绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 7
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 132 条结果
摘要:为表达锡兰钩虫金属蛋白酶组织抑制剂(Ace-TIMP)重组蛋白,本实验根据GenBank中锡兰钩虫TIMP (ANCCEY-04405)基因序列设计引物扩增犬源锡兰钩虫Ace-TIMP基因,利用生物信息学软件对其序列鉴定;根据编码的氨基酸序列进行遗传进化关系分析;构建其重组表达质粒pET-32a-Ace-TIMP-MP,转化大肠杆菌,并经诱导表达.结果 显示,Ace-TIMP基因ORF为648 bp,编码215个氨基酸,包含16个氨基酸的信号肽,具有TIMP家族Cys-X-Cys特征性序列.进化树分析显示Ace-TIMP与犬钩虫TMP-2位于同一分支.经诱导表达与纯化,获得了分子质量约为42 ku的可溶性融合蛋白.本实验克隆了Ace-TIMP基因并利用原核表达系统表达了可溶性的重组蛋白,为Ace-TIMP生物学活性的研究和免疫潜能的评价奠定了基础....
摘要:目的 克隆表达锡兰钩虫血小板抑制剂(hookworm platelet inhibitor,HPI)基因,并研究其编码蛋白的生物学特性.方法 以锡兰钩虫cDNA为模板,参考已公布的犬钩虫血小板抑制剂(AcaHPI)基因序列设计特异性引物,运用RT-PCR扩增其AceHPI基因序列,并将其连接至pET-28a表达载体,诱导其表达并纯化.利用在线软件对其编码蛋白的氨基酸序列进行同源性比对和生物信息学分析.结果 锡兰钩虫AceHPI基因的ORF序列全长603 bp,编码200个氨基酸,与犬钩虫AcaHPI氨基酸序列同源性为91%.构建的重组表达质粒pET28a-AceHPI经诱导表达与纯化,获得了分子质量约为26kDa的可溶性融合蛋白.预测分析表明该蛋白为疏水蛋白,前17个氨基酸为信号肽序列且无跨膜结构域.结论 成功克隆表达了AceHPI基因并对其编码氨基酸进行了生物信息学分析,为进一步研究AceHPI在感染宿主体内的作用机制奠定了基础....
摘要:为合理使用福尔马林防治大黄鱼刺激隐核虫病,研究福尔马林对体外刺激隐核虫的灭活效果,并评估其对大黄鱼幼鱼的安全质量浓度范围.结果显示,对幼虫分别药浴处理10、30、60、120 min,使幼虫全部死亡的福尔马林质量浓度分别为62.5、62.5、31.3、5.6 mg/L;对包囊药浴处理1、2、4 h,使包囊全部死亡的福尔马林质量浓度分别为150、75、75 mg/L;福尔马林对大黄鱼(3.00 ± 0.78)g幼鱼12、24、48、96 h的半致死质量浓度分别为394.7、365.3、334.4、322.8 mg/L;治疗试验显示,125 mg/L福尔马林药浴2 h,可有效防治大黄鱼刺激隐核虫病,存活率显著高于75 mg/L组和对照组.试验结果表明,每隔3 d,125 mg/L的福尔马林药浴处理大黄鱼2 h,共3次,可安全有效防治大黄鱼刺激隐核虫病....
摘要:为了确定引起广东环尾狐猴(Lemur catta)呼吸困难、厌食和出血性肺炎症状的病原,从2只死亡的环尾狐猴体内无菌采集心肝肺肾组织样本.通过病原形态学观察,鉴定为弓形虫(Toxoplasma sp.)后,另外采集在狐猴笼舍出现的2只老鼠和1只猫4份组织样本.所有样本分别采用荧光定量PCR及一步法PCR技术进行弓形虫的检测与529 bp重复序列分析.以弓形虫B1基因片断为扩增对象的荧光定量PCR检测显示6份样本的CT为25.84 ~30.29,溶解曲线中均出现明显峰值,核酸定量峰值均大于阳性对照.用一步法PCR自6份样本中均扩增出529 bp目的片段,测序和Blast分析显示,该目的片段与GenBank中登录号为KC607824和DQ779189的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)核苷酸序列相似性最高,均为98.7%;与国际标准强毒虫株RH的核苷酸相似性为98.5%.这些结果表明,荧光定量PCR技术可以用于环尾狐猴弓形虫病的快速诊断,本次环尾狐猴的死亡可能是由于弓形虫的感染引起的,刚地弓形虫可能由野猫与老鼠传播....
