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[专利] 发明专利 CN201910741691.3
东南大学 2019-11-26
摘要:本发明涉及可实时、动态观察纤维素酶时空定位和分泌的里氏木霉重组荧光菌株,本发明涉及基因工程及生物技术领域,以里氏木霉RUT‑C30为出发菌株成功构建了里氏木霉工程菌株RBGL、RCBH和RCMC,分别表达红色荧光蛋白DsRed标记的纤维素酶BGL、CBH和CMC;本发明首次以直观、动态方式可视化了活体里氏木霉中纤维素酶的时空分布和分泌情况,为揭示里氏木霉中纤维素酶的分泌途径提供了新的研究手段;荧光结果表明,重组菌株中BGL、CBH和CMC定位于真菌整个菌丝体中,并在液泡和细胞膜、细胞壁积累。
[专利] 发明专利 CN201811230759.3
东南大学 2019-03-19
摘要:本发明公开了一株组成型高产Sorbicillinoids里氏木霉基因工程菌及其制备方法和应用,该里氏木霉基因工程菌,其分类命名为丛梗孢目(Moniliales)木霉属(Penicillium)丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei),菌株号ZC121,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2018385,保藏日期为2018年06月20日。该菌株ZC121是在里氏木霉Rut‑C30中敲除基因121121发生脱靶效应得到,可用于生产大量Sorbicillinoids。
[专利] 发明专利 CN201810054101.5
东南大学 2018-10-12
摘要:本发明提供了一种碳荧光量子点在抑制大肠杆菌生物膜形成中的应用,所述碳荧光量子点具有优异的抗生物膜活性,同时对正常细胞无毒性;为食品、医药用品以及食品、医药加工环境中有效杀灭大肠杆菌生物膜提供了有效途径。
[专利] 发明专利 CN201810283761.0
东南大学 2018-10-09
摘要:本发明公开了一种用于光动力抗菌的EPS‑RB纳米颗粒的合成方法,以植物乳杆菌胞外多糖EPS、玫瑰红RB、1‑(3‑二甲基氨基丙基)‑3‑乙基碳化二亚胺盐酸盐EDC‑HCl和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS为原料,在二甲基亚砜DMSO中反应获得复合物EPS‑RB;复合物EPS‑RB在水溶液中自组装形成球形纳米颗粒,并具有优良的光动力抗菌效果。该复合物在溶液中可以自聚集形成纳米颗粒。该纳米颗粒在光照条件下产生高于游离RB的单线态氧,使其对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的光动力抗菌优于游离RB。EPS‑RB纳米颗粒完全杀死大肠杆菌和金黄色葡萄球菌所需浓度为分别为8μM和500nM,而游离RB则分别需要16μM和1000nM。
[专利] 发明专利 CN201710418240.7
东南大学 2017-12-01
摘要:本发明属于生物技术与纳米材料领域。本发明提供了一种碳量子点的制备方法及其在生物膜成像上的应用。以植物乳杆菌发酵液为原料,利用水热反应一步制备出碳量子点。该碳量子点制备工艺简单、成本较低、绿色环保且易于实现。所制备碳量子点量子产率可达12%,具有较强的光稳定性、良好的水溶性等优点,并可用于生物膜微生物成像。相比于已商业化的生物膜微生物染料,该碳量子点的生物膜微生物成像过程,具有无需避光、孵育时间短、免清洗、可长时间成像观察和不破坏生物膜的优势,并且可同时进行红色和绿色双通道成像。
