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[硕士论文] 谭红梅
生物物理学 浙江大学 2014(学位年度)
摘要:耐辐射球菌是一种极端细菌,它能够耐受致死剂量的电离辐射。耐辐射球菌具有高效的DNA修复能力、快速DNA损伤响应能力以及多种抗氧化机制,这些特性对耐辐射球菌的极端抗性做出了巨大的贡献,但是其具体的抗逆性机制目前仍尚不清楚。
  蛋白质乙酰化修饰是一种重要的蛋白翻译后修饰类型。随着蛋白质组学技术的发展,我们发现蛋白乙酰化现象广泛存在于生物体中。先进的蛋白质组学研究极大地扩展了我们在蛋白赖氨酸乙酰化修饰方面的知识。已知,赖氨酸蛋白质乙酰化在细胞生命活动中起着重要作用,比如细胞调控和代谢等。但迄今为止,很少有研究关注于各种胁迫下(如电离辐射),蛋白质组乙酰化修饰的变化。
  本文围绕耐辐射球菌辐照后蛋白质组乙酰化修饰的变化进行研究。我们通过Western blotting技术发现耐辐射奇球菌的蛋白质组乙酰化修饰在辐照后修复(PIR)期间发生了显著变化。为了进一步研究辐照后乙酰化修饰发生的改变,我们利用赖氨酸抗体富集辐照和未辐照耐辐射球菌中的乙酰化多肽,LC/MS/MS分析鉴定乙酰化蛋白和修饰位点。结果,我们在未辐照DR菌中鉴定出了21个乙酰化蛋白和31个修饰位点,辐照的DR菌中鉴定出了14个乙酰化蛋白和19个修饰位点。这些乙酰化蛋白似乎在不同的途径中起作用,包括转录,翻译,应激反应和代谢。且有趣的是,鉴定出来的未辐照和辐照DR菌的乙酰化蛋白大部分都是不相同的。本文的研究数据表明了,耐辐射球菌辐照后会发生乙酰化和去乙酰化事件,且乙酰化和去乙酰化可能在辐照后修复过程中起作用。
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