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摘要:目的 探讨上尿路尿路上皮癌(UTUC)手术治疗后膀胱复发的危险因素.方法 收集2008年1月至2017年12月在我院行手术治疗且随访资料完整的445例UTUC患者病例资料.分析患者的基线数据、手术方法、术后病理结果、随访数据等资料,采用单因素和多因素Cox回归模型分析与UTUC术后膀胱复发相关的危险因素.结果 本研究纳入UTUC患者的术后中位随访时间为33.5个月,UTUC术后膀胱复发率为18.0%(80/445),其中66.2%(53/80)的患者膀胱初次复发发生于术后1年内.单因素Cox回归分析发现患者年龄≥65岁(OR=1.99,95%CI:1.22~3.22,P<0.01)、有膀胱癌病史(OR=2.69,95%CI:1.71~4.24,P<0.01)、行保留肾单位肿瘤局部切除术(OR=2.15,95%CI:1.30~3.57,P<0.01)、输尿管下段肿瘤(OR=1.40,95%CI:1.11~1.78,P<0.01)与UTUC术后膀胱复发密切相关.将上述危险因素纳入多因素Cox回归模型,发现其均为UTUC术后膀胱复发的独立危险因素.结论 年龄≥65岁、有膀胱癌病史、行保留肾单位肿瘤局部切除术、输尿管下段肿瘤是UTUC术后膀胱复发的独立危险因素,存在上述危险因素的UTUC患者术后需加强随访监测,定期复查膀胱镜.
摘要:膀胱癌是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤,但其诊治进展较为缓慢.随着分子生物学的快速发展和生物检测技术的不断涌现,通过基因分析技术对膀胱癌进行分子分型有望成为提高膀胱癌诊治水平的重要手段.本文就近年来膀胱癌分子分型的研究进展以及膀胱癌分子分型对预测药物反应性和判断预后的临床价值作一综述.
摘要:目的 比较机器人辅助根治性膀胱切除术(robot-assisted radical cystectomy,RARC)与开放式根治性膀胱切除术(open radical cystectomy,ORC)术后早期并发症的发病特点.方法 回顾性分析2013年12月至2015年9月我们收治的148例行根治性膀胱切除术患者的临床资料.其中113例行ORC(ORC组),男98例,女15例,平均年龄(67.2±9.9)岁;35例行RARC(RARC组),男30例,女5例,平均年龄(64.5±8.5)岁.比较两组患者的手术时间、术中出血量、术中淋巴结清扫数量、术后输血例数、术后排气时间、恢复进食时间、引流管拔除时间、开始下床活动时间、术后90 d内早期并发症发生情况等.结果 ORC组和RARC组的手术时间分别为(315±102) min和(450 ± 87) min,术中出血量分别为(539 ± 400) ml和(332±193) ml,差异有统计学意义(P<0.05).ORC组和RARC组术后输血例数分别为26例和6例,术中淋巴结清扫数量分别为(13.1±5.1)枚和(13.0±4.1)枚,术后排气时间分别为(4.1±2.9)d和(4.1±1.6)d,恢复进食时间分别为(5.0±4.0)d和(4.4±2.1)d,引流管拔除时间分别为(8.9±5.5)d和(10.8±5.1)d,开始下床活动时间分别为(4.5±2.4)d和(3.9±1.1)d,术后住院时间分别为(13.2 ±11.5)d和(12.4 ±5.2)d,差异均无统计学意义(均P>0.05).ORC组和RARC组术后并发症发生率分别为38.1% (43/113)和25.7% (9/35),差异无统计学意义(P>0.05),Clavien Ⅱ级及以上并发症例数分别为1例和20例,差异有统计学意义(P<0.05).ORC组术后并发症为肠梗阻(19例)、感染(14例)、淋巴漏(18例),RARC组并发症为肠梗阻(4例)、淋巴漏(5例),RARC组术后感染例数明显少于ORC组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与ORC比较,RARC能显著减少患者术中出血量,降低术后早期并发症的发生率.