[专利] 发明专利 CN201710417943.8
东南大学 2017-10-13
摘要:本发明公开了一种利用植物乳杆菌发酵获得的胞外多糖合成贵金属纳米颗粒的方法。以植物乳杆菌胞外多糖和贵金属溶液为原料,反应获得贵金属纳米颗粒。所合成贵金属纳米颗粒粒径均一,分散性好。此外,该方法反应时间短,能耗低,无需添加任何化学试剂,实现了贵金属纳米颗粒的绿色合成。
[专利] 发明专利 CN201710024825.0
东南大学 2017-08-04
摘要:本发明涉及基因工程及微生物发酵领域,公开了一株在可溶性和不可溶性碳源诱导下高产纤维素酶的里氏木霉基因工程菌SEU‑7,其分类命名为Trichoderma reesei,菌株号SEU‑7,已保藏于中国典型微生物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2016492,保藏日期为2016年9月18日。本发明还公开了该基因工程菌的构建方法及其在不同碳源诱导下生产纤维素酶的应用。与现有技术相比,本发明利用同源重组技术构建了高产纤维素酶的里氏木霉基因工程菌,其在可溶性碳源和非可溶性碳源的诱导下,均表现出极高的产纤维素酶的能力。同时,本发明所产纤维素酶液表现出了比Rut‑C30的纤维素酶液更好的糖化能力。
[专利] 发明专利 CN201710025113.0
东南大学 2017-08-18
摘要:本发明公开了一株产胞外多糖的植物乳杆菌,其分类命名为Lactobacillus plantarum,菌株号为LCC‑605,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC M 2016491,保藏日期为2016年9月18号。与现有菌株相比,本发明的植物乳杆菌LCC‑605所产胞外多糖首次发现能自组装形成纳米颗粒,且吸附重金属与亚甲基蓝能力最强,对亚甲基蓝、Pb2+、Cd2+和Cu2+的吸附量分别为3029mg/g、1513mg/g、2097mg/g和2987mg/g,可用于生物修复以治理环境中的重金属和染料污染,具有环境友好性和可持续发展性。
[专利] 发明专利 CN201610288756.X
东南大学 2016-08-17
摘要:本发明公开了一种高产纤维素酶里氏木霉工程菌,它是将里氏木霉Rut‑C30的bgl1基因采用单酶切同源重组的方法导入里氏木霉Rut‑C30中获得。本发明还公开了前述高产纤维素酶里氏木霉工程菌的构建方法和应用。与现有技术相比,本发明中工程菌产生的胞外β‑葡萄糖苷酶相对于出发菌株Rut‑C30提高了17.3倍,同时,内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶、滤纸酶活和蛋白质含量也得到了提高。此外,该菌株表现出较强的葡萄糖耐受能力和更好的糖化能力。
[博士论文] 李程程
生物医学工程 东南大学 2018(学位年度)
摘要:里氏木霉(Trichoderma reesei)因其蛋白分泌量大(100 g/L)、遗传性状稳定、生长繁殖迅速、培养条件简单和生物安全性等特点,已被广泛用于工业生产及各种异源蛋白的表达载体。并且,该菌在特定条件下可以产生大量的具有抗癌、抗病毒、抗菌特性的次级代谢产物黄色色素类物质,具有广泛的商业价值,次级代谢产物黄色色素的产生对纤维素酶的产生有一定的影响,二者受到相关调节因子的调控。同时,里氏木霉多个菌株的全基因组测序已经完成,这为研究里氏木霉纤维素酶、色素类物质的高产机制以及二者之间的相关性奠定了基础,也为基因改造获得具有优良特性的高产菌株提供了辅助手段。
