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摘要:目的:探讨DNA甲基化与巴马长寿的关系。方法在广西巴马县长寿家族中选取60例90~110岁老人组成长寿组,在非长寿家族中选取48~85岁的健康者60例组成对照组。抽取外周血2 ml,构建DNA混合池,利用Roche-NimbleGen甲基化芯片技术对研究人群的全基因组进行扫描,使用SPSS17.0软件及在线分子功能注释系统( MAS)进行数据分析,P<0.01视为甲基化程度较高的序列。结果共筛查出6441个超甲基化位点,其中长寿组392个,对照组6049个。高甲基化位点共涉及1618个基因,长寿组有133个,对照组有1485个。两组人群的高甲基化基因均涉及24个生物学功能,均以细胞过程、生理过程、生物调控为主。长寿组高甲基化基因涉及42个信号通路,对照组涉及156个信号通路。长寿组和对照组中均有与年龄相关性疾病有关联的高甲基化基因,长寿组中涉及较多疾病的基因有CCKBR、COL18A1、EGR3、H19、IL11、TIMP1、S100A1等;对照组中涉及较多疾病的基因有ACSL1、ADAMTS13、ADCY8、AHRR、ARVCF、ATP2A1、ATP5I、BCS1L、GCK、ITGA2B等。结论本研究利用芯片技术筛查获得了与长寿呈正相关和负相关的高甲基化位点、基因及其生物学功能分类、信号通路,为DNA甲基化和长寿的深入研究提供了基础数据。...
摘要:目的 探析RET基因3'UTR多态性同小儿先天性巨结肠症的相关性研究.方法 入选广西壮族自治区妇幼保健院2013年5月-2014年5月小儿先天性巨结肠症患者100例为研究组,同期入选无神经山嵴及消化道系统病变的血液正常标本者100例为对照组,应用生物心肌数据库查找7个RET基因3'UTR多态性位点,进行直接测序法、PCR扩增目的基因测序法分析选取的SNPs位点,进行HSCR及多态性位点统计学分析,分析REET基因3'UTR多态性与小儿先天性巨结肠症的相关性.结果 rs17028C>THE (P): 0.81、rs3026782G>AHWE (P):1、rs2742240A>THWE (P):0.13、rs2435355T>CHWE (P):0.8、rs2742241G>AHWE (P):0.51等SNP单个位点与先天性巨结肠症的发病呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RET基因3'UTR的SNPs与小儿先天性巨结肠症呈负相关,为先天性巨结肠症的保护性位点....
摘要:目的 为明确广西华支睾吸虫病流行的分布特点.方法 通过对文献、内部材料及近十年尚未公开发表的华支睾吸虫病调查数据的系统整理和分析.结果 目前广西已有60个县市有华支睾吸虫病的流行或存在,占全区所有县市的68.18%,其中重度流行以上县市占41.67%(25/60),中度流行县市占10.00%(6/60),轻度流行县市占48.33%(29/60).流行分布主要集中在广西珠江流域,流行县市数占该流域的71.23%(52/73),其中依次以该流域中的左江、邕江-郁江-浔江、黔江、右江地区最为严重.从全区开展调查的程度上看,未明地区主要集中在桂南沿海诸河、桂北长江流域、以及珠江流域中的桂江、柳江、贺江和红水河地区.结论 广西华支睾吸虫病流行严重,呈日益加重的趋势.同时对目前流行尚未明确地区应该尽快开展现场调查....
