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摘要:目的 探讨NOD鼠体内CD4+ NKG2D+T细胞与CD8+T细胞间关系.方法 动态监测NOD鼠外周血中CD4+NKG2D+T及CD8+ NKG2D+T细胞在不同周龄频率.利用IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,对其外周血中CD4+NKG2D +/CD4+T及CD8+ NKG2D +/CD8+T细胞频率进行分析.将磁珠分选所得CD4+ NKG2D+T细胞分别与经CFSE标记的纯CD4+ NKG2D-T细胞、CD8+T细胞共培养4d,检测体系中CD4+ NKG2D-T细胞、CD8+T细胞CFSE的荧光强度变化.结果 NOD鼠外周血CD4+ NKG2D +/CD4+T及CD8+ NKG2D +/CD8+T细胞频率均随其1型糖尿病疾病进程发展逐渐升高,且二者之间呈正相关.IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,外周血中CD4+ NKG2D +/CD4+T细胞频率随CD8+ NKG2D+/CD8+T细胞频率降低显著下降.与单独培养的CD4+ NKG2D-T细胞相比,加入CD4+ NKG2D+T细胞的培养体系中,CD4+NKG2D-T细胞增殖加快.但CD4+ NKG2D+T细胞对CD8+T增殖作用不明显.结论 NOD鼠体内存在着一群与1型糖尿病疾病进程正相关的CD4+ NKG2D+T细胞,且该群细胞极有可能是通过直接作用于CD4+ NKG2D-T细胞而间接对CD8+T细胞产生作用....
摘要:建立了高效液相色谱荧光法检测鸡组织中阿莫西林( AMO )的残留量。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生化。以0.01 mol/L 的磷酸二氢钾溶液和乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL/min,高效液相色谱荧光检测,激发波长为358 nm,发射波长为440 nm。阿莫西林在25~1000μg/kg质量浓度范围内,线性关系良好。当阿莫西林添加水平为13~125μg/kg时,鸡组织中AMO的平均回收率在72.82%~88.82%,相对标准偏差在6.21%~9.63%;检测限、定量限分别为5μg/kg(S/N≥3)、13μg/kg(S/N≥10)。该方法操作简便,可适用于鸡组织中阿莫西林的提取和检测,且准确度和精密度均符合残留分析的要求。...
摘要:给出了一个具有一般上三角形式预条件子作用下的SOR型迭代法,比较了此迭代法与经典SOR迭代法的收敛速度,从而更好地说明选取一般上三角形式的预条件子也能加快收敛速度;讨论了线性方程组的系数矩阵为M-矩阵、H-矩阵、正定的Z-矩阵时该迭代法的收敛性,推广了该方法的适用范围....
摘要:论述了嵌入式系统及人机交互技术的现状与发展,提出一种新颖的人机交互输入接口的思路和方法.在基于ARM[Advanced RISC(reduced instruction set computer)Machines]嵌入式系统中,移植了μC/OS和μC/GUI,利用加速度传感器ADXL105实现手势动作对图形用户界面中的菜单进行控制,从而实现人机交互输入.该研究改变了传统的输入方式,为以后人机接口的发展探索出一条新的途径....
摘要:综述嵌入式系统设计的最新发展情况;论述当前嵌入式系统设计技术发展的特点;从嵌入式系统设计开发的复杂度,开发形式、手段和工具,开发平台和开发语言等方面分析嵌入式系统设计发生的各种变化,并提出应对这些变化的各种挑战....
摘要:当前,越来越多的USB接口技术应用到嵌入式系统的设计中.本文试图从工程角度对新型有代表性的USB控制器芯片性能进行比较,讨论选择USB芯片应该考虑的因素,并对其发展进行了展望....
