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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:以介孔分子筛MCM-41为载体,戊二醛为交联剂,采用吸附-交联法进行了柚苷酶的固定化。研究了酶液浓度、戊二醛浓度、吸附交联时间和固定化pH对固定化效果的影响,对影响固定化效果的因素进行了分析。确定最佳的固定化条件为:酶液浓度为0.4mg/mL,戊二醛浓度2.0%,吸附交联时间为6h,固定化pH为4.0(醋酸缓冲液)。采用海藻酸钠和聚乙烯醇对制备的固定化酶进行二次包埋处理,并应用于葡萄柚汁的脱苦。结果显示,游离酶和MCM-41固定化酶对果汁的脱苦率分别为96.65%和92.90%,海藻酸钠和聚乙烯醇二次固定化的柚苷酶脱苦率分别为72.64%和70.90%。脱苦后的果汁营养成分与理化指标均有一定程度降低。为柚苷酶的固定化提供了一种新型的载体材料,为固定化柚苷酶在果汁脱苦中的工业化应用提供了理论基础。...
[硕士论文] 肖敏
农业推广 华中农业大学 2017(学位年度)
摘要:蝴蝶兰(Phalaenopsis),属多年生草本植物,其独特的花形和艳丽的色彩引起了全世界花卉爱好者们的关注,素有“洋兰王后”的美称。广东省农业科学院环境园艺研究所于2007年3月以来对优良亲本‘聚宝红玫瑰’(简称JB,下同)和‘红龙’(HL)进行杂交,从杂交后代中选育了多个优良品系,其中7个品种‘富韵’(A8)、‘初阳’(A46)、‘滴彩’(DC)、‘福美’(FM)、‘翔凤’(XF)、‘宫粉’(GF)、‘莞蝶2号’(GD)通过了广东省农作物品种审定,另外3个优良株系‘深红B-305’(B3)、‘深红中小A’(A0)、‘PhcA-295’(PH)也形态各异,各具特色。本研究采用形态特征分析和SRAP分子标记,调查分析了这10个子代与其亲本的形态特征,并对其之间的遗传多样性差异进行了研究,为蝴蝶兰遗传育种与品种区分提供理论依据。主要研究结果如下:
  1、对蝴蝶兰植物学形态特征的主成分分析及农艺性状评价结果表明,可将12份供试品种或株系分为3类,第1类是与杂交后代在形态特征上差异较大的亲本HL;第2类是在主要性状上遗传了父母本优势性状并较优于父母本的杂交后代XF;第3类是亲本JB以及介于父母本性状之间且总体与JB更为相似的杂交后代B3、A8、A46、A0、DC、PH、FM、GD、GF,这与根据欧式距离进行的系统聚类结果基本吻合。杂交后代的表现型有优于、相似于或不同于父母本的表现,选择品种间不同的优良性状进行杂交是杂交选配亲本的重要依据,有利于蝴蝶兰多样性的创造和利用。
  2、改良DNA提取方法及模板材料选择。对原来的DNA提取方法进行改良实验比较,并使用改良后的DNA提取方法分别提取蝴蝶兰A8和A46的嫩根、嫩叶和花的DNA,检测结果显示:嫩根比叶和花的条带更明亮清晰,可能是由于叶和花的色素含量高,纤维较多,不易研磨充分。色素含量高和研磨不充分都会影响到提取的DNA质量,因此将嫩根作为提取DNA的最佳材料。
  3、蝴蝶兰SRAP-PCR反应体系的优化。针对PCR反应体系中关键的6个因素,设计多因素正交实验,挑选最优的PCR buffer、Mg2+、模板DNA、Tap聚合酶、dNTP和引物的浓度组合。最后得到蝴蝶兰SRAP-PCR反应最佳体系是:即25μL反应体系为:10×buffer2.5μL,MgCl22μL(2mmol/L),dNTP2μL(0.2mmol/L),正反向引物各5.625μL(0.45μmol/L),DNA模板45ng(20ng/μL),Taq酶0.2μL(5U/μL),ddH2O4.8μL。
  4、对12份蝴蝶兰进行SRAP分析,从1,254个引物组合中筛选出带型稳定、多态性较好的24对引物,共扩增出172条谱带,单个引物扩增最多10条,最少4条,每个引物平均扩增7.17条,其中多态性条带100条,多态性比率58.14%。基于24个引物对12份蝴蝶兰的SRAP标记扩增结果,利用NTSYS.2.10e软件计算出所有供试材料间的遗传相似系数GS,并进行UPGMA聚类。在遗传距离0.778处,可将12份蝴蝶兰分成4类,第1类是亲本HL;第2类是杂交后代A0;第3类是杂交后代XF和A46;第4类包含两个亚组,一组是杂交后代A8和DC,另一组是亲本JB与杂交后代GF、FM、B3、GD、PH。这与形态特征聚类分析的结果吻合度较高,表明分子水平上的遗传多样性与形态特征差异之间存在相关性,但可能由于环境因素的影响,分子水平上的遗传多样性与形态特征差异不完全一致。
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