摘要:蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)是一种常见的人共患寄生性原虫,由其导致的贾第虫病已被世界卫生组织列为危害人类健康的10种主要寄生虫病之一.近年来,贾第虫病的危害日益受到重视,然而贾第虫导致腹泻的致病机制尚不明确,可能与其细胞骨架蛋白、虫体分泌物、L精氨酸代谢以及表面抗原变异、免疫学改变等多种因素有关,该文对与贾第虫致病机理相关的研究作一综述....
摘要:为建立针对不同发育阶段蜱的长链dsRNA电转化导入方法,本研究以我国优势流行的硬蜱镰形扇头蜱为对象,以蜱的保守基因Subolesin作为目标基因,将荧光标记的Subolesin-dsRNA对卵、幼蜱以及若蜱3个发育阶段进行电转化监测dsRNA的转化效果,对电转化后不同时间以及不同dsRNA电转化浓度进行优化,并接种小鼠观察电转化Subolesin-dsRNA对幼蜱及若蜱吸血的影响.结果显示,电转化Cy3荧光染料标记dsRNA后,卵、幼蜱及若蜱体内均有点状分布的荧光.若蜱于电转化后放置8h,Subolesin mRNA沉默效果较佳.此外,卵、幼蜱及若蜱分别在dsRNA浓度为10 μg/mL、5μg/mL~25 μg/mL及10 μg/mL~25 μg/mL沉默效果较好.Subolesin-dsRNA干扰后蜱的存活率和吸血能力均显著降低.本研究建立的针对各个发育阶段蜱的高效长链dsRNA电转化方法为研究基因功能和沉默特定的基因提供了新的dsRNA导入方法....
[期刊论文] 武省 李国清
-
北大核心 CSTPCD CA
-
摘要:蓝氏贾第虫(Giardialamblia)是一种重要的人畜共患寄生虫,可引起人和多种哺乳动物的腹泻。近年来人们对其致病机制进行了大量研究,包括贾第虫结构蛋白(贾第素)和排泄分泌物,表面抗原变异以及贾第虫对小肠的影响等,本文对此进行了综述。...
摘要:为了解广州市某野生动物园草食类及灵长类野生动物肠道寄生虫的感染情况,采用粪便检查法共检查36种动物500份粪样,总阳性率为50.6%。其中毛圆线虫、毛尾线虫、蛔虫、类圆线虫、钩虫、绦虫、片形吸虫、球虫的感染率分别为37.4%、5.0%、5.4%、2.0%、0.2%、2.4%、0.4%、7.8%。草食类和灵长类动物寄生虫感染率分别为61.3%和28.4%,其中长颈鹿的毛圆线虫、猴科动物的毛尾线虫感染较为普遍,年平均感染率分别为64.5%和31.2%,具有明显季节性。采用粪便培养法将毛圆线虫卵培养至第三期幼虫,对其进行形态学鉴定,结果显示,来自长颈鹿、角马、弯角剑羚的毛圆线虫样品多为混合感染,其中捻转血矛线虫为优势虫种。...
摘要:锡兰钩虫是线形动物门、尾感器纲、圆线目、钩口科、钩口属的一种寄生虫,在亚洲地区广泛流行,可感染犬、猫等多种哺乳动物和人.该虫曾被认为是可忽略的寄生虫;后来的研究表明,锡兰钩虫可引起人体严重的症状,包括“钩虫痒”、腹部不适和贫血等.近年来亚洲地区的分子流行病学调查表明,人体的锡兰钩虫感染与犬、猫的锡兰钩虫感染呈正相关.犬、猫作为锡兰钩虫的自然宿主,可以对人类生活环境造成污染,因此在该病的防控措施中需要对接触犬、猫的人群进行重点保护....
