诊于中国医科大学附属第四医院眼科的近视青少年患者64例(123只眼),根据初诊时近视程度分为2组,A组为低度近视,共37例(70只眼),等效球镜度≤-3.00 D;B组为中度近视,共27例(53只眼),等效球镜度>-3.00D~-6.00D.于戴镜前及戴镜后1周、1个月、3个月、6个月、1年时,采用海德堡EDI-SD OCT分别对对黄斑中心凹下及距中心凹1、2、3 mm处的鼻侧、颞侧、上方、下方4个方向共13个位点的脉络膜厚度进行测量,对比观察配戴角膜塑形镜前后各位点脉络膜厚度的变化.结果 2组患者配戴角膜塑形镜后各个位点的脉络膜厚度均较戴镜前增加(P<0.05).2组戴镜前后中心凹下方脉络膜厚度的变化值存在统计学差异(P<0.05),A组变化更大,颞侧脉络膜厚度变化最大,鼻侧变化最小.黄斑中心凹下脉络膜厚度与等效球镜度的绝对值之间无明显相关性(P>0.05).结论 低度近视和中度近视青少年患者配戴角膜塑形镜后黄斑部脉络膜厚度均有增加,鼻侧增加最少,且黄斑部脉络膜厚度呈区域性差异分布....
摘要:目的 从文献计量学的角度系统分析近7年糖尿病视网膜病变(DR)基因相关文献的分布规律及研究热点,为开展DR相关基础研究提供参考依据.方法 以PubMed数据库为数据源,对2010年1月至2017年12月所收录的DR基因相关文献采用书目信息共现挖掘系统(BICOMS)进行统计分析,对高频主题词共现矩阵进行聚类分析、绘制战略坐标图.结果 共检出DR基因相关文献1 193篇.通过对44个高频主题词及副主题词进行聚类分析,结果 显示当前的热点主要集中在以下5个方面:(1)DR相关基因单核苷酸多态性的遗传学研究;(2)视网膜新生血管相关病理学、动物模型及遗传学研究;(3) DR相关腺病毒及信使RNA基因研究;氧化应激所致视网膜色素上皮细胞病变的研究;(4) DR药物治疗相关基因研究;(5)高糖血症所致视网膜血管内皮细胞凋亡的代谢性研究.战略坐标图显示:第一类、第五类研究密度及向心度均较高,其中DR相关基因单核苷酸多态性的遗传学研究处于核心地位,该类主题可以在一定程度上带动其余各主题的发展;第二类、第四类研究处于边缘,该方面研究较为薄弱,有可能成为未来发展的方向;第三类研究内在研究较差,需要加强自身研究,丰富主题内容.结论 多元统计直观展示了近年来DR基因相关的研究现状、热点和趋势,为科研提供了参考信息....
摘要:目的 探讨miR-204的表达水平对人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡活动的影响及其靶向调控SIRT1的机制.方法 实验研究.对2016年6~11月在人晶状体上皮细胞系SRA 01/04进行培养,利用过氧化氢(H2O2)构建SRA01/04细胞体外凋亡模型,实时荧光定量PCR法检测miR-204表达水平的变化;向SRA01/04转染miR-204模拟物(mimic)、miR-204抑制物(inhibitor)及其两者的阴性对照(negative control),分别上调和下调其miR-204的表达水平,转染48h后采用实时荧光定量PCR的方法验证转染效率;流式细胞仪检测miR-204对人晶状体上皮细胞凋亡过程的影响;通过文献及microRNA数据库,预测miR-204可能靶向调控SIRT1基因的表达;并采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞SIRT1表达水平.结果 与正常人晶状体上皮细胞相比,miR-204在凋亡模型中的相对表达量显著增加.在人晶状体上皮细胞系SRA01/04中,上调miR-204的表达水平可以促进过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡,并显著降低SIRT1基因表达水平;而下调miR-204的表达水平可以减少过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡,并显著升高SIRT1基因的表达水平.差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-204在人晶状体上皮细胞系SRA01/04凋亡模型中表达上调,miR-204可能通过调控SIRT1表达影响人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡,从而在以晶状体上皮细胞凋亡为基础的白内障发病机制中发挥作用....
摘要:通过全基因组的分析揭示了90%人类基因是被转录的。然而,大约只有1%RNA转录子可以编码蛋白质,其他的是非编码RNA。非编码RNA按照长度可以大致地被区分为小非编码RNA (<200 nt ),包括微小RNA、转运RNA、核仁小RNA等;长链RNA (>200 nt )包括核糖体RNA,自然反义转录子,和其他的长链非编码RNA等。尽管生物信息学及生物活性分析已经使很多小非编码RNA的功能得到开发,但是我们对于长链非编码RNA( LncRNA)却知之甚少。 LncRNAs在调节基因转录、转录后翻译,表观遗传学水平扮演多个角色。 LncRNAs异常表达可能发生在各种病理过程中,许多LncRNAs特异表达都与眼科疾病的发生和治疗效果不佳明显相关。在本文中,我们将对眼科常见疾病相关 LncRNAs 的功能特点和调控作用进行综述。...
