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摘要:目的:探讨骨髓和淋巴结微环境对人舌癌细胞SCC-9生长的影响。方法:利用Transwell小室建立微环境与SCC-9共培养体外模型,分为5组:SCC-9单独培养组(对照组),SCC-9+Balb/c小鼠骨髓共培养组,SCC-9+Balb/c小鼠淋巴结共培养组,SCC-9+Balb/c裸鼠骨髓共培养组,SCC-9+Balb/c裸鼠淋巴结共培养组。采用直接计数法分别于24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h检测SCC-9的数量。结果:利用Transwell小室成功构建骨髓、淋巴结微环境与SCC-9共培养体外模型。计数结果显示,SCC-9在Balb/c裸鼠淋巴结共培养组中的增殖程度高于其他4组(P<0.05);在Balb/c裸鼠骨髓,Balb/c小鼠骨髓和淋巴结共培养组中均低于对照组(P<0.05),且抑制程度无明显差异(P>0.05)。结论:不同微环境可能通过不同的肿瘤休眠机制,控制肿瘤细胞的增殖与休眠,最终被动形成淋巴转移的靶向性。...
摘要:目的:获得与口腔鳞状细胞癌(OSCC)易感及转移密切相关的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphi-sms,SNP)位点.方法:选择10例晚期OSCC患者原发灶及颈淋巴结转移灶组织,24个健康志愿者的外周血样本,提取DNA,采用全基因组外显子测序技术,分析口腔癌发生及转移的易感基因.结果:聚类运算后,将样本分为病例组(原发灶+转移灶)和健康组进行关联分析,初步分析得出622个SNP相关位点,经多重校正,确定2个SNP有意义(P<0.05),查询NCBI数据库Gene确定了为HLA-B基因和C19orf45基因.结论:HLA-B基因和C19orf45基因可能与口腔鳞状细胞癌的发生相关....
摘要:目的:利用槟榔碱饮水法初步构建与人口腔黏膜下纤维性变(OSF)发生发展相似的Balb/c小鼠OSF模型.方法:54只Balb/c小鼠随机分成实验组和对照组,每组27只.实验组采用500 mg/L槟榔碱饮水法喂养8~16周后停药,对照组仅给予同等量自来水喂养.在实验第8周后,每隔2周随机处死两组小鼠各5只,进行颊部黏膜HE染色显微结构观察及Masson三色染色确定胶原堆积.结果:实验组在第12周后开始出现了不同程度的OSF样改变,表现为上皮萎缩、黏膜固有层、黏膜下层胶原堆积和微血管病变;病变迸一步发展可波及深部肌层.对照组未见明显的组织形态学改变.结论:采用槟榔碱饮水法可快速诱发出小鼠颊部较典型、稳定的OSF模型....
摘要:目的:通过比较有、无槟榔咀嚼史的口腔癌患者肝功能指标变化,并与槟榔碱诱导小鼠口腔黏膜下纤维化模型的肝脏损伤比较,探讨槟榔碱对肝脏功能的影响.方法:比较有、无咀嚼槟榔史各50名口腔癌男性患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)肝功能指标差异;将45只小鼠,随机分成对照组、停药组、不停药组,每组15只.配制1000mg/L槟榔碱溶液分别持续自由喂养停药组、不停药组2周后,停药组改用实验室灭菌水自由喂养2周,不停药组继续槟榔碱溶液喂养2周;对照组用实验室灭菌水自由喂养4周.检测各组小鼠不同时间段上述肝功能指标变化情况,并采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏组织学改变.结果:与无咀嚼槟榔史患者相比,咀嚼槟榔的肝功能指标AST、TBIL显著升高(P<0.05),ALT、ALP无明显变化;与对照组小鼠相比,停药组和不停组随用药时间增长,ALT、AST、ALP显著升高(P<0.05),而停药组停药2周后ALT、AST、ALP显著下降(P<0.05),TBIL无统计学差异;HE染色显示肝脏均出现损伤,但不停药组小鼠损伤更为明显.结论:槟榔的成分对肝脏有损伤,其作用的有效成分可能是槟榔碱....
[硕士论文] 温琦涛
口腔临床医学 广西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis,OSF)是一种以上皮萎缩,黏膜固有层、黏膜下层胶原堆积和微血管病变为主要病理特征的,具有癌变倾向的口腔黏膜疾病,但是其发病机制尚不明确,且关于OSF动物模型研究的报道极少。在本研究中,我们利用槟榔碱饮水法构建与人OSF发生发展相似的Balb/c小鼠OSF模型,并观察在小鼠OSF发生、发展过程中胶原堆积和血管生成变化的情况。
  方法:1.40只Balb/c小鼠随机平均分成实验组和对照组。实验组采用槟榔碱(Arecoline)1000mg/L饮水喂养20周,对照组仅给予自来水喂养。每天观察小鼠精神状况、活动度、进食、饮水量、饮药量等情况,每周记录小鼠饮水量,饮药量及体重变化。每两周进行张口度检测。喂养8周后,每隔4周随机取各组4只小鼠,麻醉后进行口腔黏膜大体观察,随后处死,取材口腔组织行苏木精-伊红(Hematoxylin and eosin staining,HE)、Masson和V.G(Van Gieson)特殊染色显微结构观察。20周剩余小鼠全部处死。
  2.在建模过程中,采用免疫组织化学(immunohistocheory,IHC)CD34染色计数上皮下血管数量,采用免疫组织化学观察固有层Ⅰ型胶原蛋白(Collagen typeⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(Collagen typeⅢ,ColⅢ)堆积情况,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)技术检测ColⅠ和ColⅢmRNA表达变化差异。
  结果:1.从8周开始,实验组的舌粘膜观察到上皮萎缩,胶原累积和胶原病变在固有层和粘膜下层,颊粘膜和腭粘膜于第12周开始出现上述改变,OSF病变程度随给药时间的延长逐渐加重;至20周,舌、腭部组织可以观察到结缔组织的晚期玻璃样变,颊部组织仍然处于OSF中期病变阶段;对照组未发现异常。
  2.随给药时间的延长,实验组小鼠舌黏膜OSF病变区域上皮下血管生成出现先增加后减少的趋势,在12周和20周与对照组相比,分别表现出增加和减少的显著性差异;颊、腭组织也可观察到类似改变。
  3.实验组小鼠OSF病变区域,固有层ColⅠ的mRNA表达与对照组相比明显增加,有显著性差异,并随给药时间的延长,变化越加明显,ColⅢ的mRNA表达与对照组相比,改变不明显。
  结论:1.采用槟榔碱饮水法可快速诱导出Balb/c小鼠典型、稳定的OSF模型,具有较高的成功率,该模型可能为研究OSF发病的机制和治疗手段提供一个平台。
  2.小鼠OSF的血管变化主要以萎缩、减少为主,提示人OSF后期血管增加考虑为OSF恶变可能;小鼠OSF以成熟型的Ⅰ型胶原增加为主,辅以幼稚型的Ⅲ型胶原增加,提示人OSF的形成可能主要由降解胶原不足引起,胶原合成的增加为次要因素。
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