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[期刊论文] 马婷婷 汪虎 田兵 华跃进
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:通过rpoB/Rifr系统研究了Deinococcus geothermalis DSM 11300的自发突变模式。在30℃和50℃分别获得自发突变株并测定其相应温度条件下的突变频率和突变率。结果表明,30℃培养下该菌的自发突变率是50℃培养的2倍,二者有22个不同的突变位点,表明温度影响了该菌的自发突变。此外,50℃培养的细菌SOD和CAT酶活性均强于30℃,其SOD和CAT基因的表达水平也是30℃培养的1.5倍之多。说明D.gethermails在30℃培养时突变率上升与其细胞内抗氧化酶的表达和活性下降相关。...
摘要:RNA聚合酶的β亚基参与与利福平的结合,并在原核生物中高度保守.许多细菌中利福平耐药株的rpoB基因均有氨基酸改变.本实验室曾分离2两株耐辐射球菌(Deinococcusradiodurans)自发突变利福平耐药株(突变为:L420R和1258-66 9-bp缺失).本研究发现,β亚基的变化对生长速度有独特的效果.利用DNA芯片技术和生化分析鉴定耐辐射球菌的利福平突变株如何调控基因表达改变生长速度的分子机制.参与代谢、细胞进程和信号传递以及信息贮存和处理的基因的转录在9 bp缺失突变株中显著改变.9 bp缺失突变株的上调基因的共有启动子序列为富含AT的序列.与野生株相比,L420R和9 bp缺失突变株积聚了更多的活性自由基.这些结果初步探讨了β亚基突变调控基因的表达机制....
[专利] 发明专利 CN201210001376.5
浙江大学 2012-07-11
摘要:本发明提供一种耐辐射奇球菌生产天然类胡萝卜素的方法,通过黄浆水的收集、除杂,pH调整,添加培养物、灭菌,菌种的活化、培养种子,发酵培养,菌体破壁,类胡萝卜素萃取,干品制备获得。本发明利用豆腐等豆制品加工制作过程中副产物黄浆水来培养细菌发酵生产天然类胡萝卜素,实现了黄浆水的废物利用,提高了资源利用效率,并降低了豆制品加工企业对环境造成的污染,有利于保护环境,每升黄浆水发酵液可得类胡萝卜素干品229.8mg,优于常规培养发酵提取方法226.2%。本发明先对菌体细胞进行酸热破壁处理,再用乙醇萃取,提取完全、快速,生产工艺流程简单、生产成本低廉,产品无毒性残留、安全性高。
[博士论文] 汪虎
生物物理学 浙江大学 2012(学位年度)
摘要:耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,简称DR)是一种能够忍受强烈电离辐射、强氧化压力、干旱等极端环境的微生物,它能够在10 kGy以上的辐射条件下生存。但其强大的抗辐射抗氧化性机制还有待阐明。
   EbfC家族是一类有DNA结合能力的核蛋白因子。本文系统地研究了EbfC家族同源基因在DR菌中的作用,结果如下:
   1.通过蛋白质氨基酸的同源性分析,我们预测DR0199基因是一个在耐辐射球菌中编码EbfC同源物的基因。
   2.首次运用同源重组的方法构建了突变株△DR0119。根据UV,电离辐射和H2O2氧化压力下突变株生存率结果表明,DR0119是一个对耐辐射球菌保持极端抗性的重要基因。
   3.应用大肠杆菌表达系统表达了DRO119蛋白,纯化并检测了该蛋白的各种生化活性。应用体内定位方法,进一步证明了耐辐射球菌的EbfC是一个类核蛋白。
   4.探索了△DRO199全基因组转录水平。在DRO199敲除以后,全基因组转录谱中约有7%的基因表达水平发生了2倍以上的改变,如核酸合成途径,抗氧化相关基因和细胞分裂相关基因。
   另外,首次在D.geothermalis中应用SDS-PAGE和shotgun质谱联用的方法鉴定了野生株中的膜蛋白。该部分工作有助于后期研究该菌的耐热耐辐射机制。
   综上,耐辐射球菌中的EbfC基因行使着多项重要的功能,它能够维持耐辐射球菌基因组的稳定性,调控体内基因的表达,是贡献于耐辐射球菌超强修复能力的重要基因。
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