[期刊论文] 周南 赵芳坤 周锦
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:目的 观察右美托咪啶(Dex)对老年颅内肿瘤手术患者麻醉诱导期血流动力学和脑电双频指数(BIS)的影响.方法 将30例ASAⅡ~Ⅲ级择期行颅内肿瘤手术切除的老年患者随机均分为右美托咪啶组(D组)和对照组(C组).D组于诱导前给予Dex(1μg/kg)静脉泵注,15 min完成,以0.5 μg/(kg·h)维持.C组诱导前等量生理盐水泵注.分别记录,泵注Dex或生理盐水前(T0)、麻醉诱导前(T1)、气管插管前(T2)、气管插管后即刻(T3)、1 min(T4)、3 min(T5)、5 min(T6)7个时点的平均动脉压(MAP)、心率(HR)和BIS值.结果 2组患者年龄、性别、身高、体质量和ASA分级无统计学差异(P>0.05).与T2比较,C组T3~T5时点MAP明显升高(P<0.05),T3、T4时点HR明显升高(P<0.05),而D组各时点MAP和HR无统计学差异(P>0.05);组间比较:在T3、T4时点,D组MAP和HR明显低于C组(P<0.05),其他时点无统计学差异(P>0.05).与T0比较,D组T1时点BIS明显下降(P<0.05);与T0和T1比较,2组T2~T6时点BIS均明显下降(P<0.05);与T2比较,C组T4、T5时点BIS明显升高(P<0.05),D组各时点无统计学差异(P>0.05);在T1、T4、T5时点,D组BIS值明显低于C组(P<0.05).结论 老年颅内肿瘤手术患者麻醉诱导前使用Dex可产生明显的镇静作用,能够抑制气管插管后3 min BIS的反应性升高,且血流动力学更加平稳....
摘要:目的 探讨心理干预对青光眼患者生活质量的影响,为青光眼的护理干预提供科学依据和对策.方法 采用随机分组平行对照的研究方法,将我院2009年3月至2010年9月连续收治的174例青光眼患者随机分成实验组(n=87)和对照组(n=87),全部患者均接受常规治疗和护理.实验组患者在此基础上由经过统一培训的责任护士在围手术期进行心理评估并给予心理干预.分别于患者入院前、出院后1个月及3个月时比较2组患者的生活质量.结果 2组比较,心理干预后实验组与对照组在生存质量总评分、精神与心理评分、症状与视功能评分、眼压、遵医率及并发痘的发生率方面差异有统计学意义(P<0.05),而身体机能、社会活动方面评分差异无统计学意义(P>0.05).结论 心理干预能够有效地帮助青光眼患者调整心理状态,缩短术后恢复时间,促进眼压及视功能恢复,使患者主动融入正常的社会生活中,从而提高患者的生活质量....
摘要:目的 紫外线(UV)照射导致的氧化损伤是晶状体上皮细胞凋亡的原因之一,而小窝蛋白(Caveolin)参与晶状体上皮细胞凋亡过程.本实验拟研究紫外线造成的氧化损伤中Caveolin-1表达变化与晶体上皮细胞凋亡之间的关系,同时探讨阿司匹林(ASA)作为抗氧化剂对Caveolin-1表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响.方法 UVB(4.43 mw/cm2)照射人晶状体上皮细胞系SRAOI/04(0 s,5 s,10 s,20 s),按照是否加入阿司匹林分为实验组和对照组.分别检测实验组和对照组细胞活性;利用AnnexinV-EGFP法检测细胞凋亡率:real time RT-PCB方法定量分析Caveolin-1 mRNA的量随照射剂量不同,及加入抗氧化剂前后所产生的变化.结果 随UV照射时间延长,单纯紫外线照射组细胞活性,Caveolin-1 mRNA表达量下降,细胞凋亡率增加.加入阿司匹林后,细胞活性增加.5 s,10 s组Caveolin-1 mRNA的表达量较对照组升高,细胞凋亡率较对照组下降(P<0.05).但是照射20 s的条件下,加药后的细胞凋亡率及Caveolin-1 mRNA的表达量较未加药组无变化(P>0.05).结论 UV照射可造成人晶状体上皮细胞凋亡.Caveolin-1 mRNA表达量减少,推测Caveolin-1表达量的变化可能与凋亡有关.低剂量的阿司匹林(3μmol/L)可以在一定程度上减少UV照射造成的晶状体上皮细胞凋亡,增加Caveolin-1的表达;但大剂量阿司匹林(>30 μmol/L)会起到相反的作用,因此找到一个合适安全的剂量范围具有一定临床意义....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:目的 探讨垂体瘤转化基因(PTTG)对人泌乳素型垂体瘤(HPA)细胞凋亡的影响.方法 设计并合成针对PTTG的特异性siRNA序列,通过siPORTTM NeoFXTM转入原代培养HPA细胞,Western blot法检测siRNA作用后PTTG蛋白表达,DNAladder和annexin V/PI染色法检测PTTG沉默对细胞凋亡的影响.结果 siRNA转染组细胞内PTTG蛋白表达减弱;在CDDP诱导后,对照组和siRNA组均出现细胞凋亡,siRNA组DNA ladder形成不明显,Annexin V染色凋亡细胞数目减少,对照组细胞凋亡率为18.6%,而siRNA组仅为8.7%.结论 垂体瘤转化基因对人泌乳素型垂体瘤细胞具有促进凋亡作用....