摘要:目的 探讨宫颈脱落细胞HPVL1蛋白、人乳头瘤病毒(HPV) DNA载量对宫颈病变的预测作用.方法 选取宫颈病变患者362例,宫颈刷采集宫颈脱落细胞,采用免疫化学方法检测HPVL1蛋白,HC2技术检测HPV DNA载量,根据宫颈组织病理学结果将患者分为慢性宫颈炎(190例)、宫颈上皮内瘤变Ⅰ期(CIN Ⅰ,45例)、宫颈上皮内瘤变Ⅱ期(CINⅡ,43例)、宫颈上皮内瘤变Ⅲ期(CINⅢ,46例)和宫颈癌(38例);根据宫颈细胞学检查结果将脱落细胞分为未见异常细胞(NILM,122例),未明确性非典型鳞状上皮细胞(ASCUS,75例),可疑非典型鳞状上皮病变细胞(ASCH,52例),低度鳞状上皮内病变(LSIL,61例)和高度鳞状上皮内病变(HSIL,52例),比较不同宫颈病变HPVL1蛋白、HPV DNA载量的差异.结果 130例宫颈脱落细胞HPVL1蛋白阳性,阳性率为35.91%(130/362),其中HPVL1蛋白阳性率由大至小分别为:慢性宫颈炎>CIN Ⅰ期>CINⅡ期>CINⅢ期>宫颈癌,NILM> ASCUS> ASCH> LSIL> HSIL,不同宫颈病变组织病理学或细胞学类型比较差异具有统计学意义(P<0.05),272例HPV DNA阳性,阳性率为75.14%,低度HPV DNA载量以慢性宫颈炎或NILM最多,高度HPV DNA载量以宫颈癌或HSIL最多,明显高于其他宫颈组织病理学或细胞学类型(P<0.05).结论 HPVL1蛋白在宫颈脱落细胞的表达随着宫颈病变程度加重而下调,HPV DNA载量随宫颈病变程度加重而上调,二者检测在宫颈病变程度的预测中具有重要的价值....
摘要:目的 观察微囊藻毒素-LR(MCLR)暴露对小鼠肝组织DNA甲基转移酶(DNMTs)活性的影响.方法 80只昆明小鼠,雌雄各半,随机分为4组,每组20只,即对照组(生理盐水)及MCLR低、中、高剂量组(MCLR5、10、20 μg/kg),1次/d经腹腔注射染毒,分别于染毒第11、21 d测定肝功能生化指标,观察肝脏组织形态学变化,检测DNMTs酶活性.结果 染毒11d时,与对照组比较,低剂量MCLR组小鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)无明显变化,高剂量组ALT、AST、ALP酶活性均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒21 d时,与对照组比较,各剂量MCLR组小鼠肝脏ALT和AST水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒11、21 d时,低、中、高MCLR组小鼠DNMTs酶活性分别为(89 135.7±14 334.7)、(92 645.8±15 962.3)、(70481.3 ±15 621.3)和(59 115.6 ±9 884.6)、(83 310.7±15 066.3)、(86 612.5 ±20 572.8)RFU/(h· mg),均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MCLR暴露可引起ALT、AST、ALP水平升高,肝组织DNMTs酶活性升高....
摘要:目的:了解广西巴马县长寿区与非长寿区老年人群的血脂水平及其危险因素.方法:采用分层随机抽样方法在广西巴马县长寿区和非长寿区分别抽取337名和189名60岁以上健康居民进行身高、体重、体重指数、腰围、血压、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白—胆固醇( HDL C)和低密度脂蛋白—胆固醇(LDL-C)测定,对血脂异常检出率危险因素进行非条件Logistic回归分析.结果:巴马长寿区老年人群血清TC、HDL-C水平明显高于非长寿区老年人群(P<0.01),而TG、LDL-C水平与非长寿区人群比较,差异无统计学意义(P>0.05).长寿区老年人群血脂异常检出率明显高于非长寿区人群(P<0.01).性别、血压和腰围是巴马长寿区老年人群血脂异常的危险因素,每周食用玉米次数与长寿区人群血脂异常检出率呈负相关.而性别、体重指数是巴马非长寿区老年人群血脂异常的危险因素.结论:巴马长寿区和非长寿区老年人群的血脂谱、血脂异常检出率及其危险因素存在明显差异,可能与他们的饮食习惯、生活方式不同有关....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:目的 探讨二烯丙基硫醚( DAS)对微囊藻毒素-LR (MCLR)诱导的细胞凋亡及活性氧产生的影响.方法 体外培养人肝癌细胞株HT17,用1μmol/L MCLR染毒的同时给予DAS(0.02~2 mmol/L)作用4、24h,同时设立溶剂对照组、DAS对照组和单纯MCLR染毒组.应用四甲基偶氮噻唑蓝法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,采用荧光探针2-[6-(4'-羟基)苯氧基-3H-占吨醇-3-on-9-yl] -苯甲酸检测细胞内活性氧水平.结果 0.2和2mmol/L DAS干预组细胞存活率分别为(80.91±5.25)%,(90.13±4.47)%,高于MCLR染毒组的(69.50±3.03)%,差异有统计学意义(P<0.05);而0.2和2 mmol/L DAS干预组细胞凋亡率分别为(10.87±0.52)%,(8.52±0.55)%,低于MCLR染毒组的(13.29±1.16)%,差异有统计学意义(P<0.05);0.2和2 mmol/L DAS干预组的活性氧水平明显下降(P<0.05).结论 DAS可拮抗MCLR诱导的活性氧产生及细胞凋亡....