摘要:为了了解鸭肝炎病毒的遗传变异情况,试验采用RT-PCR方法对采自广东省各地12个DHV临床分离株的VP1基因进行了扩增、克隆、测序和序列分析.结果表明,12个DHV分离株的VP1基因序列长度均为714 bp,编码238个氨基酸,12个分离株与GenBank公布的参考株核苷酸同源性为91.7%~95.8%,氨基酸同源性为94.5%~98.3%,而12个分离株之间的核苷酸序列同源性达到99.2%~100%,氨基酸同源性为97.9%~100%.系统分析证明,12个DHV分离株均为DHV-Ⅰ型,不同分离株VP1基因无碱基插入和缺失,但存在点突变,各DHV分离株间亲缘关系较近,但存在一定的遗传差异....
摘要:为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase, G6-PI)的生化特性,本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据NCBI已公布的E. tenella Houghton株G6-PI的基因序列(GI:298161921)设计特异性引物,运用RT-PCR方法扩增EtG6-PI基因序列,并将其克隆到表达载体pColdI、pCold43a中,构建重组质粒pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli Rosetta (DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明, E. tenella G6-PI的ORF序列(1650 bp),编码550个氨基酸;重组菌pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI均能成功诱导表达,其中pCold43a-EtG6-PI表达部分可溶性蛋白,表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。...
摘要:为研究猫源蓝氏贾第虫EF1α和GDH基因的分子特性,本研究采用两组引物EF1-F、EF1-R和GDHeF、GDHiF、GDHiR通过普通PCR及套式PCR方法对两基因片段进行特异性扩增,用MegAlign软件对扩增片段进行同源性比对及进化树分析.结果显示,获得了200 bp及432 bp的EF1α和GDH序列,其基因登录号分别为KC510661和KC510662,EF1α基因位点分析表明该蓝氏贾第虫分离株为基因型F,GDH基因位点分析表明其可能是一个新亚型(FⅢ).该研究首次对猫源蓝氏贾第虫EF1α和GHD基因双位点进行分子特性研究,为贾第虫分子分类学及分子遗传学研究奠定了基础....
摘要:应用PCR技术对广州市某宠物寄养所采集的一株D型犬源贾第虫和一株F型猫源贾第虫的核糖体IGS序列进行了扩增、克隆、测序,将测序结果与GenBank已上传的贾第虫相应序列进行比对分析,基于贾第虫IGS序列建立了具有良好特异性和敏感性的PCR检测方法,并对84份临床粪样进行了检测。结果显示,D型犬源贾第虫和F型猫源贾第虫的IGS序列长分别为1355 bp和1388 bp,贾第虫IGS序列存在多态性现象,种间差异明显,可以作为区分不同基因型的分子标记;建立的PCR方法能特异性扩增犬源贾第虫核糖体IGS序列,而犬蛔虫等对照虫体DNA均不能扩增,该方法对贾第虫DNA的最小检测量为82 fg,对84份临床粪样的检出率为3.57%,比传统镜检法高出2.38%,具有一定的临床应用价值。...
摘要:酰基甘油酯酶(MAGL)是将酰基甘油分解为甘油和游离脂肪酸的丝氨酸水解酶家族成员之一,在酯代谢中起着关键酶的作用,是研制抗鸡球虫药物的重要靶标.本研究利用生物信息学技术预测拼接了柔嫩艾美耳球虫MAGL基因序列,以第二代裂殖子总RNA为模板,通过RT-PCR技术获得Etmagl基因.将Etmagl与pCold-43a载体连接,构建pCold-43a-Etmagl重组载体,并在大肠杆菌BL21中获得可溶性蛋白,经亲和层析获得纯化的重组蛋白.结果显示,扩增的Etmagl序列ORF长1 752 bp,编码584个氨基酸,与预测序列相似度为99%,与弓形虫MAGL相似度好(55%);IPTG诱导后融合蛋白高效表达,大小约为114 ku,经免疫印迹鉴定为目的蛋白.本研究成功利用大肠埃希菌原核表达体系重组表达并纯化了柔嫩艾美耳球虫酰基甘油脂肪酶,为建立以MAGL为靶标的抗球虫药物筛选模型奠定了基础....
