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[专利] 发明专利 CN201610598286.7
华南农业大学 2016-11-30
摘要:本发明公开了一种黄颡鱼生长特性相关的微卫星标记及其检测和应用;即在黄颡鱼GH序列上找到4个微卫星位点,通过筛选特异引物扩增微卫星位点,分析其与生长性状的关联性,找到对生长性状有利的优势基因型。结果表明其中有三个位点与生长性状有显著或极显著相关,位点GA与体重、体长、体高、体厚有显著关联,与全长、尾柄高有极显著关联,其中CD为优势基因型;位点TCTT与头长、尾柄高有显著关联,其中BD为优势基因型;位点AC与体厚、头长有显著关联,其中DD为优势基因型,利用本发明所述引物扩增得到的4个微卫星位点都具有较高的遗传多样性,且与生长性状有着显著或极显著的关联性,本发明对于分子育种实践具有十分重要的意义。
[专利] 发明专利 CN201610598287.1
华南农业大学 2016-11-30
摘要:本发明公开了一种黄颡鱼生长特性相关的SNP位点,为SEQ?ID?NO:1所示GH基因自5’端起第2100位,其碱基为A或G;或者为SEQ?ID?NO:1所示GH基因自5’端起第2285位;其碱基为T或C;或者为SEQ?ID?NO:1所示GH基因自5’端起第2822位,其碱基为A或G;本发明还通过筛选获得能够特异性检测出上述SNP位点的引物,本发明的SNP位点与黄颡鱼的全长性状密切相关,能够有效用于黄颡鱼的分子标记辅助育种,进而根据实际育种需求选择生长速度对黄颡鱼育种材料进行早期选择,能够进一步有效提高育种的效率和准确性。
[硕士论文] 朱雯璐
水生生物学 华南农业大学 2017(学位年度)
摘要:本研究对乌龟生长激素受体基因(Growth hormone receptor, GHR)cDNA进行克隆测序,分析GHR和类胰岛素生长因子(Insuline-like growth factors, IGF-I)在组织中的差异性表达。观察在饥饿状态下,乌龟各组织G HR和IG F-I的表达量以及肝脏中G HR和IG F-I的表达量随着再投喂发生的变化,为研究乌龟在饥饿胁迫下生长轴相关基因调控机制提供理论依据。
  1. GHR cDNA的分子特征
  根据亲缘关系较近物种的G HR的保守区域设计引物,通过克隆测序拼接后获得cDNA全长序列,共3936 bp,包括5′UTR219 bp,3′UTR1870 bp,开放阅读框1848 bp,共编码615个氨基酸,蛋白质分子量为68.97 KD,等电点(pI)为4.38,疏水性氨基酸占37.88%,极性不带电和氨基酸占31.59%,酸性氨基酸占13.05%,碱性氨基酸占17.44%。氨基酸序列中含量最高的为天冬氨酸(Asp),占9.01%,次之为亮氨酸(Leu),占8.86%,最低的是甘氨酸(Gly),占1.82%。
  2. GHR和IGF-I的差异性表达
  采用实时荧光定量PCR技术对GHR mRN A的差异性表达进行检测分析,结果表明:G HR mRN A在脑、心脏、肺、肌肉、肝脏、脾、肾、膀胱、胃、前肠、中肠、后肠、性腺和脂肪共14种组织中均有表达,在肝脏中表达量最高,在性腺中表达量最低。IG F-I mRN A在各组织中都有表达,在肝脏中表达量最高,在消化道中表达量较高,在性腺中表达量极低。
  3.饥饿处理后GHR和IGF-I的差异性表达
  饥饿28天,肺、肝脏、膀胱、胃、前肠、后肠、精巢和脂肪组织中GHR mRNA的表达量出现下调,特别在肝脏组织中GHR mRNA表达量显著下降(P<0.05)。在脑、心脏、肌肉、脾、肾和中肠中有上调作用,其中心脏和肌肉中G HR mRN A表达量上升显著(P<0.05)。
  饥饿28天,大部分组织中IGF-I mRNA表达量出现下调现象,肝脏组织中IGF-I mRNA表达量显著下降(P<0.05)。在脑、心脏、肌肉、脾、肾和中肠中有上调作用,其中心脏和肌肉中IGF-I mRNA表达量上升显著(P<0.05)。
  4.饥饿再投喂处理后GHR和IGF-I的差异性表达
  饥饿处理第1天,雄性乌龟肝脏中GHR mRNA的表达量显著下降(P<0.05),第7天回升到对照组水平,之后持续下降,第21天显著下降(P<0.05)。再投喂后GHR mRNA呈现上升趋势,但仍显著低于对照组(P<0.05);雌性乌龟肝脏组织中GHR mRNA变化趋势与雄性乌龟相似,在饥饿第14天表达量上调达到显著水平(P<0.05),饥饿第28天下调显著(P<0.05),再投喂第28天其表达量恢复,与对照组无显著差异。
  饥饿对雄性乌龟肝脏中IG F-I mRN A表达量的影响呈现先上调后下降的趋势,饥饿第1天表达量显著上升(P<0.05),接着下降后保持稳定,再投喂后缓慢恢复到对照组的水平。两性的肝脏组织中IG F-I mRN A变化趋势一致,在饥饿第1天和第7天表达量显著上升(P<0.05),再投喂第7天表达量显著下降(P<0.05),第49天表达量显著高于对照组(P<0.05)。
  乌龟面对饥饿胁迫时,G HR和IG F-I mRN A的表达量变化规律与变温动物的鱼类相似,饥饿胁迫下肝脏G HR和IG F-I mRN A表达量呈下降趋势,并能在饥饿较长时间后达才到显著下降,与鱼类等变温动物更为接近。
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