摘要:目的 了解医学本科生公开发表论文的意愿、撰写论文的情况及其影响因素,探讨相应的教学改革和管理对策.方法 自行设计问卷对广西医科大学预防医学、信息管理与信息系统2个专业的369名学生进行调查.结果 本科生对发表学术论文具有较正确的认识,69.6%的被调查者认为本科生有必要和非常有必要发表论文;有46.3%的被调查者撰写过学术论文;10.8%的被调查者投过稿,投稿且被录用者占4.9%.想发表学术论文的276名学生希望学校安排好的指导教师、提供相关资料、对论文写作投稿进行指导并提供经济资助.结论 本科生通过撰写和发表学术论文可以锻炼多方面的能力,学校应当为本科生在科学研究和论文撰写及发表等方面提供更多的指导和帮助....
摘要:目的 比较广西巴马长寿地区与一般地区人群外周血白细胞端粒DNA长度差异,探讨长寿与端粒DNA长度之间可能存在的关系.方法 在广西巴马县长寿村落选取健康个体49人作为长寿组,另选取一般地区健康个体51人作为对照组;运用地高辛探针标记的Southern印迹杂交(Southern blot)方法测量人群外周血白细胞端粒DNA限制性片断(TRF)长度.结果 以年龄为协变量,对长寿组和对照组外周血白细胞端粒DNA长度作协方差分析,长寿组端粒DNA长度(9.29±0.05)kb明显长于对照组(8.48±0.05)kb(P<0.01);长寿组和对照组内,不同年龄段的端粒DNA长度明显不同(P<0.05),端粒DNA长度随年龄的增加而降低.结论 广西巴马长寿地区人群外周血白细胞端粒DNA长度明显长于一般地区人群,提示广西巴马地区人群长寿与其端粒DNA长度较长可能有一定的关系....
摘要:目的 比较广西长寿地区巴马县人群与一般地区人群的白细胞DNA总体甲基化水平,探讨长寿与DNA甲基化之间可能存在的关系.方法 (1)在巴马县长寿村落抽取健康个体199人组成实验组,另抽取与实验组年龄性别相匹配的个体163人组成对照组.(2)取研究对象外周血2 ml,分离白细胞、提取DNA,用高效液相色谱法检测其中胞嘧啶(dC)和5-甲基胞嘧啶(5-dmC)浓度,计算5-dmC/(dC+5-dmC)比值,以比值代表研究对象总体甲基化水平.结果 (1)对照组和实验组研究对象的总体甲基化水平都呈增龄性下降,下降速率分别为-0.874 3和-1.151 7,年龄与甲基化比值呈负相关,相关系数分别是-0.480和-0.639;(2)实验组人群DNA总体甲基化水平比对照组的高(P<0.001);分年龄组段比较,在10~、20~、40~、50~、60~年龄段,实验组人群的甲基化水平高于对照组(P<0.05). 结论 巴马县人群长寿与其DNA总体甲基化水平较高可能有一定的关系....
