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北大核心 CSTPCD CSCD
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摘要:从不同来源的样品中分离得到36株乳酸菌,对其进行常见抗生素如氯霉素、四环素、红霉素抗药性分析,结果表明,26株菌具有抗药性,其中4株携带抗生素抗性基因,并且菌株Enterococcus faecium KN9所携带的四环素抗性基因tet (M)和tet (L)能通过接合作用,转移到受体菌Lactococcus lactis MG1614中.对这些乳酸菌产生有害代谢产物分析结果表明,部分菌株可以产生生物胺,所有的菌株都不产生硝基还原酶和偶氮还原酶.所以,本实验分离到的大部分乳酸菌是安全的,只有携带有抗四环素基因的E faecium KN9具有潜在的安全隐患.因此,需要在食用前对乳酸菌进行安全性评价,以减少可能的安全隐患....
[硕士论文] 徐毅
动力工程 山东大学 2019(学位年度)
摘要:目的:探讨六安市7家二级医疗机构正在使用中的一次性引流袋刻度标示量与实际引流量偏差非线性关系.方法:目测一次性引流袋其刻度标示量并与用注射器或量筒测得的实际引流量相比较.结果:一次性引流袋刻度标示量均和实际引流量不符,计算偏差结果并用非线性关系分析.结论:根据一次性引流袋刻度标示量与实际引流量偏差非线性关系分析,可以用其公式直接计算实际引流量也可以利用公式计算出实际引流量对照表,这样更方便直观,从而避免护士每次用容器测量实际引流量,大大减少了护士的工作量.同时,这种引流袋价格便宜既能减轻患者经济负担又能降低临床单元费用....
[博士论文] 徐毅
通信与信息系统 山东大学 2015(学位年度)
摘要:无线传感器网络是由部署在监测区域内的大量低成本、低功耗的传感器节点通过自组织方式形成的网络,传感器节点具备感知、数据处理、存储和无线通信能力,通过协作的方式采集、处理和传输网络监测区域内的信息。随着近年来半导体硬件制造以及软件算法技术的提高,包括我国在内的世界上许多国家都加大了对无线传感器网络的研究投入和力度,使得无线传感器网络在环境监测、军事侦察、道路交通、医疗卫生以及空间探测等多个领域得到空前的发展。
  无线传感器网络的路由协议与其它网络相比还不够成熟,没有统一的标准,但同时也意味着具有很大的研究空间,诞生了大量重要研究成果。部分研究从转发效率着手,致力于提高带宽利用率和减少延时;部分研究从能耗性着手,致力于降低网络工作能耗,延长网络寿命。由于无线传感器网络发挥作用的环境通常是人迹罕至,对传感器节点进行维护是一项很困难甚至无法完成的任务,所以从实用角度来看,对无线传感器网络路由协议的能耗性研究更有意义。研究者们对于无线传感器网络路由协议能耗性的研究主要从两个方向入手:一是减少转发次数,二是减少转发数据量。
  本文结合不同的应用,利用机会主义思想,对无线传感器网络路由协议进行研究,重点研究了在不同应用环境下的低能耗的无线传感器网络路由协议。本文从减少转发次数入手,分别研究平面型固定基站以及移动汇聚节点的路由协议(第三章、第五章、第六章);又从减少转发数据量角度入手,研究层次型路由协议(第四章)。本文首先研究在单个数据源连续发送多个数据的应用下,需要一种基于数据和查询的平面路由协议,且能够比现有的定向扩散路由协议更节省能耗(第三章)。当应用环境变化,一定区域的监测数据互相存在冗余度,网络中存在多个数据源,甚至全部节点均为数据源的情况下,平面路由协议将不能适用,需要能够有效进行数据融合的层次路由协议来发挥作用。然后考虑到层次路由协议簇头与基站直接通信能量消耗过大,且当网络通信环境恶劣时重传数据会造成能量过度消耗,本文研究了采用簇头多跳传输方式并能在恶劣通信环境下减少数据重传能量消耗的层次路由协议(第四章)。无论平面或是层次路由协议,当基站固定时,传感器节点的分布总会造成能量消耗的不均衡。本文最后研究了基于移动汇聚节点的路由协议来解决网络中能量消耗不均衡的问题,提出的两种路由协议分别适用于较密集的网络应用和较稀疏的网络应用(第五章、第六章)。本论文的主要创新工作如下:
  1、通过对平面路由协议的研究提出了一种基于机会路由的定向扩散组播协议(DDOR)。定向扩散路由协议通过兴趣扩散来建立最优路径,机会路由通过机会转发来提高转发效率,DDOR将两者的优势有效结合,建立基于最优路径的转发列表。在数据传输过程中,数据包从转发列表中提取组播目的节点集合,对数据传输路径进行优化,减少转发次数,实现对网络能耗的节省。DDOR通过限制组播目的节点集合的节点数目对协议性能进一步优化,缩短节点间的转发等待时间,从而减少源节点到基站数据传输的延时。
  2、通过对层次路由协议的研究提出了一种基于机会路由的多层次LEACH协议(LEACH-MLOR)。LEACH-MLOR融合了两种层次结构,分别是基于不同功率范围的节点等级和基于节点相互关系的分簇结构,根据节点等级来优化LEACH协议中选择簇头的门限,并根据节点等级来建立簇头之间的多跳路径,协议算法简单且有效。LEACH-MLOR基于机会路由的思想提出一种辅助节点机制来减少簇间通信失败时数据重传造成的能量过度消耗,由辅助节点以低功率重传数据来代替簇头间高功率的重传。
  3、通过对移动无线传感器网络的研究提出了一种基于灯塔-浮标结构的移动无线传感器网络路由协议(BBR-MS)。BBR-MS提出一种利用灯塔节点代替汇聚节点进行兴趣查询的机制,在兴趣查询的同时建立树状转发结构,并加入可以与汇聚节点直接通信的浮标节点,避免了通信路径中最后一跳的额外开销。BBR-MS通过引入移动汇聚节点和减少网络结构刷新次数,实现网络总体能耗的降低和各节点能耗的相对均衡。网络结构满足重连通条件时,基于重连通图的优化机制优先选择通信负担较轻的节点来建立树状转发结构。通过优化机制,可以使得网络内节点的能量消耗更加均衡。
  4、通过对移动轨迹的研究提出了一种基于热点追踪的移动无线传感器网络路由协议(HTR-MS)。HTR-MS提出一种热点追踪+热点时间学习的路由机制,更适用于对能耗要求高的具有移动Sink的稀疏无线传感器网络中。采用热点区域的形式,HTR-MS比Bread Crumbs、DDRP协议能够更快的建立起转发梯度网,并且在转发梯度网的建立过程中不产生额外的通信开销。采用热点学习的形式,快速有效的完成转发梯度网的建立以及更新,且不产生额外的通信开销。
[博士论文] 徐毅
微生物学 山东大学 2012(学位年度)
摘要:乳酸菌是一类能够利用碳水化合物产生乳酸的革兰氏阳性细菌的统称,是一群由多个属组成的庞杂细菌群体,主要包括乳球菌属(Lactococcus),乳杆菌属(Lactobacillus),片球菌属(Pediococcus),链球菌属(Streptococcus),肠球菌属(Enterococcus),双歧杆菌属(Bifidobacterium)等。大多数乳酸菌对人体有益,它们通过降解糖类、蛋白和脂肪产生多种生物活性物质促进人体健康。此外,大部分乳酸菌本身就是益生菌(probiotics),其益生性质体现在维持人体肠道菌群平衡、调节人体免疫以及抑制有害病原微生物的生长等多个方面。
   乳酸菌有些益生功能与细菌表面性质有关,比如絮凝(aggregation)、黏附(adhesion)、自溶(autolysis)等。自溶(自裂解),是指细菌在生长繁殖的某个阶段因肽聚糖水解酶(自溶酶)的作用而引起的自身裂解的现象。自溶酶除了裂解细胞发生自溶外,还参与细菌生长代谢的多个生理过程,如新合成肽聚糖的延伸、细胞增大以及子代细胞的产生等,是一类极其重要的细胞壁水解酶类。研究表明,有些抗生素、细菌素的抗菌作用也是通过肽聚糖水解酶的活性而完成的,因此对肽聚糖水解酶的深入认识对于揭示乳酸菌的益生作用以及充分发挥抗生素的杀菌作用尤为重要。
