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摘要:为了探讨牛源产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)分离株在毒力基因分布和遗传进化方面与人源EHEC O157菌株之间的关系,本试验选择收集来自江苏某奶牛场的STEC菌株18株以及人源、羊源、猪源、禽源STEC参考菌株9株,参照美国疾病预防控制中心PulseNet推荐的方法,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成脉冲肠凝胶电泳(PFGE)分型和聚类分析;同时对部分STEC菌株进行毒力基因检测.结果表明,经毒力基因检测,不同来源的O157菌株毒力基因分布不尽相同,其中牛源STEC O157与参考株EHEC O157∶H7(EDL933W)的基因排谱最为相近;牛源STEC O18和O26的基因排谱与参考株EHEC O157∶H7(EDL933W)类似,但存在部分基因的缺失.对27株不同来源的STEC分离株进行PFGE,产生了22种不同的酶切图谱.总体来看,不同来源的STEC Dice相似性系数在72%~100%之间.牛源O157分离株与猪源及禽源O157菌株的相似度偏低,而与两株人源O157分离株的相似度偏高,Dice相似性系数在83%~95%之间,牛源O26(克隆群Ⅶ、Ⅷ)与人源O157的相似性系数>82%.显然,从牛群中分离到的部分STEC菌株与人源EHEC O157具有较近的遗传进化关系....
摘要:将从临床采集的发病鸡组织处理后经绒毛尿囊膜接种7日胚龄SPF鸡胚,通过PCR方法对鸡胚培养物进行鉴定,确定分离到4株Ⅰ群禽腺病毒.结合免疫学试验、病理学试验以及动物回归试验对病毒进行特性研究,结果表明分离的病毒均能致鸡死亡并表现出临床症状.使用针对Ⅰ群禽腺病毒Hexon基因的特异性引物对病毒进行基因测序分析发现,分离株均属于基因C型血清4型禽腺病毒....
摘要:两情相悦是现代社会建立婚姻关系的基础,但在古代,则不仅如此,它更体现的是一种流于表象的婚姻形式,于家族而言,婚姻缔结的主要目的是传宗接代,绵延子嗣.在此观念下,就出现了仅代表家长意志的媒妁.本文主要以全新的法文化为视角,从制度层面和价值层面分析我国古代媒妁制度的成因.从中更真实的了解中国古代媒妁....
摘要:随着社会生活的不断发展,多企业多领域的发展是我国市场经济的现状.与此同时,对调节市场失灵起到关键作用的行政监管就面临不可推卸的责任.本文从我国行政监管的研究现状入手,主要包括对监管概念、主体的研究,通过列举我国行政监管存在的主要问题,针对性的提出改进的可行性对策,以供参考....
[硕士论文] 李甜甜
法律硕士(非法学) 扬州大学 2019(学位年度)
[专利] 发明专利 CN201810753407.X
扬州优邦生物药品有限公司 扬州大学 2018-09-14
摘要:本发明提供了一种小鹅瘟—重组新城疫二联灭活疫苗及其制备方法。所述制备方法包括:1)健康易感染鹅、鸡胚的筛选;2)生产用毒液的制备;3)两种毒液效价的测定、浓缩、灭活、配比、制苗及分装。本发明制备的小鹅瘟—新城疫二联灭活疫苗通过免疫种鹅,使种鹅在产蛋期内血清、种蛋卵黄小鹅瘟、新城疫特异性抗体均处于较高水平,所孵化雏鹅出雏后能通过吸收卵黄产生良好的被动免疫保护效果。本疫苗具有安全性高、免疫效果好、副作用小等优点。
[专利] 发明专利 CN201510121567.9
扬州大学 2015-05-27
摘要:本发明涉及一种非O157产志贺毒素大肠杆菌的高效检测方法。该方法包括样品的采集、样品的前增菌、二重PCR的鉴定、非O157STEC分离、多重PCR鉴定以及O抗原、H抗原的测定步骤。本发明大大提高了前增菌的初筛率,并且大大减少了检测时间,简化了繁琐的操作步骤,节省了大量的人力物力,同时减少了因繁琐操作带来的人为因素而造成的偏差。
摘要:从江苏某猪场病猪中分离到一株病原菌,通过纯化、生化鉴定以及16SrDNA序列分析技术鉴定,结果表明,该分离株是奇异变形杆菌.奇异变形杆菌病已成为危害我国养猪业的一种新的细菌性传染病,并且还可引起人类的原发性或继发性感染,造成人类食物中毒,其作为人畜共患传染病病原,应引起高度重视...
摘要:禽霍乱又叫禽巴氏杆菌病、禽出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起的家禽急性败血性传染病.急性型以严重下痢、发病急、病程短、死亡快为主要特征,发病率和死亡率高;慢性型则发生肉髯水肿和关节炎,发病率和死亡率低.该病能感染所有家禽,分布广泛,给家禽生产带来很大的危害....
