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摘要:[背景]冷季型禾草-Epichloae真菌内生共生体在我国广泛存在,Epichloae内生真菌具有遗传多样性.[目的]选取来自江苏、山东和安徽等6省共8地的早熟禾亚科植物中的21个Epichlo(e) sp.菌株,检测菌株的NRPS5基因;分析不同宿主内Epichlo(e)属内生真菌NRPS5基因多样性.[方法]提取Epichlo(e) spp.菌株DNA,利用特异性引物对菌株中NRPS5基因进行PCR检测和序列分析,并基于NRPS5基因构建最大简约法系统发育树.[结果]NRPS5基因可能广泛分布于我国东部冷季型禾本科植物Epichloae内生真菌中.在同种内生真菌和同一宿主(除鹅观草)中的不同种内生真菌中NRPS5基因相对保守,但不同宿主的内生真菌其碱基序列差异大,与宿主植物采集地点、采集时间和子座的有无均无相关性,NRPS5基因的差异主要与宿主植物有关.这说明NRPS5基因序列比较保守,推测属于NRPS蛋白的功能核心区.[结论]NRPS5基因序列相对保守,可作为真菌遗传多样性分析的一种辅助手段....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:[目的]本文旨在确定圆柱披碱草(Elymus cylindricus)内生真菌的分类地位.[方法]选择5株分离自新疆、青海的圆柱披碱草内生真菌菌株,采用SDS法提取基因组DNA,利用选择性引物对其tubB和tefA基因片段进行扩增和克隆测序,下载NCBI中的相似序列并进行比对分析,用MEGA 6.0软件构建系统发育树.[结果]成功获得差异极小的各菌株序列,且tubB序列确认为仅1个拷贝,而2个菌株的tefA序列则有2个拷贝.在最大简约树上披碱草菌株的tefA和tubB第1拷贝均在EBY(Epichlo(e) bromicola/E.yangzii)大支上,与E.sinica比较接近;tfA的第2拷贝与ETC(E.typhina complex)中的成员聚类.[结论] Epichlo(e) sp.-Elymus cylindricus是一个新的共生体组合.圆柱披碱草分离菌株为杂交起源的Epich(e)属真菌,可能起源于E.bromicola(syn.E.yangzii)和E.sylvatica间的杂交....
[期刊论文] 王志伟 纪燕玲 陈永敢
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:植物内生菌是近三十年来在国内外迅速受到关注的微生物类群,研究的角度不同,概念也比较混乱.本文就植物内生菌研究及其科学意义进行了综述和讨论.植物内生菌在国外广受关注,始于禾本科植物内生真菌以及林木内生真菌的特殊作用.产紫杉醇的红豆杉内生真菌被报道后,植物内生菌研究在生理活性物质领域开始暴发式的增加.通过对一年生草本植物、多年生草本植物、木本植物和藤本植物各部位的内生微生物的比较和分析,总结了植物内生菌的一些共性和特殊性,指出了植物内生菌研究的一些发展趋势.本文探讨植物内生菌对地球上的微生物物种总量的贡献.提出“植物体在自然界的实际生存状态实际上是微生物和植物的状态”的观点,导出植物育种实际上是“植物和微生物的共生体的培育”的观点.还讨论了植物内生菌对生态学、生物学、微生物的进化和物种形成、内生菌/宿主的联合代谢、以及植物保护学、畜牧兽医学、林学等领域的意义和影响.本文认为,植物内生菌研究打开了微生物资源的一个新局面,将在多个领域中产生更广泛的影响.植物内生菌研究的真正意义不仅在于其生态独特性,更在于微生物在宿主体内和宿主植物的协同作用及协同作用所产生的新功能和新物质....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:[目的]鉴定分离自辽宁省大连市细叶早熟禾中的内生真菌.[方法]在辽宁省大连市的黄金山和白玉山采集细叶早熟禾(Poa angustifolia L.),通过显微镜观察植物是否含菌,统计样品中内生真菌的检出率;从含菌样品中分离内生真菌,纯化后在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上培养3周,测定分离菌株的形态学特征;运用IQS法提取分离菌株的总DNA,利用特异性引物扩增分离菌株的β-Tubulin(tubB)和Translation elongation factor 1-α (tefA)基因片段,利用DNAssist 2.2和ClustalX 1.81软件进行序列的多重比对和分析,运行PAUP 4 beta 10、MrModeltest 2.3选择合适的模型,用MrBayes 3.1.2构建最大似然树,分析分离菌株的系统发育学特征.[结果]共采集植物样品262个,其中内生真菌的检出率达57.3%;根据分离地点和菌落特征筛选和纯化了10个分离菌株,选用其中6个分离菌株进行形态学特征的调查,发现分离菌株呈典型的Neotyphodium属形态学特征,进而和其他宿主为早熟禾属植物的内生真菌进行比较,发现分离菌株的特征与Epichlo(e) liyangensis相近,但分生孢子较小[(5.3±0.3) μm×(2.9±0.2) μm],生长速度稍慢(每周8.7±1.4 mm);基于5个分离菌株tubB和tefA片段序列的系统发育学特征显示,它们的tubB和tefA序列分别为单拷贝,并与E.liyangensis中的第二拷贝聚为一类.[结论]分离菌株在原始宿主植物上没有形成子座,分离菌株的形态学特征和系统发育学特征均与E.liyangensis有明显差异.兼顾其它早熟禾属植物内生真菌的宿主植物的种类和地理分布特征,这些菌株有可能属于一个新的内生真菌类群....
