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摘要:bZIP转录因子在植物非生物逆境胁迫的响应中发挥着重要作用,本研究通过同源克隆在柳枝稷(Panicum virgatum L.)中获得PvbZIP8基因,并对该基因进行了初步的生物信息学分析,同时利用荧光定量PCR技术进行了非生物胁迫下基因表达模式分析以及组织特异性表达分析.结果显示:基因的开放阅读框长度为468 bp,编码155个氨基酸,分子式为C761 H1248 N24 O23 S8,分子量为17.81 kDa,为亲水性蛋白.系统进化分析表明该蛋白与哈氏黍(Panicum hallii)、谷子(Setaria italica)和糜子(Panicum miliaceum)相似性较高,并且具有典型的bZIP保守结构域,属于bZIP转录因子家族成员.定量PCR结果显示,PvbZI P8基因在盐、干旱、高温和低温胁迫下上调表达,在柳枝稷抗逆过程中发生作用.组织特异性表达分析表明,PvbZI P8在多个组织或器官均有表达,其中在根、茎、叶中表达量较高.本研究初步确定柳枝稷PvbZI P8基因响应抗逆性反应,并为进一步研究柳枝稷PvbZI P8基因的生物学功能奠定基础....
摘要:对牛背梁自然保护区的秦岭梁、南坡的北沟、北坡的石砭峪进行了昆虫多样性调查.共采集到昆虫标本3 053号,隶属14目、98科、442种;优势类群双翅目、鞘翅目、半翅目、同翅目、膜翅目的科数分别占总数的22.45%、18%、12%、11%和11%,其种类数分别占27.38%、18.55%、16.74%、13.12%和12.9%.物种丰富度指数为秦岭梁(42.284 0)>北沟(24.464 6)>北石砭峪(21.229 6),多样性指数为北沟(4.469 5)>石砭峪(4.427 7)>秦岭梁(3.580 3),其中,随海拔的升高,秦岭梁昆虫物种的丰富度指数和多样性指数呈先升高后降低的趋势....
[期刊论文] 王伟伟 何彩 李孟楼
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北大核心 CSTPCD CSCD CBST
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摘要:研究不同饲料对花绒寄甲Dastarcus helophoroides (Fairmaire)]成虫肠道微生物区系的影响.人工配制4种花绒寄甲成虫饲料(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ),主要成分分别为蚕蛹粉、蟋蟀粉、替代寄主粉和蚂蚁粉,分别饲养花绒寄甲成虫.无菌取其肠道,进行肠道细菌16S rDNA全长PCR扩增和16S rDNA V3可变区的PCR扩增,扩增产物经16S rDNA作为分子标记的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分离后再进行相似性分析.结果表明,从成虫肠道共得到11种细菌,分别属于德库菌属(Desemzia)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、不粘柄菌属(Asticcacaulis)、纤维弧菌属(Cellvibrio)、动性杆菌属(Planomicrobium)、橙单胞菌属(Aurantimonas)和埃希氏菌属(Escherichia).经相似性分析后,饲喂饲料Ⅰ(蚕蛹粉)和饲料Ⅱ(蟋蟀粉)的成虫肠道细菌区系相似性为64%;饲喂饲料Ⅲ(替代寄主粉)和饲料Ⅳ(蚂蚁粉)的成虫肠道细菌区系的相似性为61%.饲料Ⅰ、Ⅱ喂养的成虫和饲料Ⅲ、Ⅳ喂养的成虫肠道菌群差异性较大,相似性为21%.可见,不同饲料对花绒寄甲成虫肠道微生物群落组成有很大的影响....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:为研究CD151与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的关系,根据GenBank中已发表的CD151蛋白的基因序列设计并合成一对特异性引物,从Marc-145细胞中扩增出294 bp的CD151基因片段并克隆入pGEX4T-3载体,转化人大肠杆菌用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定.表达蛋白纯化后用于免疫小鼠制备抗CD151蛋白血清,用ELISA和IFA检测抗血清的效价及特异性.将抗CD151蛋白血清与Marc-145细胞孵育后再感染PRRSV,观察细胞CPE验证该血清对PRRSV的阻断效果.结果表明成功构建了pGEX4T-3-CD151,获得了相对分子质量为37 ku的重组CD151蛋白.制备的抗血清特异性结合Marc-145细胞并有效阻断PRRSV感染Marc-145细胞.这些研究结果为进一步阐明CD151与PRRSV感染的关系提供一定的理论基础....
