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东北农业大学
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[硕士论文] 王英雪
农业工程;农业机械化工程 东北农业大学 2016(学位年度)
摘要:水稻在我国粮食作物中占有重要的地位,水稻的产量和质量是关系我国民生的大事。秧苗品质是影响水稻产量和质量的主要因素之一。黑龙省寒地地区水稻育秧面临异常天气频发,取客土困难,平面育秧占地面积大等制约性难题,研究闭锁式水稻立体育秧能够有效的解决目前水稻育秧面临的难题,是寒地水稻育苗发展的方向。研究具体如下:
  (1)通过对9中育秧基质的理化性质分析得出,对照组CK1容重为容重1.14g·cm-3,容重较大,不适合上下搬运,孔隙度为46.3%,孔隙度较小,不适合闭锁式立体育秧。其余育秧基质的容重相对较小,孔隙度偏大,pH值偏酸性,基质中的全氮、全磷、全钾和速效氮、速效磷、速效钾的含量均比对照组(CK1)高出数倍,理化性状均符合水稻秧苗适宜的生长条件。
  (2)本研究针对闭锁式水稻立体育秧自动化程度高、控制精准等特点,提出了一套针对闭锁式水稻立体育秧的一套育秧工艺。播种到绿化期以前,秧盘覆盖地膜保温保湿,此时空气湿度,土壤湿度不需要进行设定,也不需要光照,但是空气温度要控制在34℃,保证种子能够顺利出苗。种子出苗后进入绿化期,此时幼苗对光照比较敏感,光照强度不宜过大,光照只给一半。此阶段空气温度设置为30℃,空气湿度设定为70%,土壤湿度设定为8%,pH控制在4.5~5.5,绿化期时间比较短,一般6h左右。绿化期后,进入一叶一心期,这个阶段除光照强度增强,给全部光照外,其余参数的设置与绿化期一致。秧苗进入两叶一期后,光强给全部光照,空气温度设置为28℃,空气湿度设定为60%,土壤湿度设定为15%,pH控制在4.5~5.5。秧苗三叶一心期分两个阶段,一是前期生长阶段,光强给全部光照,空气温度设置为28℃,空气湿度设定为60%,土壤湿度设定为15%,pH控制在4.5~5.5。二是后期炼苗阶段,光强给全部光照,空气温度设置为18℃,空气湿度设定为50%,土壤湿度设定为15%,pH控制在4.5~5.5。
  (3)本研究筛选出较适合闭锁式水稻立体育秧的基质。通过育秧效果表明,添加粉碎稻壳和粉碎玉米秸秆的复合基质(M和T)要比单一基质(CK)更有利于秧苗的生长,添加玉米秸秆的复合基质(T)要优于添加稻壳的复合基质(M),有机物料的不同添加量也对秧苗生长也有很大影响,有机物料添加量在60%(M2和T2)时,秧苗的各个性状表现最优,其他两个处理差异性不显著。最终得出以处理T2(玉米秸秆(60%)+黑土(20%)+珍珠岩(20%))育秧基质在秧苗农艺指标、生物量指标、力学指标等方面表现较优。
  (4)本研究探索出适用于闭锁式水稻立体育秧的水分供给规律。通过对不同水稻育秧基质饱和持水能力、失水率、秧苗初始凋萎时间、秧苗初始凋萎含水量、秧苗永久凋萎时间、秧苗永久凋萎含水量等多方面的研究,表明T2(玉米秸秆(60%)+黑土(20%)+珍珠岩(20%))是较节能、节水的基质,此基质的饱和持水量(一次供水供水量的上限)为97.56%,早期凋萎含水量为10.9%,永久凋萎含水量5.22%,初始凋萎到永久凋萎时间差为19h。
[硕士论文] 王英雪
兽医学;临床兽医学 东北农业大学 2017(学位年度)
摘要:犬乳腺肿瘤作为危害母犬健康的常发的肿瘤性疾病之一,其受犬的年龄、品种、绝育状态、繁殖情况以及遗传因素等多种因素的影响。随着犬作为伴侣动物的常态化,犬饲养年限越来越长,犬乳腺肿瘤的发病率在逐年升高,严重威胁犬的健康。犬乳腺肿瘤无论从临床发病特点、组织病理学分型还是乳腺超声、CT诊断上都与人类乳腺癌具有极高的相似性,可以作为人类乳腺癌研究的完美模型。因此,寻求安全而又有效的抗肿瘤药物无论对人类还是犬都是十分必要和迫切的。二甲双胍作为一种口服降糖药,主要用于Ⅱ型糖尿病的治疗,对大量临床案例的统计分析发现二甲双胍在降低糖尿病患者血糖的同时,可以显著降低2型糖尿病患者罹患肿瘤的风险和死亡率,对肿瘤起到一定的预防和治疗作用。本研究以犬转移乳腺肿瘤细胞系CHMm和原发肿瘤细胞系CHMp为模型,进行二甲双胍对犬乳腺肿瘤增殖抑制实验的研究,为二甲双胍用于犬乳腺瘤的研究和治疗提供一定的实验基础和理论依据,主要研究内容及结果如下:
  1.通过CCK-8法和平板克隆形成实验,检测不同浓度二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞增殖活性和克隆形成能力的影响。结果表明,二甲双胍可显著抑制犬乳腺肿瘤细胞CHMm和CHMp的增殖活性和克隆形成能力,并呈现一定的浓度和时间依赖性,根据对CHMm和CHMp细胞IC50的比较发现:CHMm对二甲双胍的敏感性更高。
  2.通过Annexin-FITC和PI染色法,检测二甲双胍诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡情况,并通过western blot法检测凋亡关键蛋白的表达。研究证实,随着二甲双胍作用浓度的升高,可诱导犬乳腺肿瘤细胞CHMm发生细胞凋亡,并伴有凋亡核心蛋白caspase-3和PARP的活化切割片段的增加。在CHMp未观察到诱导凋亡的发生,核心蛋白的活化片段量没有发生显著改变。
  3.通过PI染色和流式细胞仪,检测二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞周期的影响,并通过western blot法检测周期相关蛋白的变化情况。结果发现,二甲双胍可将CHMm和CHMp细胞周期阻滞在G0/G1期,并能上调p21、p27和下调Cyclin D1、CDK4等G0/G1期关键蛋白的表达。
  4.通过western blot法检测二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞内AMPK/mTOR和PI3K/Akt/mTOR信号通路上关键蛋白的表达,结果发现二甲双胍可显著激活CHMm细胞中的AMPK蛋白,并抑制PI3K、Akt及mTOR的表达。而在CHMp,经二甲双胍处理后,未观察到AMPK的显著性激活,但观察到了PI3K、Akt及mTOR等相关蛋白的抑制现象。
  结论:本实验验证了二甲双胍对犬乳腺肿瘤的增殖抑制作用,并且此抑制作用可能以激活AMPK和抑制PI3K/Akt/mTOR信号分子为作用靶点通过诱导细胞凋亡和G0/G1期细胞阻滞来实现。这些发现表明二甲双胍有望成为犬乳腺肿瘤的潜在治疗药物,进而为人类乳腺癌的攻克提供一个完美的实验模型和扎实的基础。
摘要:为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTr法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期.结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间双重依赖,浓度越高,时间越长,抑制越明显,在电镜下观察细胞出现明显的凋亡形态,同时5 μmol/L顺铂作用24h后细胞阻滞于G1/S期,比例高达75.12%.结果表明,顺铂能抑制CHMp增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞G1/S期....
摘要:针对水稻闭锁式立体育秧室内环境参数无法在线获取和难以调控等问题,研制闭锁式立体水稻育秧室环境控制与监测系统.该系统可视化监测与调控秧苗生长环境,确定秧苗生长最佳环境,实现监测调控自动化,使秧苗保持最佳生长状态;将STC12C5A60S2单片机作为下位机,结合DS18B20温度传感器、DHT11温湿度传感器及土壤水分传感器采集数据,运用STC12C5A60S2单片机自带AD数模转换土壤水分信息,实现秧苗生长环境可视化.后期育秧试验表明,秧苗综合质量优于大棚育秧秧苗.研究结果为后续完善秧苗生长技术提供有效数据保障....