摘要:文章对嗜铬细胞瘤的病因、诊断、治疗等进行介绍....
摘要:文章对甲状腺功能减退症的诊治进行介绍....
[博士论文] 赵芳坤
眼科学 中国医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  本研究在已知lncRNA-SENCR对平滑肌细胞功能影响的基础上,探讨其在血管内皮细胞中的功能。研究结果对揭示CNV形成的分子基础,阐明其病理生理学机制具有十分重要意义。同时,本项研究有着重要的转化医学意义,lncRNA-SENCR有可能成为今后治疗视网膜新生血管的又一靶点,为眼底病的防治新策略提供个性化治疗的理论基础。
  方法:
  1、细胞培养
  2、细胞转染、。
  3、实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)
  4、Arraystar对长链非编码RNA进行测序
  5、荧光原位杂交(RNA-FISH)观察长链非编码RNA-SENCR在细胞中的位置
  6、细胞划痕实验
  7、细胞增殖实验
  8、血管管腔形成实验
  9、纤维细胞与血管内皮细胞共培养实验
  结果:
  1、长链非编码RNA在不同细胞中的测序结果:利用Arraystar Human LncRNA array(Version2.0)对五种细胞系提取的RNA分别进行测序。热图显示出与2种非内皮细胞相比其他3种内皮细胞中富含的排名前50的长链非编码RNA。圆图显示内皮细胞中比非内皮细胞高2倍的长链非编码RNA类型,按照lncRNA在基因组上相对于蛋白编码基因的位置,该测序包括62个正义,83个反义,23个双向,22个内含子,308个基因间隔区。
  2、长链非编码RNA-SENCR的结构及其在不同细胞中的表达:利用RT-qPCR方法检测长链非编码RNA-SENCR在不同细胞中的表达。与非内皮细胞组相比,内皮细胞组的SENCR含量显著高于非内皮细胞组(p<0.005)。SENCR由3个外显子组成,与编码基因FLI1为反义转录方向。
  3、荧光原位杂交观察长链非编码RNA-SENCR在细胞中的位置:利用荧光原位杂交RNA-FISH观察到了少量的SENCR表达在HUVEC细胞的细胞核及胞浆中。
  4、RT-qPCR检测DsRNA下调SENCR的效率:瞬时转染10nM的DsRNAi-control,DsRNA3,DsRNA5至HUVEC细胞中,利用RT-qPCR观察该DsRNA对长链非编码RNA-SENCR下调的效率。与转染DsRNAi-control的对照组相比,DsRNA3,DsRNA5均可以显著下调SENCR(***p<0.005)。
  5、长链非编码RNA-SENCR对新生血管的调控作用:
  (1)细胞划痕实验检测SENCR对内皮细胞迁移的影响:在生长因子VEGF的作用下,与对照组DsRNAi-control相比,转染DsRNA3,DsRNA5的两组细胞在细胞划痕12小时后迁移明显加快。
  (2)细胞增殖实验(Brdu)检测SENCR对内皮细胞增殖的影响:与对照组DsRNAi-control相比,下调长链非编码RNA-SENCR可以使细胞增殖显著增加。
  (3)管腔形成实验检测SENCR对内皮细胞增殖的影响:与对照组DsRNAi-control相比,下调长链非编码RNA-SENCR细胞形成管腔分支显著增加(**p<0.01)。
  (4)纤维细胞与内皮细胞共培养检测SENCR对内皮细胞的影响:与对照组DsRNAi-control相比,下调长链非编码RNA-SENCR细胞形成三维血管腔显著增加(***p<0.005)。
  6、下调长链非编码RNA-SENCR对靶基因的作用:转染dsRNA下调长链非编码RNA-SENCR,与新生血管相关的基因均显著上调(***p<0.005)即呈负相关。
  7、长链非编码RNA-SENCR与靶基因MDK的相互作用:
  (1)转染SiMDK对长链非编码RNA的作用:转染SiRNA干扰MDK的表达可以显著下调MDK的量,同时显著上调长链非编码RNA-SENCR的表达,即MDK与SENCR表达呈负相关。