摘要:[目的]准确测定基因组大小是进行禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis全基因组序列测定和拼接的基础,本研究旨在利用实时定量PCR方法预测禾谷丝核菌的基因组大小.[方法]首先克隆了禾谷丝核菌R0301菌株翻译延伸因子A基因(tefA)的部分序列,Southern杂交明确该基因在该病菌基因组中为单拷贝.以已测序立枯丝核菌(Rhizoctonia solani) AG1-IA融合群菌株GD118为对照,采用实时定量PCR的方法进行了禾谷丝核菌基因组大小的预测.[结果]实时定量PCR的方法可以比较准确的测定立枯丝核菌基因组的大小,研究首次预测了禾谷丝核菌的基因组大小位于32.2-36.6 Mb之间.[结论]实时定量PCR法是一种快速和简便的预测丝核菌基因组大小的方法....
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EI CSTPCD 北大核心
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摘要:采用真核藻类叶绿体16S rRNA的引物PLA491F、OXY1313R,通过PCR、构建基因克隆库的方法初步调查了太湖梅梁湾和东太湖光合自养真核超微藻的遗传多样性.结果表明,太湖自养型真核超微藻主要为隐藻(Cryptophyta),其次为硅藻(Bacillariophyta)、金藻(Chrysophyta)和定鞭藻(Haptophyta).该结果有助于我们更全面地了解太湖浮游藻类的群落结构及生态功能....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:我国植物内生微生物的早期研究论文,基本上以非豆科植物根瘤菌Frankia属细菌为主.进入21世纪后,植物内生菌的研究,无论是研究领域的扩大,研究人员的增加,还是论文数量的递增都有了迅猛的发展,为国际上少有.我国植物内生微生物的研究具有资源探索多、分离培养多、活性检测多、活性物质功能研究多;方法研究少、涉及林木少、与宿主的关联少、实际应用少等特点.其研究主要集中在红豆杉类、红树类、鬼臼类、兰、银杏等植物中的内生微生物.论文的发表以药物开发为研究目标的最多,又以初级的资源探索型为最.以抗菌、抗肿瘤等指标为主的药物开发,是植物内生微生物研究中最耀眼的亮点,目前已获得了紫杉醇生产效率较高的内生真菌菌株资源.我国植物内生微生物研究有4大类24个应用研究的方向,其中特别值得关注的是豆科植物根瘤内生细菌的研究;尚待加强的有6个方面,尤其是深色有隔内生真菌(DSE)的研究.我国植物内生微生物研究在药用植物内生微生物的资源探索和筛选方面积累较丰富,而在有害内生微生物方面的研究则比较薄弱.最后,作者提示了一些尚待加强的研究技术,供相关人员参考....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:2011年9月,从内蒙古科尔沁地区采集长有真菌子座、却不长花序的禾本科植物26株.提取植物基因组DNA,合成引物扩增植物叶绿体DNA中的trnT-trnL基因间间隔序列.结果表明:内蒙古带子座植物样品与羊草的目的片段长度均为740 bp,仅4个碱基的差异;而新麦草属的Psathyrostachys fragilis目的片段长度为1 750 bp,与带子座样品及羊草的碱基差异较大.系统发育树分析表明带子座植物样品与羊草聚为一支,自展值95%.利用组织透明法观察植物的叶表皮微形态,内蒙古带子座植物样品同样与羊草叶表皮微形态一致.结合植物学形态特征、trnT-trnL基因片段分析及叶表皮微形态,内蒙古带子座禾本科植物被鉴定为羊草(Leymus chinensis Trin.).野外条件下,具有宿主特异性的内生真菌能在羊草植株上形成子座,国际上还未见相关报道,也显示羊草植株的特异性....
[期刊论文] 张凯 王志伟 高聪芬
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:抗药性监测对于指导稻飞虱防治的科学用药和评价抗性治理的效果具有非常重要的意义.目前稻飞虱的抗药性监测普遍采用点滴法和稻茎浸渍法以及稻苗浸渍法.本文以不同监测方法的适用药剂和飞虱种类为切入点,系统地介绍了3种稻飞虱的抗药性监测方法,并比较了它们之间的特点,旨在为稻飞虱的抗药性监测提供技术指导....