[硕士论文] 戴利和
外科学(泌尿外) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:背景:
  在中国,膀胱癌(Bladder cancer,BC)发病率居泌尿系统恶性肿瘤之首。依据生长方式的不同,膀胱癌可以分为非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle-invasive bladder cancer,NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(muscle-invasive bladder cancer,MIBC),前者占初诊膀胱癌患者的70%左右,主要采用经尿道膀胱恶性肿瘤电切术(TURBT),5年生存率达90%,NMIBC患者术后易复发进展,约15%术后会进展为MIBC,患者预后变差;后者占30%左右,主要采用根治性膀胱切除术,术后约50%发生转移,发生转移后5年生产率仅为5%。膀胱癌侵袭进展对人类健康造成很大的威胁,明确膀胱癌侵袭进展的机制,对改进膀胱癌现有治疗和预后判断具有重要作用。
  癌蛋白Gankyrin在众多恶性肿瘤的形成中发挥促癌作用。Gankyrin最初在肝癌研究中被发现,近来研究表明Gankyrin在结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肺癌和食道癌等多种恶性肿瘤发挥促癌作用,且与肿瘤恶性程度有关。目前,Gankyrin在膀胱癌发生、发展中的具体作用和分子机制尚未明确。
  前期对10例膀胱癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织进行转录组测序,结果显示Gankyrin在膀胱癌组织中表达高于癌旁正常组织,根据膀胱癌经典分子起源学说及最新膀胱癌组织高通量测序结果,P53信号通路与膀胱癌侵袭性高度相关,而根据文献检索,Gankyrin为P53分子的上游调控分子,因此推测Gankyrin在膀胱癌的侵袭进展过程中发挥重要作用。
  目的:
  研究Gankyrin在膀胱癌中的表达情况,探讨其在膀胱癌侵袭进展中的作用及机制,以期为膀胱癌靶向治疗和预后判断提供新依据。
  方法:
  1.对10对膀胱癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织进行转录组测序,根据膀胱癌发生分子机制假说及文献报道,筛选出Gankyrin作为研究对象。
  2.提取90对膀胱癌组织及癌旁正常组织的RNA及20对膀胱癌组织及癌旁正常组织的总蛋白,分别通过qRT-PCR和western blot验证Gankyrin在膀胱癌中的表达情况。
  3.通过公共数据库Oncomine挖掘数据,验证Gankyrin在膀胱癌患者的肿瘤组织中存在高表达。
  4.通过免疫组化,对3例肌层浸润性膀胱癌病理大切片行Gankyrin染色,分析肿瘤侵犯粘膜层、浅肌层、深肌层时的表达情况,研究其和膀胱癌侵袭性的关系;分析130例膀胱癌患者肿瘤组织中Gankyrin的表达量,探讨其与膀胱癌临床病理资料和预后的关系。
  5.通过western blot和qRT-PCR检测Gankyrin在正常尿路上皮、2种非肌层浸润性膀胱癌、2种肌层浸润性膀胱癌细胞系中的表达量。
  6.利用慢病毒载体构建Gankyrin稳定过表达的BIU87细胞系和Gankyrin稳定敲减的UMUC3细胞系,通过EdU细胞增殖试验和NOD/SCID小鼠的皮下成瘤实验,研究Gankyrin过表达和敲低对膀胱癌细胞增殖、成瘤能力的影响。通过细胞划痕实验和Transwell小室迁移侵袭实验,检测Gankyrin对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响。通过流式细胞术检测Gankyrin对膀胱癌细胞凋亡的影响。
  7.利用BBN诱导小鼠自发产生膀胱癌,通过免疫组化检测Gankyrin在小鼠自发膀胱癌模型中的表达情况并探讨其意义。
  8.通过连续切片免疫组化染色,分析32例膀胱癌组织中Gankyrin和MDM2表达的相关性,利用western blot检测Gankyrin过表达和敲低后MDM2的表达水平,通过免疫荧光检测Gankyrin和MDM2在膀胱癌中的亚细胞定位,利用蛋白免疫共沉淀检测Gankyrin与MDM2在膀胱癌中的相互作用,以探讨Gankyrin调控膀胱癌侵袭进展的可能机制。
  结果:
  1.转录组测序结果表明Gankyrin表达量在9例膀胱癌组织中高于对应癌旁正常尿路上皮组织,对10对癌及癌旁组织RPKM值进行统计分析,Gankyrin在膀胱癌组织中表达显著上调(P<0.05),差异表达倍数为1.21倍。