[硕士论文] 李甜甜
预防兽医学 扬州大学 2013(学位年度)
摘要:目前,产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)引起的暴发流行和散发病例在世界范围内时有报道,已成为严重的公共卫生问题。STEC不仅能引起人类腹泻,还可引起严重的出血性肠炎(hemorrhagic colitis,HC)和溶血性尿毒症(haemolytic uraemic syndrome,HUS)。尤其是肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhageEscherichia coli,EHEC)O157∶H7菌株在报道的感染中占主导地位,目前非O157 STEC感染的病例也在增加。
  近年来,EHEC O157∶H7毒力基因的结构、功能及其调节基因的作用研究取得了突破性进展。已经完成了四个O157∶H7分离株的全基因组测序工作。其中EDL933W为标准强毒株,包含主要毒力基因:染色体上原噬菌体编码的志贺毒素基因(stx)、LEE致病岛上决定A/E表型的基因(eaeA)和质粒编码的肠溶血素基因(hlyA)。志贺毒素,是STEC最重要的毒力因子,是造成人类HC和HUS的主要原因,包含Stx1和Stx2两个亚型,其编码基因由噬菌体分别插入到基因组内的不同位置。O157∶H7 EDL933W标准株同时含有这两个亚型的毒素,而本实验室分离的强毒株STEC O157∶H785m-1-2缺少Stx1亚型,仅含有Stx2亚型。
  本研究通过对分离株85m-1-2的VT1噬菌体基因进行了初步分析,发现该分离株含有VT1噬菌体,且其插入位点与Nurmohammad等报道的大多数STEC O157∶H7菌株相同,存在于yehV基因内部;且噬菌体左右两端与基因组连接处的基因序列与GenBank中已公布的相应基因序列高度同源。通过对该噬菌体基因内stx1基因所在位置的上下游基因进行扩增,发现stx1基因为单独缺失,其上下游基因保持完整,且与EDL933株基因组内相应基因具有较高的同源性。
  eaeA、stx2和hlyA基因是STEC致病的主要毒力基因,其致病作用在stx1+/stx2+E.coliO157∶H7株中研究较多,但在stx1-/stx2+E.coli O157∶H7中的致病作用尚未见报道。本文运用同源重组方法成功地构建了这三个基因的单突变株85mΔeaeA、85mΔstx2、85mΔhlyA和三突变株85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA。将含stx2完整阅读框及其上下游启动子的质粒pGEX-6P-1-stx2电转化突变株85mΔstx2和85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA,获得回复株Re85mΔstx2和Re85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA。RT-PCR结果表明,各基因突变株的缺失只影响突变基因本身的转录,其上下游基因并未受到影响。
  对野生株、突变株和回复株生物学特性进行了研究。生长曲线测定结果显示,各突变株的生长速度与野生株85m-1-2没有明显差异;Hep-2细胞粘附试验结果显示,野生株85m-1-2对该细胞成大量弥散型粘附,突变株85mΔeaeA和85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA对细胞仍有粘附作用,但粘附能力减弱,呈散在局灶性粘附;Vero细胞毒性试验结果显示,野生株和回复株的菌液上清在作用24 h内即可使Veto产生病变,使之变圆、脱落,而突变株85mΔstx2和85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA的菌液上清完全丧失对Veto细胞的毒性作用;溶血性试验表明,野生株在5%的绵羊血平板上会形成明显的溶血圈,而突变株85mΔhlyA和85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA不能;小鼠致死性试验结果显示,分离株85m-1-2(80%)的致死率略低于EDL933(90%),且死亡高峰稍有滞后,突变株85mΔeaeA的致死率(80%)同野生株一样,但小鼠死亡高峰出现明显滞后现象,突变株85mΔhlyA的致死率为70%,而两个回复突变株Re85mΔstx2和Re85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA的致死率均为100%,突变株85mΔstx2接种小鼠未见死亡,三基因突变株接种小鼠85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA仅死亡一只。攻毒后小鼠排菌动态监测结果显示,野生株85m-1-2和EDL933组的小鼠排菌时间均可持续2周左右,突变株85mΔstx2为11d,85mΔhlyA为12d,85mΔeaeA和85mΔeaeAΔstx2ΔhlyA只能持续7d。组织学病理变化结果显示,只有野生株85m-1-2组和EDL933对照组小鼠的组织器官有明显的病变,而突变组小鼠病变不明显。分离株85m-1-2组和EDL933对照组的小鼠都有明显的肾组织病变,预示着分离株85m-1-2可能与人类发生HUS有关,其对人的致病性有待进一步研究。
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