摘要:以采自广东省佛山市的鸽蛔虫(Ascaridia columbae)为研究对象,利用保守引物BD1和BD2扩增鸽蛔虫基因组DNA的ITS rDNA片段,对扩增产物进行克隆和序列测定.结果成功扩增出大小为1 045 bp的ITS rDNA序列.获得的鸽蛔虫的ITS rDNA序列(AC001、AC002)的5.8 S rDNA与GenBank收录的鸡蛔虫5.8 S rDNA序列(GenBank登录号为AJ001508)相似性分别为95.5%和94.3%,而与澳大利亚鸽蛔虫5.8 S rDNA序列(GenBank登录号为AJ001509)相似性分别为96.8%和95.5%.将获得的序列与蛔目不同科的代表性蛔虫的5.8 S rDNA序列进行比对和系统进化分析,结果表明鸽蛔虫与鸡蛔虫处于同一进化分支上,也表明ITS rDNA是蛔虫分子鉴定的有效遗传标记,这对蛔虫分子分类学及分子流行病学的进一步研究打下了基础....
摘要:以采自广东不同地区的猪鞭虫(Trichuris suis)和斯氏鞭虫(Trichuris skrjabini)为研究对象,扩增线粒体基因组的pnad4 和pcox1基因,将扩增产物纯化后克隆至pMD18-T载体,对阳性菌落进行测序和序列分析.结果表明,来源于不同地区的鞭虫上述两个基因种内相对保守,差异性不大,但种间差异较大.猪鞭虫和斯氏鞭虫的pnad4长度均为468 bp,相互间有162个种间遗传标记位点;猪鞭虫和斯氏鞭虫的pcox1长度分别为600 bp与438 bp,相互间有156个种间遗传标记位点.两种鞭虫之间的pnad4 基因差异率为45.1%-45.9%,pcox1基因差异率为44.1%-45.4%.上述线粒体两个基因均可作为区分两种线虫的种间遗传标记....
摘要:环介导等温扩增技术(LAMP)是一种新型的体外等温扩增特异核酸片段的技术,具有灵敏度高、特异性强及快速检测等优点,现已经广泛应用于动物疫病的快速检测.文章对LAMP的反应原理、技术特点及其近年来在动物疫病检测中的应用作一综述,旨在为该技术的深入研究和应用提供参考....
摘要:以广州某宠物医院临床犬源贾第虫为研究对象,根据GenBank TM中登录的贾第虫EF1α基因序列(AF069575),设计1对引物EF/ER,采用PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对其进行序列测定及分析,旨在对广州犬源贾第虫进行分子鉴定.结果显示,该犬源贾第虫EF1α序列长为288 bp,与预期目的片段一致,该序列构建的分子进化树表明该犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型.说明EF1α适合做分子标记,可准确地对贾第虫进行基因分型,为贾第虫分子分类学及分子遗传学研究奠定了基础....
摘要:为建立贾第虫定性定量的检测方法,本研究针对犬源贾第虫16S rRNA基因片段设计一对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了贾第虫DNA的SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法.结果显示,特异性产物Tm值为94.20℃,最低可检测到3.39 copy/μL的阳性质粒,标准曲线的相关系数为0.99.与其他常见原虫隐孢子虫、球虫、弓形虫均不发生交叉反应,重复性变异系数小于3%.该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为贾第虫病的临床检测和流行病学调查提供了新的技术手段....
摘要:根据已发表的弓形虫529 bp高拷贝序列,设计特异性引物和探针,建立TaqMan探针法的实时荧光定量PCR检测方法.将该方法用于360份临床样本的检测,并与常规PCR和环介导等温扩增(LAMP)技术进行对比分析.结果表明:Real-time PCR检测的阳性率(11.11%)高于LAMP (7.5%)和常规PCR (3.61%).采用本实验室建立的Real-timePCR,对收集于不同地区4种动物的750份临床样本检测发现,不同种类动物血液样本中均可检测到弓形虫感染,其中羊的感染率最高(17.8%),猪次之(4.22%),牛较低(1.98%),犬最低(1.37%)....
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部