[期刊论文] 王晗 王永 纪燕玲 王志伟
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:[目的]检测源自黑茶的散囊菌属分离菌株中的NRPS基因,推测它们相应的次级代谢产物合成能力,并考察了基于NRPS基因分布特征进行散囊菌属真菌遗传多样性分析的可能性.[方法]运用IQS法提取来自湖南、四川和湖北等地黑荼样品的14株散囊菌(Eurotium spp.)菌株的总DNA,利用特异性引物对菌株中11种NRPS基因片段进行PCR检测和序列分析,并结合UPGMA法分析了NRPS基因的分布.[结果]各菌株分别含有4-10个NRPS基因片段.NRPS7、CPS1基因在所有菌株中都可以检测到,而NRPS2、NRPS6基因则仅在个别菌株中检测到;其它NRPS基因的分布则呈现出多样性.来自同一块砖茶的菌株Fw-30813-7、Fw-30813-4、Fw-30813-1和Fw-30925-5之间,NRPS1、NRPS2、NRPS3、NRPS4和NRPS8五个基因的分布存在差异,显示出黑茶内散囊菌的遗传多样性.来自湖南白沙溪茶厂的茯砖样品的菌株Fa-20719-3不舍有NRPS5和NRPS8基因;而从湖南益阳茶厂茯砖茶7个分离菌株中均含有这两种基因.不同地点加工出来的黑茶样品中的散囊菌菌株之间存在一些明显的遗传差异.[结论]首次从我国黑茶中的散囊菌属分离菌株中检测到NRPS基因,并推测了NRPS产物的多样性,展示了其多样化分布特征,提示NRPS基因的分析有可能成为衡量散囊菌遗传多样性的另一个尺度....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:利用流式细胞仪分选技术及PCR、构建基因克隆库的方法初步调查了冬季太湖、玄武湖、紫霞湖真核超微藻的遗传多样性及影响因子,以揭示3个湖泊真核超微藻的差异,更全面地了解不同湖泊浮游藻类的群落结构.结果表明不同湖泊真核超微藻多样性存在明显差异,玄武湖以隐藻(Cryptophyta)为主,紫霞湖优势种为隐藻,还有少量金藻(Chrysophyta),太湖真核超微藻多样性较为丰富,有金藻、隐藻、硅藻(Bacillariophyta)、绿藻(Chlorophyta),且不同湖区也有差异.梅梁湾N2点以金藻为主,贡湖湾N4点隐藻、硅藻、绿藻数量相当,但发现较多真菌,靠近大湖区的W2点多样性最为丰富,4种藻均有发现.不同湖泊真核超微藻多样性与环境因子的冗余分析表明,总磷含量与其多样性显著相关....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo(e)属和4种Neotyphodium属内生真菌.采用改良的QS( improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证.以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min.该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4.以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBl上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似.这种快速提取法所获得的基因组DNA质量高,可用于后续PCR、基因克隆及其他高通量测试,特别适合获取大量真菌菌株基因组DNA时使用....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:2010年在南京紫金山地区采集小颖羊茅(Festuca parvigluma Steud.)的完整植株和成熟种子,通过染色、分离、特异性基因片段检测等方法探究内生真菌Neotyphodium sinofestucae Chen,Ji et Wang在其体内的分布和种传特性.从植株茎秆、叶鞘、叶片和种子稃片及颖果等部位分别检测和分离到具有禾本科植物内生真菌特征的真菌.同时,从含有内生真菌的种子培育实生苗,并从实生苗中检测和分离到类似的内生真菌.通过对tubB基因片段的PCR扩增和检测,证明分离自小颖羊茅的样品与其实生苗的分离菌株是相同的N.sinofestucae.上述结果表明:N.sinofestucae遍布小颖羊茅植株地上部分,却不进入根部;内生真菌N.sinofestucae能进入种子,通过种子进行垂直传播,与宿主植物长期互利共生....
摘要:为高效获得内生真菌Epichlo? yangzii Rnj5706菌株的原生质体,分别检测酶系组合、稳渗剂、pH值、酶解温度等因子对E.yangzii原生质体制备的影响.结果表明:制备E.yangzii原生质体的优化条件为液体培养48 h的鲜菌丝在pH值6.8含0.7 mol/L NaCl的酶解液(1.5%崩溃酶、1.0%蜗牛酶、1.0%纤维素酶、2.0%溶菌酶)中32℃酶解4h,这时的原生质体得率为39.2×105个/mL酶解液.并比较不同保存时间下的原生质体的再生比率,表明随保存时间延长,再生比率急剧下降.本研究关于E.yangzii原生质体的制备和再生方法,为内生真菌遗传操作等后续研究提供了基础....
