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摘要:为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTr法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期.结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间双重依赖,浓度越高,时间越长,抑制越明显,在电镜下观察细胞出现明显的凋亡形态,同时5 μmol/L顺铂作用24h后细胞阻滞于G1/S期,比例高达75.12%.结果表明,顺铂能抑制CHMp增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞G1/S期....
摘要:为研究二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞增殖和细胞周期的影响,以犬乳腺肿瘤CHMm和CHMp为模型,采用终浓度为o、5、10、20、40mmol/L二甲双胍对其进行干预,应用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布比例,再通过Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclinD1和p27的表达情况.二甲双胍作用48 h后,与对照组比较,CHMm细胞试验各组的成活率显著降低(P<0.05),而CHMp细胞除了5mmol/L组(P>0.05),其他试验各组的成活率也显著低于对照组(P<0.05),并且均呈现一定的浓度依赖性.流式细胞仪分析细胞分布比例发现,CHMm的G0/G1期细胞比例从(38.7±5.89)%增加到(70.36±5.78)%,CHMp的G0/G1期细胞比例也从(37.03±4.23)%增加到(54.92±4.67)%.随着二甲双胍作用浓度的增加,CHMm和CHMp细胞内cyclinD1表达量呈现减少的趋势,而p27表达量呈现上升的趋势.研究结果表明,二甲双胍可以抑制犬乳腺肿瘤细胞体外增殖能力,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,并下调cyclin D1和上调p27细胞周期相关蛋白表达量,从而为犬乳腺肿瘤治疗提供一定的理论基础....
摘要:为探究接触蛋白-1 (CNTN1)对体外培养的犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖及迁移能力的影响,本研究利用RNAi技术沉默CNNT1基因在犬乳腺肿瘤CHMm细胞中的表达,采用CCK8法检测CHMm细胞增殖能力、细胞划痕法检测CHMm细胞迁移能力,western blot检测CHMm细胞中E-cadherin蛋白含量.结果显示CNTN1沉默后,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖无明显影响,但能够导致使细胞迁移能力显著减弱,细胞中E-cadherin蛋白含量明显增加.研究表明CNTN1对犬乳腺肿瘤CHMm增殖调节无明显作用,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm作用主要是通过降低E-cadherin蛋白的表达增强体外培养的肿瘤细胞迁移力,为犬乳腺肿瘤的治疗提供新的靶点....
摘要:为探讨过表达的第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)对犬乳腺肿瘤细胞系(CHMm)增殖及Bcl-2、Bax基因的影响,本研究构建了PTEN表达质粒pcDNA-PTEN,采用脂质体转染法将其导入CHMm细胞系,采用western blot检测PTEN蛋白表达情况,CCK-8法检测CHMm细胞增殖情况,荧光定量PCR检测Bcl-2和Bax的基因表达情况.结果显示,转染PTEN的CHMm细胞组的PTEN蛋白表达水平显著高于空载体组和未转染组;转染PTEN细胞组的细胞增殖显著低于空载体组和未转染组(P<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bcl-2的mRNA表达水平显著低于空载体组和未转染组(P<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bax的mRNA表达水平显著高于空载体组和未转染组(P<0.05).本实验将PTEN基因导入犬乳腺肿瘤细胞系(CmMm),抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖,为寻找乳腺肿瘤基因治疗新方法提供依据....
摘要:分析犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip基因表达及蛋白含量变化,并分析比较上述两种基因在不同类型的犬乳腺肿瘤中的表达情况.利用荧光定量PCR法,以正常乳腺组织作为参考,测定犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip在基因层面上的变化;应用本试验室自备的犬cyclinD1及犬p27kip抗体,以正常犬乳腺组织做参考,测定犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip蛋白变化,以及以免疫组化技术为基础,检测临床上不同类型的犬乳腺肿瘤的蛋白表达情况.结果显示,1.在对两种细胞系中的两种基因检测结果显示,cyclinD1与p27kip的mRNA的含量在不同的细胞系中情况有差异.2.CyclinD1在不同细胞系中的蛋白表达含量有极显著性差异(P<0.01);p27kip在两种细胞系中的蛋白表达有显著性差异(P<0.01).3.cyclinD1在良性与恶性肿瘤与正常乳腺组织相比有显著性差异.P27kip在肿瘤与正常组织比较差异显著.各类型肿瘤间的比较情况显示,cyclinD1在浸润性小叶癌与导管内癌肿瘤组织间差异显著,p27kip在混合样癌与导管内癌的差异有统计学意义,cyclinD1与p27kip间存在相关性.
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