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摘要:目的 探索南蛇藤提取物(COE)靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与转移的分子机制.方法 用siRNA技术,构建敲除mTOR基因的HepG2细胞模型,MTT法检测COE对HepG2/mTOR-细胞增殖能力的影响.划痕实验及Transwell实验检测药物对细胞侵袭转移能力的影响.Western blotting法分析用药后基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平变化.结果 成功构建敲除mTOR表达的HepG2/mTOR-细胞.COE明显抑制HepG2/mTOR-细胞的增殖(P<0.05),并呈浓度依赖性.划痕实验结果显示COE降低了细胞迁移能力.Transwell实验结果表明,COE (80 mg/L)明显减少了穿膜细胞数目(P<0.05).Western blotting结果显示,COE(80 mg/L)明显降低MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平(P<0.05).结论 COE明显抑制HepG2/mTOR-细胞的增殖与侵袭转移,mTOR通路可能是其抑制肝癌的潜在作用靶点之一....
摘要:目的 观察南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)联合顺铂(Cisplatin,DDP),对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的协同作用.方法 将对数期HepG2细胞,分为对照组(不加药)、COE组(40 mg·L-1)、顺铂组(DDP 2 mg·L-1)及联合组(同时加入40 mg·L-1的COE和2 mg· L-1的DDP).药物作用24 h后,MTT法计算细胞增殖抑制率,划痕实验及Transwell实验分析细胞的侵袭迁移,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法分析上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)以及凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达水平.结果 与对照组相比,各组药物均能抑制肝癌细胞的增殖,缩短迁移距离,促进细胞凋亡(P<0.05).Western blot结果表明,与对照组相比,各组药物均能抑制人肝癌HepG2细胞内N-cadherin、vimentin及Bcl-2蛋白的表达水平,同时增加E-cadherin及Bax蛋白的表达量.与单一用药相比,COE联合DDP用药,作用效果更显著(P<0.05).结论 南蛇藤提取物可协同顺铂,促进肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞侵袭迁移,其分子机制可能与上皮间质转化及Bcl-2/Bax通路有关....
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