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摘要:旨在揭示内质网应激(ERS)标记基因Grp78是否参与鹅肥肝中炎症/免疫相关基因的表达调控.本试验选择健康的、体重相近的70日龄朗德鹅30只(未分公母),随机分为对照组(n=15)和填饲组(n=15).利用荧光定量PCR测定不同填饲阶段(填饲7、14、19d)不同组织中Grp78的相对表达量(n=4),以明晰Grp78与鹅肥肝形成的关联;在鹅原代肝细胞中过表达Grp78,并通过RNA-seq分析Grp78所影响的信号通路和基因(n=3);利用荧光定量PCR检测鹅肥肝中与炎症/免疫相关的基因表达量(n=4),以明晰这些基因与Grp78的关联.结果 表明,肝和腹脂中Grp78的表达量受填饲影响(肝中下降,而腹脂中上升).Grp78基因的过表达试验表明,ERS除了可影响已知的代谢病和细胞凋亡通路外,还影响信号转导、免疫等通路.在免疫/炎症方面,“Toll-like receptor signaling pathway”、“TNFa signaling pathway”、“NF-kappa B signaling pathway”等通路最为突出.此外,免疫/炎症相关基因Tnfsf10、Map3k7cl在鹅原代细胞中的表达受Grp78过表达影响,在鹅肥肝中受填饲影响.总之,本研究揭示了Grp78/ERS新的生物学功能,即对细胞的免疫/炎症状态进行调控,并借此参与鹅肥肝的形成....
摘要:长非编码RNA(lncRNA)是重要基因调节者,参与多种疾病的发生.本研究着重测定了填饲和脂肪肝相关因子对lncRNA基因(LOC 106047490)表达的影响.在填饲7、14、19 d时,该基因在填饲鹅肝脏和腹脂中的表达均受到不同程度的抑制,而在胸肌仅第19天时有较明显的抑制.高葡萄糖、胰岛素和不饱和脂肪酸可在鹅原代肝细胞中诱导该基因的表达,但饱和脂肪酸无诱导作用.此外,在常规饲料中添加20%的蔗糖虽可提高鹅肥肝产量,但并不诱导该基因的表达.最后,本研究还发现该基因在鹅胚胎的肠和肌胃中表达最高,在肝和腿肌中表达最低.综上所述,LOC 106047490在鹅肥肝形成过程中扮演重要角色,其表达受葡萄糖、胰岛素和不饱和脂肪酸影响,这为研究其功能提供了良好的体外模型....
摘要:试验旨在探讨鹅补体受体1(CR1)基因在鹅肥肝形成中的表达和调控机制.通过荧光定量PCR验证CR1在填饲19d鹅肝脏中的表达情况,通过体外细胞(鹅原代肝细胞)试验探索脂肪肝相关因子(葡萄糖、胰岛素、油酸和棕榈酸)对CR1的诱导作用,同时通过分析CR1基因的上游序列预测其转录调控因子并通过药物处理进行验证.结果发现,CR1基因在填饲19d肥肝中的表达量显著高于对照组;25 mmol/L葡萄糖以及各处理浓度的油酸(0.125、0.25和0.5 mmol/L)均可导致鹅原代肝细胞中CR1表达水平的显著上调,胰岛素对CR1的表达水平没有显著影响,而0.5 mmol/L棕榈酸则对CR1在鹅原代肝细胞中的表达有一定的抑制作用;序列分析发现,鹅CR1上游序列含有肝细胞核因子1(HNF1)的结合位点,且使用HNF1的活性调控剂(鹅去氧胆酸)处理鹅原代肝细胞后,鹅CR1基因的表达量显著上调.综上,本研究证实CR1基因在鹅肥肝形成过程中表达水平的显著上调,并对其可能的调控机制进行初步探索,为深入研究补体系统在鹅肥肝形成中的作用和机制奠定了基础....