摘要:DNA甲基化与衰老的研究是近20 a来分子生物学研究的热点之一.本文综述了近年来国内外文献,概括DNA甲基化理论研究进展,探讨影响甲基化与衰老的主要因素,以揭示两者之间可能存在的联系,并分析了与甲基化和衰老相关疾病的发生机制....
摘要:膳食调查是预防医学专业的重要教学内容,但现实条件无法满足学生亲历现场调查的要求,一定程度上影响了教学效果.本文对构建膳食调查虚拟仿真实验进行了探讨、总结,为培养学生的现场实践能力提供了可借鉴的方式....
摘要:本科生导师制是一种有效提高教育质量和学生素质的教育方法,有助于培养学生独立思考和批判思维素养.广西医科大学公共卫生学院在借鉴其他医学院校的基础上实行预防医学专业本科生导师制的培养模式,在实施过程中发现了诸多问题.文章主要从学生、导师、学院三个层面对所遇问题进行探讨....
摘要:目的:了解青少年健康相关的生活行为与习惯,为健康教育和健康促进有的放矢地开展提供参考依据。方法分层整群随机抽取广西南宁市区的中、小学生为研究对象,通过问卷调查其生活行为与习惯。结果南宁市区中、小学生睡眠时间不足。小学生进食烧烤、油炸薯条等零食与饭量摄入量有中度负相关关系。中、小学生刷牙频率与蛀牙数量分别有中度和高度负相关关系。中、小学生洗手习惯与患感冒、腹泻等感染性疾病分别有轻度和中度负相关关系。中、小学生体育锻炼时间与患病频率均有轻度负相关关系。中、小学生近视与玩电子产品时间或做家庭作业时间均无相关关系。结论中、小学生的健康状况与生活行为方式和习惯密切相关,针对存在问题有目的地开展健康干预工作,这需要家庭、学校、社会三方共同参与。...
[博士论文] 李春宏
流行病与卫生统计学 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  人类的长寿与衰老受遗传因素影响,长寿家族人群相对于非长寿家族人群、老龄群体相对于年轻群体,其基因表达水平有差异,拟从转录组学层面挖掘长寿与衰老差异表达基因,探讨基因表达与长寿和衰老的关系。DNA甲基化是表观遗传学修饰方式之一,它易受环境因素的影响而发生动态改变,与人类长寿、衰老、疾病的发生、发展均有关联。基于以上的研究线索,以广西巴马地区人群为研究对象,筛查长寿相关的DNA差异甲基化位点和基因,并在人群中检测长寿高甲基化基因NFATC1基因的甲基化水平,从表观遗传学对基因调控的角度探索DNA甲基化与人群长寿的关系。
  方法:
  (1)运用WGCNA分析GEO数据库中的长寿人群数据集GSE16717的二代测序数据(RNA-seq),以获取长寿与衰老差异表达基因。在人群中随机抽取不同年龄段的个体、抽取其外周静脉血、提取RNA,用于检测特异性衰老差异表达基因CCR6和ID3的表达水平。
  (2)在广西巴马地区的长寿家族和非长寿家族中抽取个体,分别组成长寿家族组和非长寿家族组,抽取研究对象的外周静脉血、提取DNA,用于甲基化芯片检测以获取长寿差异甲基化位点和基因。另建立由长寿老人、长寿老人后代组和非长寿家族人群组成的病例对照研究,检测长寿高甲基化基因NFATC1的甲基化水平。
  结果:
  (1)获得296个长寿差异表达基因,表达水平与寿命负相关,主要涉及GO:0005634~nucleus、T cell receptor signaling pathway等生物学功能和通路。排名前10的是CAMK4、SLC16A10、EPHA4、TAMM41、MAN1C1、DPH1、SIT1、GMPS、PRRC2B、DEXI等;获得46个衰老差异表达基因,表达水平与年龄负相关,主要涉及GO:0042113~B cell activation and hsa04662:B cell receptor signaling pathways等生物学功能和通路。排名前10的是CR2、VREB3、ID3、MS4A1、TCL1A、CCR6、OSBPL10、USPL1、HS3ST1、SPIB等。
