绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 1
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 4 条结果
摘要:成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGFs)是细胞间的多功能信号分子,调节生物体的多种生理功能.FGF21作为一种重要的调控因子,对毛囊发育及生长周期具有重要作用.为研究FGF21基因对毛囊发育及生长周期的影响及作用机制,本研究通过构建靶向敲除FGF21基因的载体,体外将Cas9 mRNA和gRNA显微注射到FVB小鼠受精卵中,在小鼠FGF21基因的第1外显子上造成移码突变,从而获得FGF21基因敲除(knock out,KO)小鼠.通过测序鉴定F0代小鼠基因型,共获得3只FGF21等位基因敲除小鼠(Fgf21-/-);qRT-PCR和Western blotting结果表明,在Fgf21-/-小鼠中未检测到FGF21 mRNA表达和FGF21蛋白表达;经脱毛再生及皮肤组织H&E染色发现,与野生型(wild type,WT)小鼠相比,Fgf21-/-小鼠体重降低、器官组织未出现异常变化、毛发生长速度减慢、毛囊的直径和毛发的密度均减小.本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Fgf21-/-小鼠模型,为后续研究FGF21基因在毛囊发育及生长周期中的功能提供了更好的动物模型....
[专利] 发明专利 CN201711145330.X
内蒙古大学 2019-05-28
摘要:本发明是根据小鼠FGF5基因序列,构建基于CRISPR‑Cas9系统的sgRNA表达载体,将sgRNA和Cas9 质粒混合物对受精卵原核注射,胚胎移植,品系基因鉴定,得到基因突变鼠,并pcr测序,确认最终得到遗传性小鼠突变模型。本发明构建的CRISPR‑Cas9介导的打靶载体为小鼠FGF5基因的敲除提供了一种简便快速安全的途径,该方法实现了不添加任何筛选标记即可筛选定点整合外源基因细胞系,大大提高了转基因动物的安全性,对小鼠的遗传育种具有重要价值。
[硕士论文] 白宇
动物学 内蒙古大学 2018(学位年度)
摘要:毛发对于生物体主要起到保护的作用,可用于抵御皮肤损伤、感染和脱水,也可以调节皮肤温度。毛囊作为皮肤的一种衍生物,毛发由其发育而来。β族胸腺素属于极性蛋白质分子家族。迄今为止已经发现的β族胸腺素共有15种,本文研究的Tβ4即为其中一种。有研究表明Tβ4对毛囊的生长和发育有促进作用。Notch信号通路对于毛囊生长的调控作用始于胚胎中毛囊的形成后期,待个体出生后,对于维持毛囊生长的动态平衡也有一定的作用。有实验证实Notch信号通路中关键因子缺失的小鼠毛发较细、短而且卷曲。JNK信号通路对于毛囊的调控作用表现在参与调控毛囊的生长方向,同时也参与对毛囊周期的调控。由此可知JNK信号通路和Notch信号通路对于毛囊的生长都具有重要的作用,本研究主要探索Tβ4对于毛囊的调控作用是否与上述两条信号通路相关。
  一、Tβ4在毛囊周期中的表达
  本实验通过对小鼠出生后2d、6d、15d和30d的皮肤进行实时定量PCR检测,检测Tβ4的mRNA表达情况,出生15d和30d小鼠的表达量较高,分别为对照组的26.9倍和48.3倍,说明在第一个毛囊周期中,Tβ4在退行期和静止期的表达量较高。
  二、探究Tβ4与Notch和JNK信号通路的关系
  通过以野生型小鼠和Tβ4基因敲除小鼠的皮肤组织作为样本,对于JNK信号通路和Notch信号通路相关的四个基因Grb2、MKK7、Hes5、Notch1进行实时定量PCR检测。在Tβ4敲除小鼠中与JNK信号通路相关的两个基因Grb2和MKK7的mRNA表达量分别是对照组的0.17倍和0.84倍,Notch信号通路的两个基因Hes5和Notch1的mRNA表达量分别是对照组的0.97倍、0.72倍;然后对其进行Western blot检测,四个基因分别是对照组的0.47倍、0.10倍、0.53倍、0.9倍。说明JNK信号通路受到Tβ4基因的调控,而在Notch信号通路中,它的上游基因Notch1不受Tβ4的调控,而下游的Hes5受到Tβ4的调控。
  三、探究Notch信号通路和JNK信号通路的关系
  本实验是为了进一步探究Tβ4和两条信号通路的上下游关系,从而进一步确定Tβ4在信号通路网络中的作用位点,分别对Notch信号通路和JNK信号通路使用相应的信号通路抑制剂(DAPT和sp600125)处理野生型的小鼠胎儿成纤维细胞。使用浓度为1μM/L的抑制剂处理细胞48h后收样,qRT-PCR法检测两条信号通路的四个基因Grb2、MKK7、Hes5、Notch1。在经DAPT处理的成纤维细胞中MKK7、Grb2、Hes5、Notch1的表达量分别是对照组的0.13倍、0.23倍、0.08倍、0.59倍,在蛋白质水平,这四个基因的相对表达量分别为对照组的0.2倍、0.14倍、0.36倍、0.08倍。在JNK信号通路抑制剂处理的成纤维细胞中MKK7、Grb2、Hes5、Notch1的相对表达量分别0.20倍、0.49倍、0.09倍、1.02倍,在蛋白质水平,这四个基因的表达量分别为对照组的0.2倍、0.14倍、0.36倍、1.04倍。结果说明JNK信号通路的两个基因位于Notch信号通路两个基因Notch1和Hes5之间,由此可以推知Tβ4的作用位点位于Notch1和MKK7之间。
  以上实验结果证实:Tβ4在第一个毛囊发育周期的退行期和静止期的表达量最高,说明其在退行期和静止期对毛囊的调控作用最为显著。敲除Tβ4基因对于JNK信号通路的表达量有着直接的抑制作用;在Notch信号通路中,其上游基因Notch1调控Tβ4的表达,而Tβ4基因的敲除使得其下游基因Hes5的表达量下调。综上所述,Tβ4和两条信号通路的四个关键基因的上下游关系为:Notch1→Tβ4→MKK7→Grb2→Hes5。通过本研究确定了两条与Tβ4对于毛囊产生影响相关的信号通路,同时也初步确定了Tβ4在两条信号通路中的作用位点,这为进一步探索Tβ4促进毛囊生长的调控提供了实验依据。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部