[期刊论文] 李凯
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摘要:当今,随着科学技术的发展,我国已经进入到了互联网时代,多媒体语音技术也不断改进和完善,这为高校的语言实验室提供了必要的技术支持,这对提升我国高校外语语言教学效率有很大的帮助,所以,高校外语实验室配置的硬件设施对高校外语教学效果有很大影响,高校相关管理者需要对外语教学硬件设施的配备予以充分的重视,本文对目前外语语言实验室存在的问题进行了介绍,并且针对存在的问题提出了对应的解决方案,希望可以为相关研究者提供一定的帮助....
摘要:采用盆栽模拟水淹处理试验方法,探究水淹处理对4个不同秋眠等级紫花苜蓿苗期生物学特性的影响,旨在为紫花苜蓿耐涝型研究提供基础材料.研究表明,全淹处理对紫花苜蓿的抑制作用大于表土水淹,适度的表土水淹促进植物的生长,而过度的表土水淹则抑制紫花苜蓿的生长,不同秋眠等级的紫花苜蓿的耐涝性之间存在着差异性.本研究最后采用隶属函数对其耐淹性进行综合评价,结果表明WL-525HQ的耐淹性最强,WL-354HQ次之,WL-168HQ的耐淹性最弱....
[专利] 发明专利 CN201810967211.0
扬州大学 2019-01-11
摘要:本发明提供一种金属有机骨架及其制备方法和应用,所述金属有机骨架的分子式为:Ag@[(Cu4Cl)3(BTC)8]·9DMA,其中Ag在金属有机骨架中的质量百分比为3.66~4.27%。本发明采用水热合成法合成Cu‑BTC‑DMA,该反应方法比传统的回流反应更剧烈,可以使得合成更充分,产率更高,晶体结构更完整;采用银离子交换反应来改性Cu‑BTC‑DMA,在低浓度的AgNO3乙腈溶液中进行一定时间的离子交换反应,可以避免强氧化性的AgNO3对Cu‑BTC‑DMA结构造成破坏,同时增强Ag@Cu‑BTC‑DMA的对噻吩的脱硫吸附性能。
[专利] 发明专利 CN201810986739.2
扬州大学 2019-01-11
摘要:本发明提供一种在金属有机骨架中固载离子液体的吸附剂及其制备方法和应用,所述吸附剂为金属骨架材料的孔道内部固载酸性离子液体,其中,所述金属骨架材料为MIL‑53(Cr),酸性离子液体为[Bmim][PF6]。通过化学锚定的后合成方法将1‑丁基‑3‑甲基咪唑六氟磷酸盐离子液体固载到MIL‑53(Cr)的空腔内,固载离子液体后的MIL‑53(Cr)@[Bmim][PF6]吸附剂作为酸性中心,对弱碱性的噻吩起到一定作用,将离子液体固载到MIL‑53(Cr)孔道内部使得复合材料结构更加稳定,克服了离子液体黏度较大,难以回收利用等缺点,实现了吸附脱硫量的大幅度提高,并且有着良好的重复使用性。
[硕士论文] 李凯
化学工程与技术 扬州大学 2019(学位年度)
摘要:以InsB15-23dtSCT原核表达载体为基础,制备dtSCT型IGRP206-214H-2Kd原核表达载体;将获取的融合蛋白IGRP206-214H-2Kd单体,生物素化制成IGRP206-214dtSCT四聚体,进一步将皂草素与IGRP206-214dtSCT四聚体偶联;流式检测皂草素偶联IGRP206-214dtSCT四聚体与NOD鼠脾脏淋巴细胞共孵育体系中IGRP206-214特异性细胞毒性T细胞(CTL).结果表明:皂草素偶联IGRP206-214 dtSCT四聚体与NOD鼠脾脏淋巴细胞共孵育后,IGRP206-214特异性CTL的频率与PBS对照组相比明显下降(P<0.001).说明偶联皂草素的IGRP206-214dtSCT四聚体在体外能够靶向清除NOD鼠抗原特异性CTL....