  (2)纤维细胞与内皮细胞共培养检测SiMDK对内皮细胞的影响:通过转染SiRNA下调MDK,观察其对共培养的细胞的影响。Si-MDK可以显著减少血管生成(***p<0.005)。
  (3)RT-qPCR检测DsRNA及SiRNA的共转染效率:DsRNA可以显著下调SENCR的表达,上调MDK;SiRNA可以显著上调SENCR的表达,下调MDK;SiRNA可以恢复Ds-SENCR3对SENCR的下调,但是对于Ds-SENCR5处理的样品却没有此功能。
  (4)细胞划痕实验检测DsRNA/SiRNA共转染对内皮细胞迁移的影响:转染DsRNA3细胞迁移速率显著加快(***p<0.005);共转染DsRNA3/Si-MDK组细胞迁移率显著减慢(***p<0.005)。
  (5)DsRNA/SiRNA共转染对纤维细胞与内皮细胞共培养的影响:转染DsRNA3,血管生成显著增加(***p<0.005);共转染DsRNA3/Si-MDK血管生成显著减少(***p<0.005)。
  结论:
  1、SENCR由3个外显子组成,与编码基因FLI1为反义转录方向。长链非编码RNA-SENCR在内皮细胞中表达明显高于其他细胞。
  2、SENCR在细胞核和细胞质中均有表达。
  3、转染DsRNA可以显著下调SENCR的表达,加快细胞迁移速率,增加细胞增殖速率,加快新生血管的形成。
  4、下调SENCR可以导致靶基因MDK上调;转染SiMDK可以显著下调MDK,上调SENCR,使细胞迁移率减慢,新生血管减少。
  5、长链非编码RNA-SENCR在新生血管的发病过程中发挥重要作用,可能成为湿性老年性黄斑病变诊断和治疗中一种新的生物学标记或药物新靶点。
[硕士论文] 赵芳坤
眼科学 中国医科大学 2011(学位年度)
摘要:紫外线(UV)照射导致的氧化损伤是人晶状体上皮细胞凋亡的原因之一,而小窝蛋白(Caveolin)参与晶状体上皮细胞凋亡过程。本实验拟研究UVB照射人晶状体上皮细胞造成的氧化损伤中Caveolin-1mRNA表达变化与晶体上皮细胞凋亡之间的关系,同时探讨阿司匹林作为抗氧化剂对Caveolin-1mRNA表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响。
   研究方法:
   波长范围(250-365nm)的UVB(4.43mw/cm2)照射人晶状体上皮细胞系SRA01/04(0s,5s,10s,20s),按照是否加入阿司匹林(Aspirin)分为实验组和对照组。
   1、MTT法检测细胞活性;
   2、流式细胞仪检测活性氧自由基ROS量;
   3、RT-PCR检测诱导型一氧化氮合成酶iNOS的含量:
   4、AnnexinV-EGFP法,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率;
   5、real time RT-PCR方法定量分析Caveolin-1 mRNA的量随照射剂量不同,及加入抗氧化剂前后所产生的变化。
   结果:
   随紫外线照射时间延长,单纯紫外线照射组细胞活性下降,iNOS含量降低,ROS量及细胞凋亡率增加,Caveolin-1mRNA表达量下降。加入阿司匹林后,各组ROS产生量降低,细胞活性增加。5s和10s组细胞凋亡率较对照组下降,Caveolin-1 mRNA的表达量较对照组升高(P<0.05)。但是照射20s的条件下,加药后的细胞凋亡率及Caveolin-1 mRNA的表达量较未加药组无变化(P>0.05)。
   结论:
   紫外线照射可产生ROS造成人晶状体上皮细胞凋亡,Caveolin-1mRNA表达量减少,推测Caveolin-1表达量的变化可能与凋亡有关。低剂量的阿司匹林(3μM)作为抗氧化剂可以在一定程度上减少UV照射造成的晶状体上皮细胞凋亡,增加Caveolin-1的表达;但大剂量的阿司匹林(>30μM)会起到相反的作用,因此找到一个合适安全的剂量范围具有一定临床意义。
  
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