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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:将亲和素共价固定在表面改性后的硅片上,通过亲和素与生物素相互作用将生物素标记的噬菌体抗体GP3固定在亲和素膜层表面,当含有M13KO7噬菌体的样品经过抗体表面时,通过噬菌体与抗体之间的相互作用噬菌体就会被抗体捕获,生物学信号可以通过芯片上的膜层厚度变化表现出来,这种膜层厚度变化可以被椭偏生物传感器技术识别.结果表明,GP3抗体在芯片表面形成了饱和的抗体膜层,厚度为6.9nm;M13KO7噬菌体与芯片上固定的抗体会发生特异性相互作用,噬菌体被抗体捕获后形成的复合物膜层厚度为17.5nm,并且随着噬菌体浓度升高膜层厚度增加,检测含有M13KO7噬菌体的样品灵敏度为109pfu/mL.与其它研究病毒与抗体相互作用方法相比光学蛋白芯片技术具有简便快捷、无需标记待检样品和结果直观等优点,为研究病毒与其抗体相互作用以及疾病早期临床诊断提供了一个新的方法....
摘要:目的应用我国自行研制的无标记光学蛋白质芯片检测乳腺癌组织中的胸苷磷酸化酶(Thymidine phosphorylase,TP),为建立一种快速、简便的临床检测方法进行初步探索.方法将TP的多克隆抗体固定于已经过表面改性的固相光学抛光硅片表面上制备无标记光学蛋白质芯片,通过椭偏光学显微成像技术检测20例经病理证实的乳腺浸润性导管癌组织标本和正常组织标本中TP水平,以芯片灰度值表示组织中TP浓度高低.同时应用ELISA方法测定,并比较两种方法检测结果的一致性.结果20例癌组织的灰度值35.40±11.55,20例正常组织的灰度值为26.80±8.78,两组间差异具显著性意义(P<0.05).以44.36(正常组织平均值+2倍标准差)为阈值,乳腺癌检测的灵敏度为20.00%,特异度为100.00%.同ELISA检测结果相比,在20例乳腺癌组织标本检测中,两种方法的一致性具极显著意义(P<0.01).结论我国首创的椭偏光学显微成像技术简单、直观,结合光学蛋白质芯片可用于胸苷磷酸化酶的临床检测....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法的1.51倍.柱复性后的单链抗体亲和力测定的解离常数Kd为73.5nmol/mL.为进一步研究单链抗体H12的功能奠定了基础....
[期刊论文] 孟艳丽 王战会 靳刚
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:椭偏光学生物传感器是在椭偏光学显微成像技术的基础上发展的一项生物传感技术.它能够直接观测固体表面上的生物分子面密度,毋需任何标记辅助,适合发展成为一种无标记免疫检测技术.研究了在硅片表面上通过A蛋白定向固定抗体分子用于椭偏光学生物传感器免疫检测的可能性.实验结果表明,通过A蛋白固定抗体得到的抗体膜层的均一性和固定量的重复性能够保证椭偏光学生物传感器免疫检测结果的质量.通过A蛋白定向固定的抗体的抗原结合位点趋向一致,显著提高了抗体与抗原结合的能力.此外,通过蛋白A固定的免疫球蛋白G分子能够结合更多的多克隆抗体分子说明通过A蛋白固定的蛋白质分子能够较好地保持其空间构象....
摘要:目的应用我国自行研制的光学蛋白质芯片检测乳腺癌组织中的胸苷磷酸化酶(Thyrmidine phosphorylase,TP),为建立一种快速、简便的临床检测方法进行初步探索.方法应用TP的多克隆抗体制备光学蛋白质芯片,通过椭偏光学显微成像技术检测20例经病理证实的乳腺浸润性导管癌组织标本和正常组织标本中的TP水平,以灰度值表示组织中TP浓度高低.同时应用ELISA方法测定,并比较两种方法检测结果的一致性.结果30例癌组织的灰度值35.40±11.55,20例正常组织的灰度值为26.80±8.78,两组间差异具显著性意义(P<0.05).以44.36(正常组织平均值+2倍标准差)为阈值,乳腺癌检测的灵敏度为20.00%,特异度为100.00%.同ELISA检测结果相比,在20例乳腺癌组织标本检测中,两种方法的一致性具极显著意义(P<0.01).结论我国首创的椭偏光学显微成像技术简单、直观,结合光学蛋白质芯片可用于胸苷磷酸化酶的临床检测....