摘要:通过酵母展示表达IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体,筛选诱导条件获得高表达的IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体酵母用于研究该三聚体诱导NOD鼠CD8+T细胞活化的作用.结果表明:转染IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体的真核表达载体的酵母,在含2%D-半乳糖的酵母培养基中,20℃诱导18h,有77.1%的酵母能稳定表达IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体蛋白.展示酵母与NOD鼠脾脏细胞共培养24 h CD69+表达量最高,占CD8+T细胞的1.89%,共培养96 h,CD25+表达量最高,占CD8+T细胞的4.25%,说明酵母展示获得的酵母能稳定表达IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体蛋白对NOD鼠CD8+T细胞具有活化作用....
[专利] 发明专利 CN201510501600.0
扬州大学 2015-11-18
摘要:本发明公开了一种制备微纳结构石墨烯粉体的方法。将水热法合成的氢氧化钴粉体浸入质量浓度为0.5~2%的聚甲基丙烯酸甲酯的二甲基甲酰胺溶液中,不少于20分钟后取出烘干;将修饰聚甲基丙烯酸甲酯的氢氧化钴粉体在700~1100℃下于氢气气氛中退火2分钟以上,得到黑色粉末;将黑色粉体置于浓度为稀盐酸溶液中浸泡24h以上,干燥后即得所述微纳结构石墨烯粉体。本发明制备的微纳结构的石墨烯能继承氢氧化钴模板的形貌,其结晶质量较高,且制备方法简单、绿色、成本低、可控、易于大量合成。
[硕士论文] 李凯
免疫学 扬州大学 2017(学位年度)
摘要:Ⅰ型糖尿病(Type1 diabetes,T1D)是一种自身免疫性疾病,体内的细胞毒性T淋巴淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)识别并杀伤胰岛β细胞,诱发胰岛炎,造成体内由胰岛β细胞分泌的胰岛素水平降低,机体血糖指数升高,最终引起糖尿病的发生。正常机体生理情况下,体内针对胰岛β细胞的CTL本应被阴性选择后清除或者选择性沉默,但由于遗传变异、病毒感染等因素,出现异常增殖,并能在膜表面表达可与主要组织相容性复合物一类分子(Major histocompatibility complex,MHC-Ⅰ)提呈的胰岛β细胞相关的抗原肽相结合的特异性T细胞抗原受体T细胞(抗原)受体T cell receptor,TCR,这些抗原肽包括葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基相关蛋白(Glucose-6-phosphatase catalyzes acyl-relatedproteins,IGRP)、胰岛素(Ins)、谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)等。成熟的效应T淋巴细胞通过全身血液循环选择性迁移趋化募集到胰岛中,分泌穿孔素、颗粒酶等多种细胞因子来损伤胰岛β细胞。
  锚合到MHC-H类分子的抗原结合槽中的IGRP206-214九肽(VYLKYNVFC)可以通过与TCR的结合将抗原信息传递给特异性CTL,而可溶性的抗原肽-MHC-Ⅰ类分子也能达到相同的效果。课题组前期通过引入单链三聚体(single chain trimer,SCT)以及二硫键捕获(disulfide trapping,dt)技术,设计了IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT的编码基因并通过原核表达系统制备了相关蛋白,验证了蛋白活性。本课题改用真核系统来表达IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT(Eukaryotic-IGRP206-214dtSCT,eIGRP206-214-dtSCT),研究真核表达系统是否对目的蛋白具有糖基化修饰以及初步验证糖基化修饰的蛋白是否具有相同的生物活性。