  本论文主要以里氏木霉RUT-C30为出发菌株通过基因工程改造获得了在纤维素诱导条件下高产纤维素酶的基因工程菌TRB1、在纤维素和乳糖诱导下都能高产纤维素酶的里氏木霉基因工程菌SEU-7以及高产色素的基因工程菌ZC121121,并针对以上构建的基因工程菌研究了纤维素酶的高产机制、里氏木霉纤维素酶和色素产生之间的相互转化机制。之后,我们采用荧光标记的办法对里氏木霉三种主要的纤维素酶进行标记以研究纤维素酶的真实分布情况以及分泌机制。最后采用转录组测序及基因干扰等手段对纤维素酶的产生及其和色素产生的转化关系进行了深入研究。具体说来主要包含以下内容:
  1.构建了高产pNPGase/BGL(β-葡萄糖苷酶)的基因工程菌TRB1,并揭示了基因cel3d在纤维素酶高产中的作用及机理
  以里氏木霉RUT-C30为出发菌株,采用农杆菌介导的方法构建了高产β-葡萄糖苷酶的基因工程菌TRB1。qRT-PCR以及基因克隆实验显示TRB1中cel3d基因受到了干扰,是纤维素酶增加的原因之一。
  2.构建了乳糖诱导下高产纤维素酶的基因工程菌SEU-7并研究其高产机制
  首次构建了一株可以在乳糖诱导下高产纤维素酶的基因工程菌SEU-7。与出发菌株RUT-C30相比,SEU-7的纤维素酶和半纤维素酶活性无论在纤维素还是在乳糖诱导条件下都大幅度提高。以乳糖作为诱导物,在分批培养条件下,FPase(滤纸酶活)活性可以达到13 IU/mL;分批补料培养时,活性提高至47 IU/mL,此外,在分批培养过程中,SEU-7在纤维素和乳糖诱导条件下均表现出了极高的pNPGase活性,分别为81和144 IU/mL,是目前已知菌株中最高的。之后采用qRT-PCR、qPCR以及基因组重测序分析研究了其在不同碳源下的高产机理。
  3.敲除基因121121过程中引起的并行突变在里氏木霉纤维素酶和黄色色素产生中的开关作用
  通过构建基因121121干扰的基因工程菌及过表达121121的菌株,揭示了基因121121以及干扰该基因带来的并行突变在纤维素酶产生和黄色色素类物质sorbicillin分泌过程的开关作用,即,干扰121121以及带来的并行突变会降低纤维素酶产量但极大程度增加黄色色素sorbicillin的产量,并对该基因工程菌进行了RNA-seq分析。同时采用液质联用(HPLC-MS)的方法检测了敲除菌株ZC121121和过表达菌株OE121121的代谢产物。
  4.里氏木霉纤维素酶的产生、分布以及分泌机制研究
  采用红色荧光蛋白对三种主要的纤维素酶BGL、CMC/CMCase(内切葡聚糖酶)和CBH/pNPCase(外切葡聚糖酶)进行了标记,研究了三种纤维素酶产生的先后顺序、在细胞内的分布情况以及分泌情况,结果发现BGL在菌丝体内表达量最多,而后是CMC和CBH,然而,BGL的分泌却晚于CMC和CBH。共聚焦观察结果表明BGL和CBH是定位到细胞膜上的,而CMC没有定位到膜上,GC-Cholesterol-PEG-FITC共染、原生质体制备以及超高分辨结果更进一步的证明了BGL定位到了细胞膜上。通过进一步的内质网共染实验证明了三种主要的纤维素酶都会被输送到内质网进行加工修饰,并且三种酶都存在于囊泡中,高尔基体共染实验证明BGL和CMC都要经过高尔基体分泌到胞外,而CBH则可能不通过或少量通过高尔基体分泌。
[专利] 发明专利 CN201510925121.1
东南大学 2016-04-13
摘要:本发明公开了一种多感知生胶叠片机器人装置,该装置包括缓冲机构、切割机构、叠片机构、装载机构和支架,缓冲机构布设在支架的一端,切割机构、叠片机构和装载机构布设在支架的另一端,且切割机构、叠片机构和装载机构从上向下依次布设。该装置可以实现自动化叠片,并提高了叠片效率和质量。
[专利] 发明专利 CN201510334938.1
东南大学 2015-09-16
