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[期刊论文] 李燕 冯建军
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CSSCI 北大核心
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摘要:主体间性教育把教育过程看作是主体间的交往实践过程,它把师生间的交流、对话、感染作为教育教学活动发生发展的基本形式.学生提问与教师理答是教育对话中的关键,有效实施主体间性视角下的学生提问与教师理答,才能真正提高教育对话的质量.教师要在充分尊重学生主体地位的基础上,构建民主、平等的师生交往,更好地发挥教育过程中的主体间性,提高教育教学活动的质量和效果,使师生共享教学,实现精神共生....
摘要:为了研究硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因的乳酸菌表达载体pLEB590-SQR的构建及其在乳酸乳球菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切载体pLEB590与目的片段SQR,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过电转化法转化到乳酸菌中,提取所得到的乳酸乳球菌质粒pLEB590-SQR进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸乳球菌MG1363中,在含有Nisin(乳酸链球菌素)的选择培养基中筛选阳性克隆,采用SDS-PAGE电泳和Western杂交检测SQR蛋白质的表达情况.最后检测重组质粒在MG1363中的遗传稳定性.结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pLEB590-SQR构建成功,从MG1363中成功检测到目的蛋白质SQR的表达,携带pLEB590-SQR的MG1363遗传稳定性达90%以上.乳酸乳球菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)....
摘要:乳酸菌转化效率不高是制约其广泛应用的关键因素.为建立乳酸乳球菌的高效电转化方法,主要从电压、电阻、细菌生长时期及电击缓冲液等影响电转化的因素人手,根据每微克DNA获得的转化子的多少,评价乳酸乳球菌的电转化效率.结果显示:当电压为2.0 kV、电阻为400Ω、细菌处于对数生长中期、电击缓冲液为磷酸缓冲液时,电击乳酸乳球菌MG1363的转化效率最高,为1300个/μg.表明通过优化电转化参数,可以提高乳酸乳球菌的转化效率,为拓展乳酸乳球菌的应用范围奠定基础....
摘要:小鼠肠上皮细胞(IEC)是一种快速更新的细胞,脂质体转染法是哺乳动物细胞转基因常用的转染方法.以IEC为研究对象,从转染前后细胞形态、细胞周期及染色体倍性等方面的变化研究脂质体转染对IEC的影响.结果显示,脂质体转染后形态不正常的细胞增多;细胞周期中G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),以3代的细胞转染为例,由对照的62.4%增加到73.4%;S期同转染前相比显著降低(P<0.05),由20.4%降低至13.2%;然而从染色体倍性看,统计分析表明转染前后没有显著差异.从以上几个方面可以看出,脂质体转染对IEC产生了一定的负面影响....
[期刊论文] 李兆富 刘红玉 李燕
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:HSPF(HydrologicalSimulationProgram-Fortran)模型采用FORTRAN语言编写,以Stanford水文模型为基础,能够综合模拟径流、土壤流失、污染物传输、河道水力等过程,并大量应用于气候变化与土地利用变化的流域水环境效应情景模拟.该模型是半分布式水文水质模型的优秀代表,在国外得到广泛的应用.HSPF模型包括PERLND、IMPLND与RCHRES等3个主要模块,分别实现对透水地段、不透水地段与地表水体的水文水质模拟.总体来看,HSPF模型在国外水文、水质过程模拟,以及涉及气候变化和土地利用影响的情景分析中发挥重要作用,但是国内该模型的应用非常有限.HSPF模型存在的主要问题包括:①模型中某些方案和算法还有改进和完善的空间;②模型对数据输入要求较高,模拟的精度受到空间和属性等数据的限制;③模型只限于均匀混合的河流、水库和一维水体模拟,对于复杂流域或水体的模拟研究,需要与其它模型整合以解决更加综合的问题.目前,针对发展与完善HSPF模型的研究仍在继续,包括模型平台开发、模型功能扩展、模型校正方法研究、参数敏感性研究等方面.随着我国基础数据的积累及共享程度的提高,HSPF模型在我国的应用也将更加广泛....