[期刊论文] 胡江 王战会 陶祖莱
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北大核心 CSTPCD AJ CA CBST
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摘要:细胞在模式化表面的定位培养对于组织工程、生物传感器技术和细胞生物学基础研究具有重要意义.研究基于软光刻技术的生物素-亲和素微模式表面快速制备方法,并用所制备的模式进行牛主动脉血管内皮细胞的定位培养.表明该技术可在细胞尺度上有效地控制细胞生长的空间位置....
[期刊论文] 王战会 靳刚
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北大核心 CSTPCD AJ CA CBST
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摘要:白细胞介素6(IL-6)是一种具有复杂生物功能的细胞因子,可由多种淋巴类和非淋巴类细胞产生.它对机体多种组织及细胞均有不同程度的作用[1-3].近年来发现,临床上免疫异常性疾病,如发热、淋巴结肿大、血沉增快、急性期蛋白增高、高γ球蛋白血症、自身抗体阳性等症状都与IL-6的异常表达密切相关.IL-6的生物活性是通过细胞膜表面特异性受体介导的[4].研究IL6与其受体的相互作用对于揭示某些疾病的发病机制,监测疾病进程以及指导临床治疗等均具有重要意义....
[期刊论文] 靳冈 王战会
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北大核心
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摘要:本文介绍一种新型光学蛋白质芯片技术.它通过表面格式化、表面改性和配基固定形成多元生物活性感应表面;借助蛋白质的特异结合性和高分辨率的生物光学显微成像技术达到识别和检测蛋白质的目的.它是一种非标记的多元蛋白质定量分析方法....
摘要:研究细胞和表面相互作用具有重要意义,利用长链的烷硫醇在金表面或烷基硅烷在羟基化表面形成的自组装单分子层及其微格式化的表面允许以分子水平研究并控制细胞和表面的相互作用。我们概述了自组装单分子层及其格式化表面研究细胞和表面相互作用的最新进展。...
[期刊论文] 王战会 靳刚
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北大核心 CSTPCD AJ CA CBST
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摘要:光学椭偏显微成像是一种新型超薄膜及表面显示技术,是研究生物分子与固体表面吸附以及生物分子之间相互作用的一种简单、快速和可靠的手段.它不仅能够大面积精确显示超薄膜的厚度分布,而且能够用于表面实时吸附的动力学研究.在抗原-抗体检测分析方面,它不需要像酶联免疫法、荧光免疫法和放射免疫法那样对待测物作标记,也不会对待测生物分子活性造成任何扰动和损伤,操作简单,费用低廉.另外,它还弥补了传统的椭偏法的不足之处,能够有效地区分非特异性吸附、脱吸附或表面污染带来的干扰....
摘要:在微重力环境下的细胞培养方法不同于传统的地面上的细胞培养技术.它必须解决以下问题:(1)微重力环境下,重力对流趋于消失.单靠扩散难以维持细胞正常生长所必须的化学微环境的稳态.故必须从传统的静态培养发展为动态(流动式)培养;(2)培养液流动引起的应力必然会影响细胞的结构和功能;(3)微重力环境下不允许气/液自由界面存在,故气体交换和供应和传统培养方法截然不同.为了适应微重力下细胞培养的要求,我们设计了双向流动片层透析式空间细胞培养装置....
摘要:粘附作用具有重要的生理学意义.细胞与表面的粘附是产生多种生物效应(包括生长、分化、迁移等)的基本要素.比如,细胞与表面粘附较强时,细胞通常生长;细胞与表面粘附减弱时,细胞发生分化;而细胞要进行分裂,首要的是先去粘附....
