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[期刊论文] 范媛媛 李懿 李启迪
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CSTPCD 北大核心
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摘要:对不同林龄油松林根际和非根际土壤养分、酶活性和微生物数量进行了研究.结果 表明:(1)油松林的土壤pH处于偏弱酸性,根际和非根际土壤pH随着油松林龄的增长表现出先降低后增加趋势,在成熟林阶段达到最低,不同生长阶段油松根际土壤pH显著低于非根际土壤pH(p<0.05).(2)土壤中根际和非根际有机碳、全氮、有效磷和有效钾含量呈一致的变化趋势,随着油松林龄的增长表现出先增加后降低趋势,在成熟林阶段达到最大值,其中幼林、中林和成熟林根际有机碳、全氮、有效磷和有效钾含量显著高于非根际(p<0.05),过熟林根际有机碳、全氮、有效钾和有效磷含量与非根际差异并不显著(p>0.05).(3)土壤中根际和非根际土壤酶活性(蔗糖酶活性、碱性磷酸酶活性、脲酶活性、过氧化氢酶活性)和微生物群落多样性(物种丰富度指数、均匀度指数、优势度指数、碳源利用指数)呈一致的变化趋势,随着油松林龄的增长表现出先增加后降低趋势,在成熟林阶段达到最大值,其中幼林、中林和成熟林根际土壤酶活性和微生物群落多样性显著高于非根际(p<0.05),过熟林根际土壤酶活性和微生物群落多样性与非根际差异并不显著(p>0.05).(4)油松根际土壤微生物总数高于非根际,其中细菌数目所占比例最高,放线菌数目所占比例最低.(5)相关性分析表明,土壤pH与土壤微生物群落功能多样性各指标呈负相关,土壤有机碳和全氮、蔗糖酶活性、碱性磷酸酶活性、细菌数目、微生物总数与土壤微生物群落功能多样性各指标呈显著的相关性.由此可知,土壤pH对土壤微生物群落功能多样性贡献为负,土壤养分、土壤酶活性和微生物数量对土壤微生物群落功能多样性起到正调节作用,其中土壤有机碳和全氮、蔗糖酶活性、碱性磷酸酶活性、细菌数目和微生物总数是土壤微生物群落多样性的主要影响因子....
[专利] 发明专利 CN201910198957.4
山东师范大学 2019-07-09
摘要:本发明提供一种基于液滴微流控技术的单细胞内miRNA高灵敏多组分同时检测方法和系统,属于生物检测和分子生物学技术领域。与现有技术相比,本发明具有高效的细胞处理能力,能够捕获100个细胞/秒,检测13000个细胞/小时。液滴内的二次等温放大提高了扩增反应速率和检测灵敏度,使得能够分析单个细胞内多种表达下调的miRNA。液滴内的隔离空间能有效地防止miRNA的降解,保证检测的精确度,具有良好的实际应用之价值。
[硕士论文] 范媛媛
分析化学 山东师范大学 2017(学位年度)
摘要:在生物体内,各种各样的生物分子发挥着至关重要的作用。如基因能够调控信号传递及代谢通路,蛋白质组学则在一定程度上反应基因表达水平,金属离子在神经系统中能够促进神经递质的释放和分泌、调节神经突触的形成及生长等。各种生物分子之间彼此关联、协同作用、相互影响,一种生物分子的异常表达往往会引起一系列的变化,因此各种生物分子与细胞功能的正常运作、各种疾病的发生与发展以及相关治疗密不可分。
  目前已发展了多种针对细胞内生物分子的研究方法,包括电化学检测、质谱以及光学检测等,其中荧光法由于检测灵敏度高等优点已得到广泛应用。但是目前的方法对于单细胞水平甚至是单分子水平的生物分子的检测仍然存在许多困难,如生物分子的尺度一般为纳米级,检测方法需具有较高的空间分辨;某些分子含量较少,低灵敏度的方法难以实现其精确的检测;另外由于细胞成分较为复杂,如何消除其他分子的信号干扰也是一大挑战。因此,急需发展高灵敏的单细胞内生物分子检测方法。
  针对这些困难与挑战,本论文致力于发展高灵敏度的检测方法用于细胞内生物分子的检测。首先我们在单细胞的水平上,发展了一种单细胞内多组分的同时定量检测的方法,并且进一步提高了检测灵敏度,构建了一种单分子水平上的细胞膜蛋白的检测方法。论文主要包括以下四个部分:
  第一章为绪论,首先概述了目前细胞内各种生物分子检测的研究进展,其中包括生物分子的重要生理功能及荧光检测方法的简介;随后介绍了单细胞水平上的生物分子的检测重要性及单细胞内多种金属离子同时定量检测的重要性,并总结了用于单细胞检测的微流控方法的优势;最后介绍了单分子检测的研究进展以及单分子水平上细胞膜蛋白检测的意义及方法。
  第二章介绍了基于目前单细胞水平上多种金属离子检测的困难,为了解决这些困难我们发展了一种基于微流控系统同时定量检测单个神经细胞内 Na+, K+, Ca2+, Mg2+四种金属离子的新方法,并将该方法应用于研究Aβ25-35诱导的PC-12细胞内四种离子的变化情况。该方法为单细胞内多种金属离子的研究提供了一种新的思路,同时研究结果也为多种金属离子如何在神经疾病的调节中发挥协同作用提供了新的启示。
  第三章在单细胞检测的基础上,进一步提高检测灵敏度,发展了一种单分子水平上的细胞膜蛋白的检测方法。选取了细胞膜蛋白PTK7作为研究对象,利用核酸适配体高效靶向目标膜蛋白,并通过引入滚环扩增反应来实现信号的放大,从而发展一种灵敏度好、毒性小、可进行细胞原位单分子成像检测的方法。该方法的检测灵敏度也能够满足低丰度的细胞膜蛋白的单分子检测。最后对本论文所建立的单细胞及单分子检测方法进行了总结。本论文在提高检测灵敏度的角度上,针对单个细胞内的多种金属离子实现了同时定量检测,并进一步提高检测灵敏度,研究了单分子水平上的细胞膜蛋白。这两种方法逐渐递进,本质都是针对细胞内生物分子的研究。而基于本论文建立的方法,细胞内其他生物分子的单细胞及单分子水平的检测还需更进一步的探索。
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