摘要:为了明晰营养因素是否同时影响内源性反转录病毒(Endogenous retrovims,ERV)和免疫相关基因的表达,试验以采集的浙东白鹅肝脏样品为材料,采用荧光定量PCR方法测定了不同营养状态(禁食或脂肪酸处理)对鹅肝脏或肝细胞中两个ERV Pol序列(ERVK18P、ERVK25P)和免疫相关基因STAT3表达的影响.结果 表明:与未禁食的70日龄浙东白鹅相比,禁食24 h会抑制肝脏中ERVK18P、ERVK25P和STAT3基因的表达;用亚油酸处理鹅原代肝细胞14 h,也会显著抑制ERVK18P、ERVK25P和STAT3基因的表达.说明营养因素可以影响ERV和免疫相关基因STAT3的表达,ERV可能是营养因素调控鹅肝脏中STAT3基因表达的潜在介导物....
[专利] 发明专利 CN201810988376.6
扬州大学 2018-12-18
摘要:本发明属于家禽育种技术领域,具体涉及一种肝用鹅腹脂重与胴体重的辅助选择标记,具有SNP位点,SNP位点位于MC5R基因起始密码子下游第807bp位置。本发明还公开了利用分子标记辅助选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法:选定待测的朗德鹅个体,抽取血液并提取DNA,利用提供的试剂盒进行聚合酶链式反应(PCR)并检测产物,将PCR产物送测序公司测序并判定基因型,依据基因型挑选合格的个体留着种用。本发明不仅可避免屠宰测定法带来的高成本和大工作量大,以及优秀个体不能留作种用的缺点,而且可用于大规模选种,加快育种进程。
[硕士论文] 赵盼
养殖 扬州大学 2018(学位年度)
摘要:鹅脂肪肝(俗称肥肝)是一种营养丰富的高档食材。不同品种的鹅产肝性能存在明显差异,这表明鹅肥肝生产性能可通过遗传育种途径加以改良。目前中国用于肥肝生产的鹅品种是从国外引进的朗德鹅,由于引种费用昂贵,许多肥肝生产企业为了有利可图,常常购买引进后已多次传代、种质退化了的群体,严重影响了企业的生产效率和收益。解决这一问题的有效途径之一是对中国引进的朗德鹅群体进行选种,然而目前采用的表型选择,其选种效果并不明显。相对于表型选择,遗传标记辅助选择的优势明显。本研究旨在评估GRP78和MC5R两个基因与脂肪肝形成的关系及其多态性位点与肥肝鹅相关生产性状的关联,从而为肥肝鹅的标记辅助选择奠定基础。本研究的主要结果如下:
  1、利用荧光定量PCR检测GRP78基因在填饲第7天、14天和19天对照组(常规饲养组)和填饲朗德鹅不同组织(肝脏、腹脂和胸肌)中的表达情况。结果显示:在填饲第7天、14天和19天,填饲组朗德鹅肝脏中GRP78基因的mRNA表达量均低于对照组朗德鹅,但未达到统计显著性(P>0.05);相反,填饲组朗德鹅腹脂中GRP78基因的mRNA表达量均高于对照组朗德鹅,且在填饲第14天达到统计显著性(P<0.05)。然而,胸肉中GRP78基因的mRNA表达量在两组间没有明显差异。再者,在饲料中添加蔗糖导致肥肝中的GRP78表达量进一步被抑制,同时伴有肥肝重和腹脂重的增加,该结果表明GRP7参与鹅肥肝的形成,其表达抑制或有助于肥肝的形成。因此,GRP78是鹅肥肝辅助选择标记的良好候选基因。为探讨GRP78基因用作辅助选择标记的可行性,本研究通过PCR扩增出GRP78基因及其上游序列(<2.5kb)并测序以筛查该基因存在的SNP位点。结果发现仅在上游序列较远的位置(-1904bp~-2484bp)上存在6个SNP位点,且这些位点与测定的生产性能指标不存在显著关联,而在其他序列中并未找到SNP位点。GRP78基因编码区没有找到多态性位点反映出GRP78基因因具有重要的生物学功能而承受了较大的选择压力。