[专利] 发明专利 CN200510117696.7
摘要:全内反射椭偏成像装置及成像方法,它涉及一种利用椭偏术的光学成像方法和成像装置。本发明的全内反射椭偏成像装置,包括:光源、起偏器、滤波装置、补偿器、检偏器、透镜、位于入射光的光路上使光源所发出的光形成扩展的准直光准直系统、待测样品、棱镜和位于待测样品的反射光路上的CCD或CMOS探测器,CCD或CMOS探测器对扩展探测光束照射样品上的所有点同时进行成像测量。本发明的方法,包括:将一准直的单色入射光形成偏振光,将该光束形成为扩展的探测光束,然后将该光束以入射角α照射至待测样品;对扩展的探测光所照射区域的所有点的反射光束同时进行CCD或CMOS成像测量。本发明解决了现有的成像装置和成像方法只能实现单点单样品测量的问题。
[专利] 发明专利 CN200610065106.5
摘要:本发明涉及一种双脂膜表面改性的蛋白质芯片,其以硅基片为固体基片,其上依次为与硅基片共价键结合的L-α-磷脂酰乙醇胺单分子层,和与该磷脂酰乙醇胺单分子层通过疏水作用结合的对硝基苯酯基-聚乙二醇-(1,2-双油酰基-3-甘油磷脂乙醇胺)层。该蛋白质芯片是在微流道系统中将L-α-磷脂酰乙醇胺单分子层共价固定到硅基片表面,然后吸附对硝基苯酯基-聚乙二醇-(1,2-双油酰基-3-甘油磷脂乙醇胺)得到的。该蛋白质芯片可以用于椭偏成像生物传感器,通过在该蛋白质芯片表面PEG的末端官能基来共价固定配基分子,探测能与其特异性结合的靶分子,二者结合后,在椭偏成像系统中可以观察到蛋白质芯片表面形貌变化。本发明的双脂膜表面改性的蛋白质芯片可以有效阻止非特异性吸附,其配基分子层具有很好的稳定性,且保持高生物活性。
[专利] 实用新型 CN200420064457.0
摘要:本实用新型涉及一种集生物芯片制作、加样和检测反应一体化的系统,包括:弹性材料片上开有凹槽,凹槽两端开通孔、开有圆孔的刚性材料块,该圆孔所开的位置与弹性材料片的通孔相对应,弹性材料片不带凹槽的面与刚性材料块粘合在一起,其孔相通;芯片放在弹性材料片上,芯片表面与凹槽相对接触;另一刚性材料块上开有孔,孔内放置试管,试管与微量泵连通的液体出口相对设置;具有可调谐的样品台支架,安装在支架上的刚性材料块上开有圆孔,其圆孔对应弹性材料板上的通孔;微量泵的每一通道与芯片上的微流道液体进口或出口的微管连通。该系统设计了液体输运单元,使得各个流道的溶液在同一时间同时均匀流入微流道,保持各个流道流动的一致性和均匀性。
[专利] 发明专利 CN03157199.9
摘要:本发明涉及一种在蛋白质芯片表面固定蛋白质的方法。该方法使用组分A和组分B的无水乙醇溶液浸泡蛋白质芯片,所述组分A为能够使蛋白质芯片表面呈疏水性的有机化合物;所述组分B为一端含有能够与所需固定的蛋白质分子以共价连接的活性基团、一端含有极性基团的有机化合物;然后使用常规方法活化组分B的极性基团;最后将此蛋白质芯片放入所需固定的蛋白质溶液中浸泡。该方法固定的蛋白质比较稳定;而且能够有效降低蛋白质芯片表面与蛋白质分子间的相互作用,减少蛋白质芯片表面对蛋白质分子的空间构像的影响;通过这种方法固定的蛋白质的生物活性比通过物理吸附或单纯组分B固定的蛋白质生物活性提高1倍以上。
[专利] 发明专利 CN03157200.6
摘要:本发明涉及一种改性蛋白芯片表面的方法,其特征在于用常规方法在蛋白质芯片的基片上先固定一层小分子量的蛋白质分子,再固定待固定的蛋白质分子。所述的小分子量的蛋白质分子的分子量为1×103~9×105道尔顿。该方法可以改善蛋白质芯片表面的特性:一方面,小分子量的蛋白质分子覆盖在蛋白质芯片的表面,保证了待固定的蛋白质分子的生物活性,同时也抑制了待固定的蛋白质分子在固体表面上的非特异性吸附;另一方面,小分子量的蛋白质分子的带有氨基、羧基、羟基、巯基等活性基团的极性氨基酸残基多位于蛋白质分子表面,这些基团活化后可以直接用于固定待固定的蛋白质分子,形成稳定的共价键。
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