摘要:为研究二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞增殖和细胞周期的影响,以犬乳腺肿瘤CHMm和CHMp为模型,采用终浓度为o、5、10、20、40mmol/L二甲双胍对其进行干预,应用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布比例,再通过Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclinD1和p27的表达情况.二甲双胍作用48 h后,与对照组比较,CHMm细胞试验各组的成活率显著降低(P<0.05),而CHMp细胞除了5mmol/L组(P>0.05),其他试验各组的成活率也显著低于对照组(P<0.05),并且均呈现一定的浓度依赖性.流式细胞仪分析细胞分布比例发现,CHMm的G0/G1期细胞比例从(38.7±5.89)%增加到(70.36±5.78)%,CHMp的G0/G1期细胞比例也从(37.03±4.23)%增加到(54.92±4.67)%.随着二甲双胍作用浓度的增加,CHMm和CHMp细胞内cyclinD1表达量呈现减少的趋势,而p27表达量呈现上升的趋势.研究结果表明,二甲双胍可以抑制犬乳腺肿瘤细胞体外增殖能力,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,并下调cyclin D1和上调p27细胞周期相关蛋白表达量,从而为犬乳腺肿瘤治疗提供一定的理论基础....
摘要:以小区自走式旋耕机为研究对象,对其结构组成及工作原理进行了分析,并针对玉米根茬地旋耕作业的要求,采用Box—Behnken 中心组合试验设计方法对玉米根茬地进行了较为详尽的田间试验。结果表明:当旋耕机前进速度为0.6m/s、刀轴转速为224r/min、刀齿齿数为11片时,旋耕深度达到13cm,玉米根茬破碎率达到95%以上,基本满足了小区作业要求。...
摘要:为探究接触蛋白-1 (CNTN1)对体外培养的犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖及迁移能力的影响,本研究利用RNAi技术沉默CNNT1基因在犬乳腺肿瘤CHMm细胞中的表达,采用CCK8法检测CHMm细胞增殖能力、细胞划痕法检测CHMm细胞迁移能力,western blot检测CHMm细胞中E-cadherin蛋白含量.结果显示CNTN1沉默后,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖无明显影响,但能够导致使细胞迁移能力显著减弱,细胞中E-cadherin蛋白含量明显增加.研究表明CNTN1对犬乳腺肿瘤CHMm增殖调节无明显作用,对犬乳腺肿瘤细胞CHMm作用主要是通过降低E-cadherin蛋白的表达增强体外培养的肿瘤细胞迁移力,为犬乳腺肿瘤的治疗提供新的靶点....
摘要:为探讨过表达的第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)对犬乳腺肿瘤细胞系(CHMm)增殖及Bcl-2、Bax基因的影响,本研究构建了PTEN表达质粒pcDNA-PTEN,采用脂质体转染法将其导入CHMm细胞系,采用western blot检测PTEN蛋白表达情况,CCK-8法检测CHMm细胞增殖情况,荧光定量PCR检测Bcl-2和Bax的基因表达情况.结果显示,转染PTEN的CHMm细胞组的PTEN蛋白表达水平显著高于空载体组和未转染组;转染PTEN细胞组的细胞增殖显著低于空载体组和未转染组(P<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bcl-2的mRNA表达水平显著低于空载体组和未转染组(P<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bax的mRNA表达水平显著高于空载体组和未转染组(P<0.05).本实验将PTEN基因导入犬乳腺肿瘤细胞系(CmMm),抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖,为寻找乳腺肿瘤基因治疗新方法提供依据....
摘要:分析犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip基因表达及蛋白含量变化,并分析比较上述两种基因在不同类型的犬乳腺肿瘤中的表达情况.利用荧光定量PCR法,以正常乳腺组织作为参考,测定犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip在基因层面上的变化;应用本试验室自备的犬cyclinD1及犬p27kip抗体,以正常犬乳腺组织做参考,测定犬乳腺肿瘤细胞系CHMp与CHMm中cyclinD1与p27kip蛋白变化,以及以免疫组化技术为基础,检测临床上不同类型的犬乳腺肿瘤的蛋白表达情况.结果显示,1.在对两种细胞系中的两种基因检测结果显示,cyclinD1与p27kip的mRNA的含量在不同的细胞系中情况有差异.2.CyclinD1在不同细胞系中的蛋白表达含量有极显著性差异(P<0.01);p27kip在两种细胞系中的蛋白表达有显著性差异(P<0.01).3.cyclinD1在良性与恶性肿瘤与正常乳腺组织相比有显著性差异.P27kip在肿瘤与正常组织比较差异显著.各类型肿瘤间的比较情况显示,cyclinD1在浸润性小叶癌与导管内癌肿瘤组织间差异显著,p27kip在混合样癌与导管内癌的差异有统计学意义,cyclinD1与p27kip间存在相关性.
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