  2.通过qRT-PCR检测90例膀胱癌患者中Gankyrin mRNA的表达情况,发现其中66例患者肿瘤组织中Gankyrin mRNA表达量高于癌旁正常组织,24例患者中肿瘤组织Gankyrin表达量低于癌旁组织,Gankyrin高表达比例为73.3%。对20对膀胱癌组织及癌旁正常组织进行western blot检测,发现其中17例样本的肿瘤组织中Gankyrin蛋白的表达量明显高于癌旁正常组织。
  3.公共数据库Oncomine检索发现Dyrskjot Bladder3数据集中,Gankyrin mRNA在膀胱癌患者肿瘤组织中的表达含量高于正常尿路上皮组织(P<0.01)。
  4.在3例膀胱癌病理大切片中,Gankyrin表达量从粘膜、浅肌层到深肌层逐渐升高;130例免疫组化的结果显示,Gankyrin表达量在肌层浸润性膀胱癌中显著高于非肌层浸润性膀胱癌(P<0.01)、在高级别膀胱癌组织中显著高于低级别组织(P<0.01),Gankyrin高表达患者总体生存期、疾病特异性生存期和无进展生存期显著低于低表达患者(均P<0.001),多因素分析显示,Gankyrin为膀胱癌不良预后的独立危险因素。
  5.western blot和qRT-PCR结果显示,Gankyrin在膀胱癌细胞系中的表达量高于正常尿路上皮细胞系,Gankyrin在NMIBC细胞系BIU87和SW780中表达量低,而在MIBC细胞系UMUC3和J82中存在高表达。
  6.成功构建Gankyrin稳定过表达的BIU87细胞株和Gankyrin稳定敲低的UMUC3细胞株,EdU细胞增殖实验表明Gankyrin稳定过表达的BIU87细胞增殖能力显著强于对照组(P<0.01),而Gankyrin稳定敲低的UMUC3细胞的增殖能力显著降低(P<0.001);Gankyrin稳定过表达后的BIU87细胞小鼠皮下肿瘤增殖能力明显强于对照组(P<0.001),而Gankyrin稳定敲低的UMUC3细胞小鼠皮下肿瘤增殖能力显著弱于对照组(P<0.001);划痕实验和Transwell小室迁移实验显示,Gankyrin稳定过表达的BIU87细胞迁移能力显著增强,Gankyrin稳定敲低的UMUC3细胞迁移能力显著下降;Transwell小室侵袭实验显示,Gankyrin过表达可显著增强膀胱癌细胞的侵袭能力,而Gankyrin敲低可显著抑制膀胱癌细胞的侵袭能力。流式细胞术检测结果显示Gankyring过表达或敲低并不影响BIU87或UMUC3细胞的凋亡。
  7.成功利用BBN诱导小鼠自发形成膀胱癌,免疫组化结果显示,Gankyrin在膀胱癌中的表达量高于正常尿路上皮组织,在NMIBC、MIBC及肺转移组织中表达量逐渐升高。
  8.32例膀胱癌连续切片免疫组化显示,Gankyrin和MDM2呈正相关(R=0.583,P<0.001)。上调BIU87细胞Gankyrin表达量,MDM2表达相应上调,下调UMUC3细胞Gankyrin表达量,MDM2表达相应下调,免疫荧光显示Gankyrin和MDM2在BIU87细胞及膀胱癌组织中存在共定位,蛋白免疫共沉淀显示Gankyrin和MDM2在BIU87细胞中相互结合。
  结论:
  癌蛋白Gankyrin在膀胱癌组织中显著上调,Gankyrin的表达水平升高与膀胱癌的分期分级升高密切相关,且是膀胱癌不良预后的独立危险因素。上调Gankyrin的表达可以增强膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,下调Gankyrin的表达显著抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Gankyrin在膀胱癌中与MDM2直接结合,为调控膀胱癌侵袭进展的潜在分子机制。
[期刊论文] 戴利和 马重 曾蜀雄
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CSTPCD 北大核心
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摘要:膀胱癌是我国常见的恶性肿瘤,复发和转移是常见死因.循环肿瘤细胞作为无创实时肿瘤检测指标,在恶性肿瘤诊疗中具有潜在的应用价值.因此,我们回顾了近十年来膀胱癌循环肿瘤细胞的研究,简述了其检测方法的发展情况以及在膀胱癌诊断、疗效及预后监测方面的应用价值.
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