  2、利用荧光定量PCR检测MC5R基因在填饲第7天、14天和19天对照组和填饲组朗德鹅不同组织(肝脏、腹脂和胸肌)中的表达情况。结果显示:在填饲第7天、14天和19天MC5R基因在填饲组朗德鹅肝脏中的表达均显著低于对照组,且随着肝中脂肪沉积量的增加,MC5R的表达抑制变得更加明显。类似地,填饲组腹脂中MC5R基因的表达量均显著低于对照组。对于胸肌而言,在填饲第7天,填饲组与对照组间没有明显差别;在填饲第14天,填饲组低于对照组,但不显著;而在填饲第19天,填饲组显著低于对照组,且表达的抑制程度加剧。此外,与常规填饲组相比,加糖日粮的填饲进一步抑制肥肝中的MC5R表达,且这种抑制与肝重增重相关。这些结果提示,MC5R基因的表达抑制可能促进组织中的脂肪沉积,因此MC5R基因是鹅肥肝辅助选择标记的良好候选基因。
  3、为了更好地理解MC5R与鹅肥肝形成的关系,本项目检测了脂肪肝形成相关因子(高剂量葡萄糖、胰岛素和脂肪酸)对鹅原代肝细胞中MC5R基因表达的影响。结果显示:在高剂量葡萄糖、胰岛素、棕榈酸、油酸和亚油酸分别处理鹅原代肝细胞14小时后,葡萄糖和胰岛素都不同程度地诱导了MC5R的表达,而脂肪酸对MC5R表达没有显著的调节作用。这些结果与鹅肥肝组织的表达情形不一致,推测在鹅肥肝形成过程中,还存在其他因子或机制影响鹅肥肝中MC5R基因的表达。
  4、为探讨MC5R用作肥肝鹅辅助选择标记的可能性,本研究通过对PCR产物进行测序分析,查找MC5R编码区内的SNP位点,并对SNP位点与生产性能相关指标(肝重、腹脂重和胴体重)进行关联分析。数据显示:在MC5R基因编码区找到一个C/T多态性位点(起始密码子下游编码区序列的807bp处),该SNP位点并未引起MC5R氨基酸序列的改变。该SNP位点与肥肝鹅的腹脂重存在关联。CT基因型的平均腹脂重显著大于CC基因型的平均腹脂重(P<0.05),两者相差52.67g;而TT基因型与CC、CT基因型在平均腹脂重的差异未达到显著水平。SNP位点与肥肝鹅的胴体重也存在关联,CC基因型的平均胴体重显著大于TT基因型的平均胴体重(P<0.05),两者相差630g;而CT基因型与CC、TT基因型在平均胴体重上的差异未达到显著水平。然而,SNP位点与肥肝鹅的平均肝重不存在明显关联。这些结果从关联分析的角度表明,MC5R或可用于肥肝鹅的辅助选择,在保持肝重不受显著影响的情况下,对填肥后的腹脂重和胴体重进行选择。
  综上所述,通过明晰朗德鹅不同组织中GRP78和MC5R基因表达水平随填饲时间的变化规律、饲料加糖试验和脂肪肝形成相关因子对基因表达的影响,以及基因的SNP位点与肥肝鹅生产性能相关指标间的关联情况,本研究揭示了GRP78与MC5R基因在肝脏中的表达抑制有助于鹅肥肝的形成,因此两者均为肥肝鹅辅助标记的良好候选基因;在MC5R编码区筛选到的SNP或可作为辅助选择标记用于肥肝鹅腹脂重和胴体重的选择。
摘要:我国农村居民的衣着消费比重在2000年之前略有下降,之后一直比较稳定,保持在6%左右的水平,我国农村居民衣着边际消费倾向较低,居民收入增量中用于衣着消费的增量下降;农村居民衣着缺乏弹性,且不同收入水平在衣着消费上差距进一步拉大。将江苏省农村居民接收入划分为五组,分别是低收入组、中低收入组、中等收入组、中高收入组、高收入组,使用2003-2010年江苏省农村居民在衣着消费方面的支出数据,运用EVIEWS方法,研究不同收入组对江苏省农村居民衣着消费的影响。...
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