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摘要:目的:构建p1301-YO-K2-YO双油体KGF-2融合蛋白表达载体并转化拟南芥,与p1301-YO-K2单油体KGF-2融合蛋白表达载体对比,观察是否能够提高外源蛋白KGF-2的表达量,并对融合蛋白生物学活性进行鉴定.方法:PCR获得拟南芥油体蛋白oleosin和KGF-2核心区基因片段,融合PCR获得KGF-2-oleosin融合基因,与包含有一个oleosin的p1301-oleosin载体连接,构建p1301-YO-K2-YO(oleosin-KGF-2-oleosin)表达载体,利用农杆菌介导法将其转入拟南芥中进行表达,除草剂筛选获得转基因植株,通过PCR鉴定、SDS-PAGE、Western blot对KGF-2蛋白表达进行分析,提取油体蛋白涂抹法观察对C57 BL/6小鼠的毛囊促生长作用.结果:双油体载体成功转入拟南芥基因组中;Western blot灰度分析可知,与单油体表达载体p1301-YO-K2相比,双油体融合表达策略可使KGF-2蛋白表达量提高2.5倍左右;动物实验结果表明油体融合蛋白具有良好的促毛囊增殖活性....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的:在杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达结核分枝杆菌蛋白MPB64,并鉴定其免疫原性。方法:目的基因MPB64连接到pFastBac载体,获得pFastBac-MPB64质粒转化DH10 Bac感受态,通过Tn7转座片段将目的基因转座到Bacmid中,得到Bacmid-MPB64穿梭载体,脂质体包被后转染Sf 9细胞收获P1代病毒,重复转染Sf 9细胞三次获得高滴度的P4代病毒,收集细胞上清通过Q Sepharose FF和Ni亲和层析柱两步层析纯化得到目的蛋白MPB64。纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠并检测血清中抗体滴度,ELISA检测MPB64蛋白刺激脾脏细胞产生IFN-γ的浓度,MTT法检测目的蛋白对免疫后小鼠脾脏细胞的增殖作用。结果:MPB64在昆虫细胞中成功表达,纯化后蛋白纯度达90%以上,蛋白产量为35 mg/L,纯化蛋白能有效刺激BALB/c小鼠产生抗体,提高小鼠脾脏细胞培养基中IFN-γ的含量,目的蛋白在0.2~100μg/ml之间对脾脏细胞有明显的促增殖作用。结论:成功在杆状病毒昆虫细胞表达系统中表达了具有免疫原性的MPB64蛋白,为生产结核病疫苗奠定了基础。...
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:以红松、白松、落叶松、楸木的木屑为原料,利用自行设计研制的以流化床反应器为主体的生物质热裂解制取生物油系统进行快速热裂解试验.在对生物质热裂解制取生物油的主要工况参数进行全面试验研究的基础上,得出了生物质快速热裂解过程中反应温度、原料颗粒粒径、给料速率等主要参数对生物油产率的影响规律.研究结果表明:最佳的反应温度为500℃,给料速率为20 kg/h,生物油的最高产率达63.8%....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:根据生物质的特性和生物质快速热裂解制取生物油技术的工艺要求,设计制造了生物质原料的输送装置--螺旋给料机,该装置具有输送能力较小(20kg/h)、稳定均匀和密封性良好等特点....
摘要:本文以红松、白松、落叶松、楸木等不同木屑为原料,利用自行设计研制的流化床反应器进行了快速热裂解试验,获得最高生物油产率达63.8%.分析了反应温度、原料颗粒粒径、给料速率等主要参数对生物油产率的影响规律.
[硕士论文] 王晓艳
农业生物环境与能源工程 吉林农业大学 2005(学位年度)
摘要:本文详细归纳了国外及我国生物质热裂解制取生物油技术的研究现状,并且对国内外关于生物油组成成分的研究现状进行了系统地总结。从可持续发展的观点来看,生物质热裂解制取生物油技术有良好的发展前景。 对生物质原料的散粒体特性进行了分析,主要包括原料的粒径、堆积密度和休止角。生物质原料的散粒体特性对流化床反应器以及整个装置系统的设计都是非常必要的,它们也是生物质热裂解实验研究过程中的重要影响因素。采用范式洗涤纤维法对不同种类生物质原料的组成成分进行了测定。 利用现代精密仪器对试验所制取的生物油进行物理特性分析,主要包括生物油的密度、pH值、粘度和热值,并进行了相关方面的对比分析;利用现行组分分析的先进分析方法GC-MS对生物油的组分进行了分析,比较了不同工况条件下和不同原料所生成生物油成分的组成情况。通过生物油的成分分析解释了生物油高含氧和高含水特性。另外,根据生物油的成分分析可以确定出品质好、产油率高的生物油,为生物质快速热裂解制取生物油技术试验参数的确定提供可靠的数据。 为了优化生物油的产量和品质,本文结合国外在这方面已取得的一些成果,从定性上对相关生物质原料化学组成成分的热裂解反应机理做了粗略的探讨。 总之,有关生物质热裂解制取生物油方面的这些基础性研究,为生物质热裂解技术提供了第一手数据,对现有生物质热解装置的设计、试验工况参数的优化、产物的预测以及试验设备的扩大化等都具有非常重要的意义。
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