  目的:
  将IGRP206-214-H-2Kd-dtS CT的编码基因利用质粒重组到巴斯德酵母的染色体中,从而获得稳定的转录翻译;通过甲醇发酵诱导获得目的蛋白;确认巴斯德酵母对目的蛋白进行了糖基化修饰;制备IGRP206-214-H-2Kd-dtS CT-四聚体(IGRP-Tetramer)以及四聚体偶联毒素(IGRP-SAP),体外流式检测真核蛋白的生物学活性。
  方法:
  (1)取本实验室保存的DH5α-pet22b-IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT菌株,设计上下游引物,PCR获得IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT的编码基因,设计基因序列,以引物补足5'端信号肽α-因子、带入HRV3C识别位点、Avi-Tag、6×his-tag以及双酶切位点,插入到pPICZαA质粒中,并通过中间宿主菌大肠杆菌DH5α得到稳定转录。小提质粒,并单酶切线性化后电转到巴斯德酵母GS115中,博来霉素抗性筛选阳性克隆,并筛选高表达菌株。甲醇诱导培养基培养重组GS115,诱导目的蛋白的分泌表达,48-72h后过滤、浓缩培养基上清,上蛋白纯化系统。纯化后的目的蛋白切除C端多余氨基酸片段,生物素化后,再次利用蛋白纯化系统去除游离的生物素以及HRV3C protease。纯化的目的蛋白制备四聚体,验证蛋白生物素化效率。并偶联毒蛋白皂草素。
  (2)rIGRP206-214-H-2Kd-dtSCT-Tetramer(原核表达的IGRP206-214单链三聚体:Recombinant-IGRP206-214dtSCT,rIGRP206-214dtSCT)偶联PE制备用于特异性流式检测IGRP抗原特异性CTL的荧光蛋白(PE-IGRP-dtSCT);Dot-blot、western blot鉴定eIGRP206-214-H-2Kd-dtS CT蛋白的构象正确性;PNGase F切除真核系统表达的目的蛋白上的糖链,飞行时间质谱比对切除前后分子量变化,确认糖基化修饰的存在;可溶性eIGRP206-214-Tetramer联合IL-2添加到12周龄NOD雌鼠脾脏淋巴细胞培养液中共培养72h,流式检测IGRP抗原特异性CTL细胞频率变化;可溶性eIGRP206-214-Tetramer偶联SAP添加到12周龄NOD雌鼠脾脏淋巴细胞培养液中共培养7天,流式检测IGRP抗原特异性CTL细胞频率变化。
  结果:
  (1)构建的重组质粒pPICZαA-IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT成功导入GS115菌株中,使菌株获得Zeocin抗性,PCR验证与对照组双酶切的DH5α中的pPICZαA-IGRP206-214-H-2Kd-dtSCT有相同大小的条带,并且条带大小符合前期设计要求,基因测序结果说明构建的基因片段符合设计要求。甲醇诱导后培养基中与对照转化空质粒组相比51kDa处出现明显的条带。纯化后目的蛋白纯度达到95%以上。生物素化结果显示去除了大部分游离生物素,生物素化效率检测,以蛋白:Streptavidin质量比不同浓度的情况,目的蛋白依然完全形成多聚体,目的蛋白完全生物素化。
  (2)成功制备了PE-IGRP-dtSCT,并且排除了荧光蛋白的非特异性;采用H-2Kd构象单抗,蛋白印迹结果显示真核系统表达的蛋白具有天然的正确空间构象;eIGRP206-214-dtSCT体外实验表明能够随着体系中蛋白浓度的提升,促进IGRP抗原肽特异性CTL的细胞频率增加,并且有显著差异;eIGRP206-214-dtSCT偶联SAP后能够显著降低IGRP抗原肽特异性CTL的细胞频率,并且较rIGRP206-214-dtSCT偶联SAP具有更好的杀伤作用。