摘要:本发明公开了一种基于旋钮式力反馈手控器,包括底板、扭矩传感器、外壳、传感器法兰、距离套、编码器、电机座板、电机、设有精粗调开关的开关旋钮,外壳和底板固定连接,形成密闭空间;距离套固定连接在电机座板和传感器法兰之间,电机座板和传感器法兰之间形成安装空间,扭矩传感器固定连接在传感器法兰的底面,编码器位于安装空间中,且编码器的壳体固定连接在电机座板的底面,电机固定连接在电机座板的顶面,且电机输出轴的一端穿过电机座板,与编码器的码盘固定连接;开关旋钮位于外壳的外侧,且开关旋钮的旋钮与电机输出轴的另一端连接。该基于旋钮式力反馈手控器及机械臂遥操作控制方法,能精确控制机械臂在复杂环境下作业。
[专利] 发明专利 CN201510920943.0
东南大学 2016-02-24
摘要:本发明公开了一种异构式机器人手控器四自由度手部转动装置,该手部转动装置包括第一转动件、第二转动件、第三转动件、第四转动组件、第一支架、第二支架、第三支架、第一带轮和第二带轮;第一转动件的转轴穿过第一支架,与第一带轮固定连接,第二支架与第二带轮通过转轴连接,且该转轴穿过第一支架,第一带轮和第二带轮位于第一支架的同侧,且第一带轮和第二带轮通过皮带连接;第二转动件的两端穿过第二支架相对的两侧;第二转动件连接在第二支架上;第二转动件上套装有轴套,轴套固定连接在第二转动件上;第三转动件连接在轴套上,第三支架与第三转动件固定连接;第四转动组件连接在第三支架上。该装置可以提高手控器测量精度。
[硕士论文] 李程程
仪器科学与技术 东南大学 2016(学位年度)
摘要:随着人工智能化和生产工业化发展,工业机器人和康复医疗机器人越来越普及,机械臂作为主要的执行机构,对重量、负载能力、灵活性,仿人运动,规避障碍,完成复杂任务等方面提出了更高的要求,因此七自由度机械臂控制系统的设计与研究成为该领域重要的研究方向。本文结合实验室的机械臂项目,研制七自由度机械臂控制系统平台,实现对七自由度机械臂的运动控制和路径规划。
  针对本文所研制的七自由度机械臂,设计一种基于CAN总线通讯的控制系统。通过Denavit-Hartenberg参数法构建机械臂的数学模型,推导正运动学公式,设计基于牛顿迭代法的逆解算法,解决逆运动学的数值解法多解性问题,获取最优解。在此基础上,在关节空间设计了三次插值和五次插值算法进行路径规划,实现对机械臂的点到点的运动控制;在笛卡尔空间,设计空间直线轨迹和空间圆弧轨迹规划算法,实现机械臂直线和圆弧运动。设计机械臂控制系统的硬件框架,包括微处理器系统电路和传感器模块电路设计、通讯总线与各元器件的选型。编写机械臂控制软件,包括PID控制器、人机交互软件和下位机角度获取模块程序,制定系统通信协议,实现用户对机械臂的各种操作和设置。
  为验证七自由度机械臂控制系统的性能满足设计要求,进行试验,第一,验证基于牛顿迭代法的逆解算法的准确性,对机械臂逆解结果进行分析测试。第二,在机械臂安装过程中,需要对安装的部件进行测试,以确保安装部件可以正常工作,当单个关节安装完毕时也需要进行测试,保证每安装新的关节之前系统是正常的。第三,对机械臂各关节尺寸进行标定实验,计算机械臂建模所需要的关节参数,为后续的误差优化处理做准备。第四,实现用户通过软件准确地控制机械臂,对系统的通讯进行测试,计算总线负载率,保证各关节可以正常通讯;对控制界面的各功能测试,保证每个按键实现其对应功能。第五,系统测试保证机械臂可以完成用户指定动作,设计多种动作,测试机械臂是否可以完成指定动作。第六,测试机械臂的精度和误差,设计机械臂运动路径点的坐标,测量实际坐标系所经过点的坐标,分析计算误差。
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