摘要:为了研究硫化物-醌氧化还原酶( SQR)基因的乳酸菌表达载体pMG36e-SQR-Myc的构建及其在大肠杆菌DH5a和乳酸菌MG1363中的表达,通过限制性内切酶酶切大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pMG36e与目的片段SQR-Myc,回收纯化并用T4连接酶进行连接,连接产物通过KCM法转化到大肠杆菌DH5a中,提取所得到阳性大肠杆菌菌株质粒pMG36e-SQR-Myc进行双酶切鉴定与普通PCR鉴定;并通过电转化将重组质粒导入乳酸菌MG1363中,采用SDS-PAGE电泳和Western-blotting检测SQR蛋白质在其中的表达情况.结果显示,SQR乳酸菌重组表达载体pMG36e-SQR-Myc被成功构建,目的蛋白质SQR在大肠杆菌和乳酸菌MG1363中被成功检测到.因此,乳酸菌MG1363可以用来表达硫化物-醌氧化还原酶(SQR)....
[期刊论文] 李燕
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北大核心
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摘要:2006年国产片在产业环境中努力拓展,涌现出了一大批无论是艺术质量还是商业素质都相当优秀的类型片.本文选取2006年电影市场中颇为成功的古装武侠片、黑色喜剧、主旋律影片、艺术电影等类型加以分析,从中管窥国产类型电影的艺术特色及其发展历程....
[期刊论文] 李燕
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北大核心
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摘要:近期上映的几部影片不约而同地把目光对准了女性,本文在对影片进行女性主义解读的同时,将关注点落在女性的情欲表达问题上,剖析中国男性导演眼中的女性和中国女性自身所表现出来的情欲压抑.本文也正是要为女性在情欲方面的沉默发出一声轻微的叹息....
摘要:英语是外来文化的载体,文化环境影响着语言的发展,语言和文化属于密不可分的关系,外语学习并不是单纯的语言学习,还要注重英语文化内涵及英语语言素养的培养及学习.英语教学应让学生们了解英语的学科特点,培养学生的英语思维能力,通过典型的单词、词语及句式的积累对学生们进行听、说、读及写的训练,提高学生的基本语言素养,使得学习不止存在于理解层次,更存在于欣赏及感受层面....
摘要:提高学生的英语写作能力是中学英语教学的一项重要任务,也是中学英语教学的一个难点。本文将结合笔者自己的教学实践谈几点思考和认识,以期为同行提供一些参考。...
[期刊论文] 李燕
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CSTPCD CSSCI 北大核心
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摘要:主体间性视域下的文本解读,表现为主体与主体之间的体验和对话.将哲学视域下的主体间性理论,引入文本解读的运行机制之中,认为主体间性下的文本解读具有体验的亲历性、对话的多重性和视域的融合性等特征,并提出在具体阅读教学中以直觉式文本解读为切入点,开展对话性文本解读,达到文章创造性与规定性统一的文本解读....
摘要:英语教学是一个复杂而漫长的过程,教师不仅要根据新课改的要求,做到以生为本、创新教学,同时还要坚持教师在英语教学课堂中的主导地位,积极地进行引导教学、组织教学,充分利用现有的教学资源,营造良好的教学氛围,全面提高英语的教学质量和有效性,进而使学生的英语学习水平有所提高,使英语教学的课堂有所发展。本文对英语教学有效性缺失的原因进行了分析,并提出了相应的解决对策。...
摘要:新课程改革实施以后,初中英语的教学目的发生了明显的变化,以知识目标为主的教学模式已经被能力目标所取代。培养学生的学习兴趣,树立学生的学习信心,提高学生的学习能力则是现代英语所追求的首要目标。学习英语,不是简单的记忆几个单词,而是要让学生能够学以致用,能够在现实生活中进行交际。所以教师在教学过程中,要把口语交际作为主要的教学内容,让每一位学生都能大声地用英语交谈,让学生们流利的英语口语回荡在课堂之上。...