摘要:旨在研究益加康对AA+肉鸡的应用效果.将1日龄240只AA+肉仔鸡随机分为A、B、C、D四组,试验组添加不同浓度的相应产品,饲喂1~42日龄,取不同日龄肉鸡检测其生产性能及血液生化指标.结果表明,与空白组相比A、B组肉鸡日增体质量、脾指数、胸腺指数、血清TP和AKP的活性显著增加(P<0.05或P<0.01);血清Urea及血清中CK、LDH的活性显著降低(P<0.05或P<0.01).结果提示益加康对AA+肉鸡有明显促进生长,降低料肉比,提高机体免疫力和抗应激能力....
摘要:为探讨奶牛合理的超排方法,采用分离的X冻精对17头超数排卵的荷斯坦奶牛进行人工授精,生产体内性控胚胎.结果表明,处理Ⅰ组在头均获卵数、可用胚及退化胚几个方面都低于处理Ⅱ组,但差异不显著(P>0.05);头均黄体数和未受精数,Ⅰ组高于Ⅱ组(P>0.05);青年牛头均获卵数、可用胚和退化胚方面都高于经产牛组,但差异不显著(P>0.05);青年牛头均未受精卵数显著高于经产牛(P<0.05),头均黄体数低于经产牛,但差异不显著(P>0.05)....
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北大核心 CSTPCD CSCD CBST
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摘要:为发现新的天然源抗植物病毒活性物质,从枯草芽孢杆菌W-QX-1的发酵液中粗提了碱性蛋白酶,并初步测定了其抗TMV活性及其酶学性质.结果表明,W-QX-1碱性蛋白酶作用最适温度为50℃;在硼酸-硼砂缓冲液中的作用最适pH为7.8;在Tris-HCl缓冲液中的作用最适pH为8.0;在pH6~10范围内,45℃以下酶的性质稳定;对干酪素、明胶、牛血清白蛋白和精炼丝素均具有一定的降解能力,其中对干酪素的降解力最强.采用半叶法测定了其抗烟草花叶病毒TMV的活性,发现该酶对TMV的体外钝化作用明显,在酶液浓度为50 mg/L时,其钝化效果即可达到53.40%;而该酶对TMV的初侵染和体内复制增殖也具有一定的抑制能力.试验结果表明,在TMV侵染前24 h施用浓度为200 mg/L碱性蛋白酶液抑制其侵染力的效果达到50.35%,而在TMV侵染后抑制其复制增殖的作用并不明显.可见,该酶是一种性质稳定的广谱性蛋白水解酶,并具有一定的抗TMV活性....
摘要:从新疆保护地蔬菜和棉田采集的土样中分离筛选对小麦全蚀病具有拮抗作用的放线菌,结果发现,7个土样中分离到的放线菌菌株数有明显的差异,菌株数从1.0×104~1.0×105 cfu/g.测定纯化得到的30株不同菌株对小麦全蚀病菌的抑制试验,有12株表现出不同的抑制效果,其中XG1的抑菌圈达到8.84 mm.12株放线菌中有8株的发酵滤液对小麦全蚀菌的菌丝生长有抑制作用,其中XC2,XA5和XF5的抑制效果达到80%以上.盆栽试验结果表明,菌株XA5对小麦全蚀病在幼苗茎基部症状的控制作用达到59.2%,且幼苗的根长、株高以及株鲜重、干重与发病对照相比都有所增长,其中XC2处理的幼苗最明显,根长、株高、根鲜重和干重分别比对照增加20.3%,38%,36.8%和44%,地上部鲜重和干重分别比对照增加57.4%和38.5%,说明这几株放线菌对小麦全蚀病有较好的防治作用....
[期刊论文] 何玲 唐爱均 王伟伟
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CSTPCD 北大核心
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摘要:对陕西省几个主要胡萝卜品种营养成分的含量进行了全面细致地分析.结果表明,根据不同胡萝卜品种营养成分含量,可以针对性地进行加工利用,充分发挥各品种的优势....
摘要:摘要:为了研究波形蛋白在介导PRRSV感染过程中的作用,根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,利用RT-PCR方法从Marc-145细胞中扩增目的基因,克隆人pET-28a,转化表达菌BL21( DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物,将表达产物纯化后免疫BALB/c小鼠制备血清,用病毒阻断实验验证PRRSV与波形蛋白及其抗体的关系。用ELISA方法确定了重组波形蛋白与PRRSV结构蛋白N蛋白和囊膜蛋白GP5蛋白之间的关系。结果表明,成功的从Marc-145细胞中扩增出全长的波形蛋白基因,将其克隆入pET-28a,诱导后得到高效表达,表达蛋白纯化后免疫小鼠抗体效价达到105,病毒阻断实验表明波形蛋白能部分阻断PRRSV感染,其抗血清能完全阻断PRRSV感染。ELISA结果表明波形蛋白能与N蛋白结合而不与GP5蛋白结合。此结果为PRRSV感染的细胞的受体机制增添了新的内容,为PRRSV感染过程中受体间的相互作用关系研究奠定基础。...