[期刊论文] 王志伟 纪燕玲 陈永敢
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:通常禾本科植物内生真菌专指“epichlo?内生真菌”,包括Epichlo?属真菌和Neotyphodium属真菌.Epichlo?属真菌偶尔会在植物茎秆上形成子座,而Neotyphodium属真菌在宿主植物体上一般不表现任何症状.这些真菌在培养基上对植物病原具有明显的拮抗作用,能增强植物的抗虫、抗旱、抗病、抗寒能力,促进肥料吸收,促进植物生长和分蘖、增产等,有时也会使宿主植物生产过量的生物碱,造成家畜中毒.因此,如何筛选和利用具有优秀农艺性状且没有合成生物碱能力的禾本科植物/内生真菌共生体是epichl?内生真菌资源利用的关键.本文还结合我国近年来多种小麦族植物内生真菌的新发现,讨论了将禾本科植物内生真菌在我国麦类作物中的应用潜力....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:在我国吉林省长春市3个采样点共采集96株鹅观草属植物样品,经鉴定为犬草(Roegneria canina).通过检测,样品中内生真菌的含菌率高达67.7%.分离得到5个菌株并对它们进行形态学特征调查,分离菌株呈典型的Neotyphodium属真菌特征.选择菌株Rj17101和Rj17104,利用tefA和tubB基因片段进行系统发育分析,结果表明分离菌株与NeDtyphodium sinicum聚为一枝.根据以上结果,确定分离菌株为N.sinicum.这是首次在犬草中发现N.sinicum,也扩大了N.sinicum在我国的分布地区范围,进一步说明我国拥有极为丰富的内生真菌资源且分布广泛....
[期刊论文] 纪燕玲 孙相辉 王志伟
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:2006至2008年的夏季,从黄山景区海拔500-1600m处,采集至少23个属的631株禾本科植物,通过镜检,其中的内生真菌检出率为39%.内生真菌的分布与宿主植物的种类、宿t植物的地理分布类型等有关,拂子茅植物的检出率高达67%.在所调查的6个地理分布类型中,内生真菌大量分布在北温带分布的植物类型中.从短柄草中发现了香柱菌(Epichloe sp.),其子座等形态学特征与欧洲菌株存在很大差异,这是我国新报道的第2例有性型内生真菌....
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北大核心 CSTPCD CSCD
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摘要:通过构建稻褐飞虱肠道细菌16S rRNA文库的方法,分析了褐飞虱肠道内细菌的种类与多样性.通过对16S rRNA序列分析,从褐飞虱室内种群肠道中鉴定了13种细菌,这些细菌分属于沃尔巴克氏菌(Wolbachia)、短波单胞菌属(Brevundimonas sp.)、定氮螺旋菌属(Azospirillum sp.)、苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.)、草螺菌属(Herbaspiril-lum sp.)、丛毛单胞菌属(Comamonas sp.)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、窄食单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)、白色杆菌(Leucobater sp.)、Cardinium及暂定类群TM7.其中以不动杆菌、窄食单胞菌、苍白杆菌属与TM7最为常见....
摘要:2002年春季,利用化学农药丁硫克百威、氯唑磷、侵入巴斯德氏芽菌(Pasteuria penetrans)制剂,在海南省进行辣椒和苦瓜根结线虫病害的防治试验.结果表明,药刺处理35 d后,在盆栽环境下,侵入巴斯德氏芽菌处理组的根结指数明显低于化学农药处理组,但在田间,各处理组之间效果差异小明显.另外,田间试验中,对照和侵入巴斯德氏芽菌剂处理组的植株均受到疫病的严重危害.说明侵入巴斯德氏芽菌制剂对抑制根结线虫病害具有一定的效果,而且在盆栽条件下,其效果优于供试的2种化学农药,但对其它病害的发生没有影响....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:植物内生真菌是当代微生物资源研究的一个热门话题,对禾本科植物内生真菌资源研究进行了总结.与冷季型禾本科植物共生的麦角菌科epichlo(e)内生真菌是目前的研究重点,包括偶尔在宿主植物体表形成子座的Epichlo(e)属真菌和几乎完全不形成症状的Neotyphodium属真菌.具体介绍该真菌类群的物种多样性及其地理分布多样性,概括了它们在全球各大区域的分布特征.对近年来中国迅速发展的epichlo(e)内生真菌的研究作了总结,最后展望了国际国内epichlo(e)内生真菌资源探索的发展方向.特别指出:冷季型禾本科植物内生真菌在南美洲和亚洲,暖季型禾本科植物内生真菌在热带亚热带地区的研究还相对薄弱,值得今后继续加强探索和挖掘....
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