[期刊论文] 李燕 冯建军
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2016年 5期
摘要:主体间性教育把教育过程看作是主体间的交往实践过程,它把师生间的交流、对话、感染作为教育教学活动发生发展的基本形式。学生提问与教师理答是教育对话中的关键,有效实施主体间性视角下的学生提问与教师理答,才能真正提高教育对话的质量。教师要在充分尊重学生主体地位的基础上,构建民主、平等的师生交僖,更好地发挥教育过程中的主体间性,提高教育教学活动的质量和效果,使师生共享教学,实现精神共生。...
[硕士论文] 李燕
生物学;生物技术 南京师范大学 2018(学位年度)
摘要:线粒体通过氧化磷酸化产生能量,并且通过呼吸链复合体电子传递链产生ATP。线粒体是一种半自主性细胞器,拥有自身的基因组。在粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中,线粒体基因组(mtDNA)的表达对线粒体功能的发挥至关重要,并且线粒体基因组编码氧化磷酸化复合物的7个关键亚基。
  Mtf2蛋白(系统名:SPAC5D6.12)在芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)中存在同源蛋白Nam1。已有文献报道,Nam1是一个定位于线粒体基质的蛋白,参与线粒体基因组编码的COX1,CYTB1以及ATP6的mRNA加工与稳定,Nam1对于COX1和CYTB内含子的剪接也是必要的,并且Nam1对线粒体基因组编码的蛋白合成的影响是全局的。
  通过实验室成员的前期实验,我们发现△mtf2菌株在非发酵型培养基上的生长受到强烈的抑制,由此我们推测mtf2基因与线粒体功能密切相关。在本论文中,我们主要研究了Mtf2蛋白在线粒体中发挥的具体功能。首先,我们发现Mtf2蛋白定位于线粒体基质,是一个可溶性蛋白。其次,通过qRT-PCR以及Northern blot实验,在含有线粒体内含子的背景下,敲除mtf2导致cox1mRNA水平显著性下降,并且引起cob1的mRNA的累积量明显减少,说明Mtf2蛋白对于cox1和cob1mRNA的累积是必不可少的。在不含有线粒体内含子的背景下,敲除mtf2不影响cox1和cob1的mRNA水平,但仍然强烈影响Cox1的合成,说明Mtf2蛋白对Cox1蛋白合成至关重要,是Cox1蛋白翻译的激活因子。最后,通过western blot实验分析,我们发现在不含有线粒体内含子的背景下,mtf2缺失菌株中几乎检测不到Cox1和Cox3蛋白,Cob1和Cox2的蛋白稳态水平也是显著性的降低,而核基因编码的蛋白Cox4稳态水平只有轻微的下降,说明mtf2缺失导致组成线粒体呼吸链上的复合体不能正常组装,最终导致线粒体功能受损。我们推测,在含有线粒体内含子的背景下,mtf2缺失对mtDNA中内含子剪接的影响可能是由于Cox1蛋白合成受损导致不能正常合成cox1内含子编码的成熟酶。
摘要:辛格小说中的宗教思想虽然已引起评论界的关注,但是大部分批评者仅就辛格小说中反映出的信仰上帝的一面进行分析,很少言及他的短篇小说中所反映出的宗教思想的矛盾性,或者即使谈到了辛格宗教思想的复杂性,很少看到其宗教思想在斗争中发展的一面.本文主要就辛格的六篇短篇小说来指出他宗教思想的多面性及其在相互否定的过程中不断前进的一面....
[期刊论文] 李燕
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2006年 11期
摘要:<正>一部无明星、低成本的国产电影获得了票房奇迹,媒体、影评人为《疯狂的石头》(以下简称《石头》)疯狂俨然已成为一个现象。尽管这部片子的意义极其有限,电影语言看着也是那么眼熟,但一点也没有影响它的“好口碑”、“好票房”。究竟是什么成就了宁浩,成就了《石头》的疯狂?笔者认为根本原因在于电影满足了观众娱乐的潜意识观念。“在最基本的层面上,任何能够刺激、激励或者激发一种快乐消遣的东西都能被称为娱乐。”人们常用工作和劳动的...
