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摘要:目的 小鼠体内诱导建立获得性S180多药耐药(multi-drug resistance,MDR)模型及其稳定性观察.方法 模拟临床顺铂+氟尿嘧啶+环磷酰胺(PFC)化疗方案给药,分三个阶段剂量递增法诱导S180腹水瘤小鼠,建立获得性S180MDR实验模型.采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术动态检测各阶段所诱导细胞对化疗药物的耐药倍数、细胞内药物积累量及细胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)功能活性,并通过检测以上指标观察各阶段所诱导细胞停药后的耐药稳定性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各阶段所诱导细胞MDR-1 mRNA、多药耐药相关蛋白-1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP-1) mRNA的表达量.结果 与亲本细胞对照组比较,各阶段所诱导S180细胞对化疗药物的耐药倍数随着诱导时间延长和剂量增高而逐渐增大,细胞内阿霉素(adriamycin,ADR)积累量逐渐减少,细胞P-gp功能活性逐渐增强;各阶段所诱导S180细胞MDR-1mRNA、MRP-1 mRNA的表达量也与诱导时间和给药剂量呈正相关;第一、二和三阶段所诱导细胞的稳定耐药时间分别为1周、2周和3周左右.结论 模拟临床PFC化疗方案给药,采用分阶段剂量递增小鼠体内诱导法可建立耐药强度高、稳定时间长的获得性S 180MDR实验模型....
摘要:目的 研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)对小鼠肝癌的抑制作用及其凋亡机制.方法 体外培养H22小鼠肝癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖;建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型,连续灌胃给药9天后剥离瘤块、称取瘤质量,计算对肝癌移植瘤生长的抑瘤率;应用荧光染色法观察H22肝癌细胞的凋亡形态、计数凋亡细胞并计算凋亡率;应用流式细胞术检测H22肝癌细胞的凋亡率;应用ELISA法检测H22肝癌细胞培养上清中基因蛋白Survivin的含量.结果 GBEE(0.625 ~ 160μg·ml-1)对H22细胞的体外增殖皆有抑制作用,抑制率为1.57%~54.97%,具有浓度依耐性;GBEE (50~ 200mg·kg-1)对小鼠H22肝癌移植性实体瘤生长具有抑制作用,抑制率分别为34.76%、40.11%和50.80%,具有量效关系;GBEE可诱导H22细胞凋亡,抑制Survivin蛋白表达.结论 GBEE对小鼠肝癌具有抑制作用,其作用机制与下调Survivin表达而诱导癌细胞凋亡有关....
[专利] 发明专利 CN201610916406.3
扬州大学 2017-05-10
摘要:本发明涉及一种亚微米级银杏外种皮多糖及其制剂的制备方法。将被乙醇浸泡过的银杏外种皮置于煮提锅中常规加水煎煮,过滤,减压浓缩,向浓缩液中加入乙醇,静置沉淀,将沉淀物真空干燥或冷冻干燥,得银杏外种皮多糖粗粉;将该粗粉加入气流粉碎机,调节分级机频率和进料速度,在适当压力下粉碎数次,即可得到亚微米级银杏外种皮多糖。将该多糖加入赋型剂或矫味剂和防腐剂制成抗肿瘤胶囊制剂或抗肿瘤口服液制剂。该方法得到的银杏外种皮多糖粒径达到亚微米级,水溶性好,效价强度高,可以制备成抗肿瘤固体和液体制剂。
[专利] 发明专利 CN201610916393.X
扬州大学 2017-02-15
摘要:本发明涉及一种水溶性银杏外种皮提取物及其制剂的制备方法。将被乙醇浸泡过的银杏外种皮置于煮提锅中常规加水煎煮,过滤,减压浓缩,向浓缩液中缓慢加入乙醇,采用磁力搅拌器快速搅拌,静置沉淀,将沉淀物冷冻干燥或真空干燥,即可得到水溶性银杏外种皮提取物;该提取物的主要成分为蛋白多糖,具有抗肿瘤活性。将该提取物加入赋型剂或矫味剂和防腐剂制成抗肿瘤胶囊制剂、片剂或口服液制剂。该方法得到的银杏外种皮提取物粒径小,水溶性好,蛋白多糖含量和抗肿瘤效价强度皆有所提高,可以制备成抗肿瘤固体和液体制剂。
[专利] 发明专利 CN201610916392.5
扬州大学 2017-01-04
摘要:本发明涉及一种脱色的具有抗肿瘤活性的银杏外种皮提取物及其制剂的制备方法,属于中药制药技术领域。将银杏外种皮置于煮提锅中常规加水煎煮后减压浓缩,将乙醇加入浓缩液中,静置后将沉淀物再用高浓度乙醇洗涤数次后真空干燥或冷冻干燥,得银杏外种皮提取物粗粉;将此粗粉配制成水溶液,加入大孔吸附树脂后于恒温水浴摇床,固定转速反应后,过滤去除树脂,向滤液中再次加入乙醇,静置沉淀。将沉淀物用高浓度乙醇洗涤数次后真空干燥或冷冻干燥,制得脱色的具有抗肿瘤活性的银杏外种皮提取物;将此干粉加入少量赋型剂或矫味剂和防腐剂,制成胶囊剂、片剂或口服液制剂。该脱色的具有抗肿瘤活性的银杏外种皮提取物颜色柔和,观感佳,其多糖与蛋白质含量之和大于80%,抗肿瘤效果好。且制备工艺经济实惠,适合工业化大生产。
[专利] 发明专利 CN201610916394.4
扬州大学 2017-01-11
摘要:本发明涉及一种水溶性银杏外种皮多糖及其制剂的制备方法。将被乙醇浸泡过的银杏外种皮置于煮提锅中常规加水煎煮,过滤,减压浓缩,向浓缩液中加入乙醇,静置沉淀,将该沉淀物置于球磨罐中,调节转速,正反交替运行,循环粉碎数次,真空干燥或冷冻干燥,即可得到水溶性银杏外种皮多糖。将该多糖加入赋型剂或矫味剂和防腐剂制成抗肿瘤胶囊制剂或抗肿瘤口服液制剂。该方法得到的银杏外种皮多糖粒径减小,水溶性和抗肿瘤效价强度皆明显提高,可以制备成抗肿瘤固体和液体制剂。
[专利] 发明专利 CN201510379598.4
扬州大学 2015-09-23
摘要:本发明提供一种小鼠肉瘤180多药耐药细胞株的体内构建方法,属于生物医学技术领域。选用顺铂、氟尿嘧啶和环磷酰胺三种药物体内给药并逐渐增加剂量诱导S180腹水瘤小鼠,成功构建了S180多药耐药细胞株,对阿霉素具有交叉耐药性,耐药强度较高,耐药稳定时间较长。本发明为研究肿瘤多药耐药机制、筛选各类抗肿瘤药物、研发包括中药或天然药物类在内的肿瘤耐药逆转药物提供了小鼠肿瘤多药耐药细胞株与动物模型,具有很好的应用前景。
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