  结论:
  巴斯德酵母真核表达系统能够用来表达IGRP抗原肽-MHCⅠ抗原肽,表达的重组蛋白具有糖基化修饰以及正确的空间构象,能够与表面的TCR结合刺激细胞增殖,偶联毒素后促进IGRP抗原特异性CTL细胞频率下降。本课题为此后真核系统表达抗原肽-MHCⅠ类分子复合物提供了参考,并且有助于靶向毒蛋白的体内研究。
[硕士论文] 李凯
微电子学与固体电子学 扬州大学 2017(学位年度)
摘要:三维SERS衬底具有优异的表面增强拉曼散射(SERS)性能,是当前SERS衬底研究的热点和难点。本论文通过采用新的制备方法,合成了三种新颖、高效、绿色的三维SERS衬底,研究了它们的SERS活性和增强机理,为探测农药和有机污染物提供了材料基础。本论文主要的创新结果如下:
  1.基于聚苯乙烯胶体球阵列模板,利用等离子体刻蚀和溅射技术,合成了多孔金@银空心球壳阵列。球壳表面具有均匀致密的纳米孔。这种既粗糙又多孔的周期性银球壳阵列展现了极强的SERS性能,并且信号一致性好。由于工艺简单,可以大尺度制备,有望在SERS传感领域得到实际应用。
  2.基于静电纺丝模板-置换反应策略,合成了由介多孔金纳米管构筑的三维薄膜。薄膜外观均匀,纳米尺度多介孔。重要的是,由于独特的结构,这种金纳米管薄膜具有优越的SERS性能。由于工艺简单、无污染、能大尺度制备,并且薄膜能够转移和随意裁剪,有望在SERS传感领域得到实际应用。
  3.基于水热法-CVD法,制备了海胆状的空心石墨烯球。这种微纳结构的三维石墨烯尺寸均匀,组成海胆状石墨烯的纳米棒是由纳米尺寸的石墨烯球组成。重要的是,这种石墨烯展现出很强的化学SERS增强能力。
[专利] 发明专利 CN201410667089.7
扬州大学 2015-03-25
摘要:本发明涉及一种在单层石墨烯膜上可控生长纳米结构的普适方法。本发明铜箔上生长单层石墨烯薄膜:首先选取铜箔在氩气和氢气混合气氛下于高温下退火,然后通入甲烷生长,最后关闭氢气和甲烷并在氩气气氛下冷却至室温,臭氧处理石墨烯:通过改变处理时间控制臭氧对样品处理的程度,沉积贵金属纳米结构:将臭氧处理过的石墨烯/铜箔衬底浸泡到硝酸银水溶液中,沉积不同时间,得到产物。本发明克服了物理方法制备工艺比较繁琐、昂贵的设备、高成本及化学方法石墨烯碳平面上的形核只发生在缺陷处等缺陷。本发明解决石墨烯基复合材料化学合成不形核问题,工艺简单、合成量大、绿色环保、成本低廉、制备过程可控且易于大量合成等优点。
[专利] 发明专利 CN201410667467.1
扬州大学 2015-03-11
摘要:本发明涉及一种在石墨烯片上可控制备纳米颗粒的普适方法。本发明选取氧化石墨烯胶体水溶液以及高纯Ag靶,将Ag靶悬置于氧化石墨烯胶体溶液中,并且用磁力搅拌器不停搅拌胶体水溶液,采用激光器辐照靶材,改变辐照时间长短和激光功率大小调控Ag纳米颗粒的密度和尺寸。本发明克服了化学方法的纳米颗粒在片上分布的不均匀导致限制了石墨烯或氧化石墨烯的应用以及物理方法制备石墨烯基复合材料时通常需要添加剂导致造成样品污染、仪器昂贵,制备成本高,不能大量制备等缺陷。本发明提出一种液相激光烧蚀法,无论石墨烯片上有无官能团都可以制备出石墨烯基复合材料,工艺简单,合成量大,绿色环保,可推广应用于工业领域。
摘要:本文论述了在基于S3C44B0X的嵌入式开发平台上移植了μCLinux和打开帧缓冲设备驱动程序的基础上,移植Microwindows的过程与方法,指出了在移植过程中需要注意的问题....
摘要:本文提出一种新颖的用手的动作来控制GUI输入接口的思路和具体实现技术.在将μCInux和Microwindows移植到基于ARM的嵌入式系统中后,利用加速度传感器ADXL105达到了用手的动作对GUI菜单进行控制的目的,从而实现了更自然的人机交互输入....
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