  (2)特异性衰老差异表达基因CCR6和ID3在不同年龄段人群中表达水平有差异(74岁以下组>75岁及以上组),基因表达水平与年龄呈负相关关系。
  (3)NFATC1、SHC2、ULBP1、CD37、IL11等基因在长寿家族组人群中高甲基化,而MAPK3、PIK3R5、CORO1A、AKT1和PRKCZ等基因发生了低甲基化。
  (4)NFATC1基因启动子区域chr77157891位点的甲基化水平差异有统计学意义(长寿老人组>非长寿家族组,长寿老人后代组>非长寿家族组)。77157909位点甲基化水平差异也有统计学意义(长寿老人组<长寿老人后代组,长寿老人组<非长寿家族组),且在长寿家族后代组与非长寿家族组的男女间比较,该位点的甲基化水平差异有统计学意义(女<男,p=0.014)。
  (5)H19、PFKFB4、SFTPA1基因在长寿家族人群中低表达、高甲基化。
  结论:
  (1)人类的长寿和衰老均与基因差异表达有关,长寿差异表达基因主要参与细胞免疫;衰老差异表达基因主要参与体液免疫,基因表达水平与年龄呈中度相关关系。
  (2)衰老差异表达基因CCR6和ID3表达水平随着年龄的增加而下降。
  (3)分别获得了长寿高甲基化与低甲基化基因,长寿高甲基化基因NFATC1基因启动子区域部分位点的甲基化水平可能与广西巴马地区人群的长寿相关。
  (4)H19、PFKFB4、SFTPA1既是长寿相关低表达基因,也是长寿相关高甲基化基因。
摘要:目的:探讨一对一规范带教法在检验科实习中的带教效果。方法选择2012年6月~2013年6月在我院检验科实习的学生60名,随机分为对照组和实验组,对照组应用常规传统带教法,实验组采取一对一规范带教法。比较两组实习生的考试成绩及实习生对教学方法的评价。结果实验组理论知识和临床技能考试成绩均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实习生评价结果显示,实验组实习生总体工作情况较好,对自身职业素质的提升认同度也较高。结论检验科实习生一对一带教法的应用有积极效果,能显著提升实习生专业素质,值得推广应用。...
摘要:目的 了解南宁市高校中直饮机纯净水的卫生状况,及时发现纯净水中可能存在的安全隐患,防止水源性疾病的发生.方法 对南宁市安装了直饮机的6所高校进行监测.在每台直饮机上取水1份,依据我国CB/T<4789-2003/食品卫生微生物学检验>对采集的纯净水水样进行检测,分别评价水样中菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌、致病菌(志贺菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌)等微生物学指标是否符合我国规定的纯净水饮用卫生标准.每个指标每次检测时均设一个平行接种,另设一空白对照.结果 在安装有直饮机的6所高校中共采集纯净水49份,水样外观无不良感观性状.经实验检测得知,符合GB<17324-2003/(瓶(桶)装饮用纯净水卫生标准>的水样有44份,总合格率为89.80%,不合格的微生物学指标均是菌落总数.结论 由于直饮机纯净水缺乏卫生监管,水质不容乐观,必须落实相关的管理整改措施,饮水安全问题才能得到解决....
