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摘要:为找寻光温敏核不育水稻幼穗与育性调控有关的蛋白质,采用固相pH梯度-SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对光温敏核不育水稻(培矮64S)育性转换期幼穗总蛋白进行了分离,获取凝胶图像并进行重复性分析,通过微量测序-Edman降解方法和原位酶解及 MALDI-TOF质谱的方法鉴定了60个蛋白质点.结果表明:本方法可得取分辨率和重复性较好的凝胶图谱.蛋白质点在2D胶上的重复性为:沿等电聚焦方向偏差为1.49±0.22 mm,沿SDS-PAGE方向偏差为1.24±0.18 mm.37个蛋白质点得到了准确的鉴定结果,其中16个是差异蛋白质点.在不育变化为可育的过程中,明显表达上调的蛋白质点包括几丁质酶,丙酮酸脱氢酶等;明显下调的蛋白质包括超氧化物歧化酶,硝酸还原酶脱辅基酶蛋白等;金属硫蛋白RicMT只在可育中存在.
摘要:目的: 研究虎纹镇痛肽-1(HWAP-1)的致突变性.方法:采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、中国仓鼠肺成纤维细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验研究了虎纹镇痛肽-1的致突变作用.结果:Ames试验结果:HWAP-1的4个剂量组(1 μg/皿~1 000 μg/皿),在活化及非活化条件下诱发TA97、TA98、TA100和TA102菌株的回变菌落数未见明显增加;染色体畸变试验结果:HWAP-1的4个剂量组(263 μg/皿~2 100 μg/ml),在活化及非活化条件下CHL细胞染色体畸变率小于5 %;微核试验结果:HWAP-1在100 μg/皿~460 μg/kg剂量范围内,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显增加.结论:在本试验条件下,HWAP-1无致突变作用.
摘要:采用全身过敏试验和皮肤局部过敏试验研究虎纹镇痛肽的过敏性,并作空白对照和阳性对照实验.结果表明,虎纹镇痛肽不会引起全身过敏反应和皮肤局部过敏反应.
摘要:化学物质的致突变性评价对于预防人类疾病和控制环境污染具有非常重要的意义.为了检测化学物质的致突变性,对化学物质的致突变性评价中常用的一些主要方法及其应用的效果做了概述,并对当前致突变性检测的方法学中存在的问题以及发展趋势进行了简要的讨论.
[硕士论文] 梁海鹰
生物化学与分子生物学 湖南师范大学 2003(学位年度)
摘要:第一部分.光温敏核不育水稻幼穗减数分裂期蛋白质组的初步分析.该文采用固相pH梯度-SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对光温敏核不育水稻(培矮64 S)减数分裂期幼穗总蛋白进行了分离,在增溶样品,设定合适的电泳参数,选择适当的SDS-PAGE的凝胶浓度等电泳条件下,获得了分辨率和重复性较好的凝胶图谱.PDQUEST 2-D胶图象分析软件可识别约1000个蛋白质点.第二部分.虎纹镇痛肽的特殊毒理学研究.虎纹镇痛肽系从中国虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化的一种多肽类神经毒素.该毒素能可逆地阻断小鼠膈神经-膈肌的神经传导,作用位点在突触前膜.通过膜片钳技术进行药理学研究表明,HWAP-Ⅰ是一种N-型电压门控钙离子通道阻断剂,具有较好的镇痛作用.为了检测和了解虎纹镇痛肽的致突变性和过敏性,我们根据新药临床前研究指导原则的要求进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验、小鼠骨髓微核试验和过敏性试验.实验结果表明:无论有无活化系统S9混合液,不同浓度的HWAP-Ⅰ对TA97、TA98、TA100和TA102均不引起自发回变菌落数的显著增加;四个剂量的虎纹镇痛肽对CHL细胞染色体的畸变均为阴性,对CHL细胞无致畸作用;虎纹镇痛肽的剂量组与阴性对照相比,小鼠骨髓PCE的微核率变化无显著性意义,三个试验组间亦无显著性差异;虎纹镇痛肽涂豚鼠皮肤不引起皮肤红斑,也不引起水肿,无皮肤过敏反应;虎纹镇痛肽豚鼠全身给药无抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克等过敏反应症状.因此,虎纹镇痛肽无致突变作用,也不引起过敏反应.
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