[专利] 发明专利 CN201310132418.3
摘要:本发明公开了一种无刺花椒品系培育方法,包括以下步骤:1)材料采集在大红袍品系中选择并剪取当年生枝条,以当年生枝条上的饱满芽做接穗;2)嫁接砧木苗以2年生大红袍、野生花椒实生苗为砧木,于嫁接前一年按照40cm×25cm株行距栽植砧木苗,嫁接前剪去砧木苗的小枝、及主干60~65cm高处以上的稍部,在主干20cm处嫁接,嫁接后用塑料薄膜条密封、保湿,嫁接芽外露;3)无刺花椒苗优择自当年嫁接苗中选出无刺花椒品系后、编号、挂牌、记载,并分别对无刺花椒品系进行多代重复嫁接,最终培育出性状稳定的无刺花椒品系。
[硕士论文] 王伟伟
植保资源利用 西北农林科技大学 2008(学位年度)
摘要:碱性蛋白酶(Alkaline Protease)是指在pH为碱性的条件下水解蛋白质肽键的酶类,是一种广谱性的蛋白水解酶,且来源广泛。由微生物法获得碱性蛋白酶成本低、产量高,方法科学可行。本研究旨在利用碱性蛋白酶降解烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白从而达到防治烟草花叶病的目的,为植物病毒病的防治提供一条崭新而有效的途径。论文从产碱性蛋白酶枯草芽孢杆菌的筛选、碱性蛋白酶的分离纯化、碱性蛋白酶抗TMV活性及其酶学性质等方面进行研究,主要研究结果如下: (1)从实验室已保存的4株枯草芽孢杆菌中,筛选出一株产高活性碱性蛋白酶的枯草芽孢杆菌W-QX-1。 (2)对菌株的发酵条件进行了研究,分别试验了起始pH和装液量对发酵产酶的影响,绘制了发酵过程曲线。确定其最适发酵条件为:发酵起始pH为8.0,装液量为20mL/250mL,发酵周期为36h。 (3)菌株W-QX-1的发酵液经硫酸铵盐析、透析及非变性电泳分离得到纯的碱性蛋白酶,SDS-PAGE测得其相对分子质量为42400。 (4)采用半叶枯斑法在心叶烟上检测W-QX-1碱性蛋白酶抗TMV活性,发现该酶对TMV具有明显的体外钝化作用,酶液浓度为20mg/L、50mg/L、100mg/L和200mg/L时,其钝化效果分别达到45.20%、53.40%、60.42%和76.73%1该酶对TMV的初侵染和体内复制增殖具有一定的抑制能力,实验结果表明在TMV侵染前24h施用浓度为200mg/L碱性蛋白酶液抑制其侵染力的效果达到50.35%,而在TMV侵染后施用也具有一定的抑制其复制增殖的作用,但效果并不明显。 (5)以酪蛋白为底物,对菌株W-QX-1产碱性蛋白酶酶学性质进行了研究。该酶的最适作用温度为50℃左右,在硼酸一硼砂缓冲液中的最适作用pH为7.8,在Tris-HCl缓冲液中的最适作用pH为8.0,在pH6~10范围内,45℃以下酶的稳定性较好。Ca2+、K+、Mg2+对酶都有一定的激活作用,而Cu2+、Ag+则能抑制酶活;EDTA对该酶显示出较强的抑制作用,而SDS对该酶有明显的激活作用。 (6)枯草芽孢杆菌W-Qx+1产碱性蛋白酶可以降解多种蛋白底物,其中对干酪素的降解能力最强,对可溶性丝素、明胶、牛血清白蛋白和精炼丝素也均有不同程度的降解,是一种广谱性的蛋白水解酶。
摘要:本文从新疆保护地蔬菜和棉田采集的土样中分离筛选对小麦全蚀病具有拮抗作用的放线菌,结果发现,7个土样中分离到的放线菌菌株数有明显的差异,菌株数从1.0×104~1.0×105cfu/g.测定纯化得到的30株不同菌株对小麦全蚀病菌的抑制试验,有12株表现出不同的抑制效果,其中XG1的抑菌圈达到8.84mm.12株放线菌中有8株的发酵滤液对小麦全蚀菌的菌丝生长有抑制作用,其中XC2,XA5和XF5的抑制效果达到80﹪以上.盆栽试验结果表明,菌株XA5对小麦全蚀病在幼苗茎基部症状的控制作用达到59.2﹪,且幼苗的根长、株高以及株鲜重、干重与发病对照相比都有所增长,其中XC2处理的幼苗最明显,根长、株高、根鲜重和干重分别比对照增加20.3﹪,38﹪,36.8﹪和44﹪,地上部鲜重和干重分别比对照增加57.4﹪和38.5﹪,说明这几株放线菌对小麦全蚀病有较好的防治作用.
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