摘要:目的 研究微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MCLR)短期重复暴露对小鼠肝组织DNA总体甲基化水平、DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase, DNMT) mRNA表达的影响.方法 80只健康昆明小鼠,随机分为2批,每批4组,每组10只,即对照组(含0.02%二甲基亚砜的生理盐水0.005 ml·g-1)、MCLR低(5μg· kg-1)、中(10 μg·kg-1)、高(20 μg·kg-1)剂量组,每日经腹腔注射染毒,分别染毒10和20d.提取并水解小鼠肝组织DNA,采用高效液相色谱法测定DNA总体甲基化水平;提取肝组织总RNA,逆转录成cDNA,用实时荧光定量PCR法测定DNMT1, DNMT3a,DNMT3b的mRNA表达水平.结果 染毒10d后,各剂量组DNA总体甲基化水平未出现明显差异.染毒20 d中、高剂量组DNA总体甲基化水平为(2.26±0.60)%和(2.16±0.51)%,均低于对照组的(3.31±0.86)%,差异均有统计学意义(P<0.05).染毒10d高剂量组DNMT1、DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平均下调(P<0.05),染毒20d后,中、高剂量组中DNMT1,DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平与对照组比较均下降(P<0.05),其中,中剂量组DNMT1,DNMT3a及DNMT3b的mRNA表达水平分别降至对照组的38.3%,59.9%,21.5%,差异均有统计学意义(P<0.05).肝组织DNMT1,DNMT3a,DNMT3b mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈正相关关系(rDNMT1 =0.47,P<0.01;rDNMT3a=0.37,P<0.01;rDNMT3b =0.36,P<0.05).结论 MCLR短期重复暴露可抑制小鼠肝组织DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达,降低DNA总体甲基化水平.MCLR引起的基因组总体DNA甲基化水平降低可能与DNMT1,DNMT3a和DNMT3b的表达下调有关.
[硕士论文] 李春宏
劳动卫生与环境卫生学 广西医科大学 2008(学位年度)
摘要:本文主要从以下几部分展开: 第一部分: 目的:分别建立检测全基因组DNA总体甲基化水平、以及能对CD11a基因启动子区域甲基化状况进行定量、定位的方法。 方法:HPLC方法1.从流动相、检测波长等方面优化高效液相色谱法检测甲基化水平的实验条件;2.检测dC和5-dmC的混合标准品,分别建立两组分的标准方程;3.分别计算日内精密度、日间精密度和回收率,以评价高效液相色谱法的稳定性和重现性;4.水解DNA,使之成为dC、5-dmC等脱氧核苷;检测DNA水解产物,把峰面积代入标准方程,分别计算两组分的浓度,以5-dmC/(dC+5-dmC)比值代表总体甲基化水平;亚硫酸氢钠-PCR-测序法1.确定亚硫酸氢钠转换模板的浓度和作用时间,并对模板进行转换;2.保留CD11a基因启动子序列中CG不变,用T替代其他所有的C,以转换后的序列设计4对引物并分段扩增之;3.设计相应的4对测序引物以测序PCR产物,将测序所获序列与原序列比对,确定发生甲基化的位点,并定量发生甲基化的频率。 结论:本文所建立的高效液相色谱法能够准确灵敏地检测全基因组总体甲基化水平,检测结果稳定,方法重现性好;亚硫酸氢钠-PCR-测序法能够定量、定位CD11a基因启动子区域甲基化状况,相对于其他方法,省时、省标本。 第二部分: 目的:探索巴马县人群的长寿现象是否与DNA甲基化有关,比较该县人群的总体甲基化水平是否与普通健康人群的一致,分析长寿地区人群基因组DNA甲基化水平随年龄增加而下降的速度是否比一般人群缓慢,以研究长寿与DNA甲基化之间可能存在的相关关系。 方法:1.用非随机抽样法在巴马的长寿村落抽取18-103岁的健康个体为实验组,共84人;在我校一附院接受例行体检的健康人群中抽取77人为对照组,年龄、性别分布与实验组同;2.抽取研究对象外周静脉血2m1,分离白细胞并提取DNA;3.水解DNA成为脱氧核苷后,使用前文建立的高效液相色谱法检测水解产物中的dC和5-dmC浓度,并计算5-dmC/(dC+5-dmC)比值,以比值代表研究对象总体甲基化水平;4.使用统计软件SPSS13.0分析两组人群甲基化比值的差异来反映两组人群总体甲基化水平的差异。 结论:1.对照组和实验组研究对象的基因组DNA总体甲基化水平随着年龄的增长而下降;2.总体而言,来自长寿地区的实验组人群的DNA甲基化总体水平比对照组的高;3.实验组和对照组人群总体甲基化水平发生增龄性降低的速度相同。
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