摘要:诺内特和塞尔玆尼克以改革法制为目的,设定了一个适合社会变革需要的规范性的理想模型.他们采用发展模式的概念分析了压制型法、自治型法和回应型法的特征及其间的进化关系.文章借助于这些模型来重新认识宪法在其司法适用问题中的性质....
[硕士论文] 李燕
学科教学(语文) 南京师范大学 2014(学位年度)
[硕士论文] 李燕
生物学;发育生物学 南京师范大学 2013(学位年度)
摘要:采用胚胎体外生产技术,可以有效地利用屠宰场废弃的动物卵巢,大量廉价地在实验室生产胚胎,这对加速我国家畜良种繁殖具有重要的现实意义。但目前猪卵母细胞体外成熟和胚胎体外生产效率还比较低。GDF9作为一种重要的卵源旁分泌因子,具有促进卵泡向雌性生殖方向发育,从而提高卵母细胞发育能力的作用。本研究通过向猪卵母细胞体外成熟培养液中单独添加GDF9和抗GDF9抗体,从正反两方面来探究GDF9对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的生物学作用,为猪胚胎的体外生产奠定理论基础。主要实验内容如下:
  第一部分GDF9对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响
  采集屠宰场废弃的猪卵巢,收集COCs进行体外成熟培养,44h后统计核成熟率,并对成熟卵母细胞用化学方法孤雌激活,48h后统计卵裂率,168h后统计囊胚率,并收集囊胚统计总细胞数。此外,收集培养44h的成熟卵母细胞进行皮质颗粒染色,统计胞质成熟率。在本次试验中,对未成熟卵母细胞进行两种处理,即在成熟培养液中分别加入GDF9(浓度梯度为0,100,200,300 ng/mL)和抗GDF9抗体(浓度梯度为0,2.5,5,10μg/mL),然后检测上述指标。结果表明,GDF9对核成熟、胞质成熟、卵裂及囊胚总细胞数无显著影响,但可显著提高囊胚率,且这种作用具有剂量依赖性,在浓度为200ng/mL时达到最大。
  第二部分GDF9对猪卵母细胞体外成熟与发育微环境影响的研究
  采集屠宰场废弃的猪卵巢,收集COCs进行体外成熟培养,44h后依据文献方法对卵丘细胞扩散情况进行分析,并收集卵丘细胞,用血球计数板对卵丘细胞增殖情况进行统计,收集成熟培养液,用ELISA方法检测培养液中孕酮含量。在本次试验中,选取对胚胎发育有显著差异的添加物浓度:200ng/mL的GDF9和10μg/mL抗GDF9抗体分别加入猪卵母细胞成熟培养液中进行处理,然后检测上述指标。结果表明,200ng/mL的GDF9可促进卵丘细胞扩散、增殖,抑制孕酮分泌,从而抑制黄体化,创造适合卵子发育的微环境。
  第三部分GDF9对猪卵丘细胞基因表达的研究
  采集屠宰场废弃的猪卵巢,收集COCs进行体外成熟培养,44h后收集卵丘细胞,抽提其总RNA,经反转录获得cDNA,将HAS2(与卵丘扩散相关)、CSTB(与囊胚发育相关)、FST(与卵母细胞成熟和发育相关)基因与内参基因ACTB同时进行QPCR扩增,记录各个基因扩增的的ct值。在本次试验中,与第二部分相同,选取对胚胎发育有显著差异的添加物浓度:200ng/mL的GDF9和10μ g/mL抗GDF9抗体分别加入猪卵母细胞成熟培养液中进行处理,然后计算上述基因的表达量。结果表明,200ng/mL的GDF9促进卵丘细胞中HAS2表达,抑制CSTB和FST表达。
  结论:GDF9通过促进卵丘细胞扩散、增殖,抑制孕酮分泌,促进卵丘细胞中HAS2表达,抑制CSTB和FST表达,从而创造适合卵子发育的微环境,最终提高猪卵子的体外发育能力和早期胚胎的发育质量。
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