   除了作为益生菌剂,乳酸菌还是重要的工业微生物菌株,在食品加工、乳制品发酵等领域具有悠久的应用历史,是公认的安全级(GenerallyRegardedasSafe,GRAS)微生物。有些乳酸乳球菌和乳杆菌作为发酵剂广泛应用于奶酪的生产。其中,奶酪的成熟过程是一个缓慢而昂贵的过程,而乳酸菌发酵剂的自溶释放出的脂肪酶、蛋白酶有利于风味物质的形成和奶酪的成熟,因此实时控制和深入认识自裂解机制是加速奶酪成熟的有效手段。截至目前,很多研究都着重于通过基因工程的方法构建可控裂解的乳酸乳球菌发酵剂菌株从而达到控制与缩短奶酪成熟时间的目的。而遗憾的是,发酵剂菌株的过度裂解会导致正常细胞数量减少,从而引起乳糖的过量剩余和奶酪性质的不稳定。所以,在非发酵剂菌株(主要指乳酸杆菌)中构建可控裂解系统可有效避免上述问题的发生。
   乳酸菌基因组小、代谢简单、蛋白酶活力弱、易于进行人工改造等特征使其成为微生物学及分子生物学研究中的重要模式菌株。其中乳酸乳球菌已建立起较完善的遗传操作系统,利用严谨型启动子NisA可控表达系统(thenisin-controlledexpression,NICE)已实现了多种异源蛋白的表达。由于乳酸菌是单分子膜,遗传操作系统可控性强,它还是膜蛋白表达的良好宿主。
   本论文主要以乳酸乳球菌与干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)为实验材料,以自溶性质以及膜蛋白表达为研究重点,构建了一个新的高效乳酸菌膜蛋白表达载体,实现了绿色巴夫藻△4去饱和酶和嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶在乳球菌中的过量表达;并且对乳酸菌的自溶性质以及相关肽聚糖水解酶的鉴别与生物特性进行了研究和探讨。具体的工作内容和取得的结果如下:
   1.多不饱和脂肪酸合成相关功能基因的克隆与表达
   多不饱和脂肪酸是人体所必需却不能自然合成的重要营养物质,其相关合成基因的克隆和表达是研究者关心的热点。本文以绿色巴夫藻(Pavlovaviridis)为材料,通过反转录、SEFA-PCR(self-formedadaptorPCR)、SOE(splicingbyoverlapextension)等方法分别扩增得到了在EPA(二十碳五烯酸)与DHA(二十二碳六烯酸)合成中起重要作用的△5去饱和酶和△4去饱和酶的基因全长及表达序列。与之前实验室克隆和特征化的C20延伸酶(△5延伸酶)一起,完成了对绿色巴夫藻中EPA和DHA合成所涉关键基因的全部克隆工作。其中,△4去饱和酶与其同源蛋白有75%的同源序列。为了研究该酶的性质,在尝试以大肠杆菌和毕赤酵母为宿主利用多种载体表达△4去饱和酶时均没有成功,主要原因是膜蛋白的过量表达对宿主细胞有毒害作用。随后,将来源于枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、能够自动折叠于细胞膜的整合型膜蛋白短肽Mistic与△4去饱和酶进行融合连接,结果实现了△4去饱和酶在大肠杆菌的过量表达。目的蛋白条带在SDS-PAGE中显著可见,此研究成为真核微藻多不饱和脂肪酸去饱和酶基因在原核生物中高效表达的首个成功例证。
   2.乳酸乳球菌高效膜蛋白表达载体的构建与应用
   膜蛋白对真核与原核细胞的生命活动具有重要作用,比如信号传导、能量转换、营养物质转运等。在已测序的基因组中,膜蛋白占据所有开放阅读框(ORF)的20%到25%。可是相比于可溶蛋白的研究,已明确结构特征和生化基础的膜蛋白数量很少,而通过异源表达制备具有高分辨率结构的膜蛋白则更是屈指可数。阻碍膜蛋白研究的一个重要瓶颈就是膜蛋白过量表达。在Mistic介导△4去饱和酶在大肠杆菌表达工作的基础上,进一步以乳酸乳球菌为宿主,以pNZ8148为骨架,结合Mistic结构元件构建了一个膜蛋白表达载体pNM110,探讨和改进膜蛋白在乳酸乳球菌中的表达。通过Mistic与GFP的融合表达和GFP荧光的检测,证实了短肽Mistic可以成功插入乳酸乳球菌的细胞膜,并且具有促进膜蛋白过量表达的潜力。为了验证该载体在乳球菌中表达膜蛋白的有效性,将克隆自绿色巴夫藻的△4去饱和酶基因pkjDes4和嗜酸乳杆菌的亚油酸异构酶基因pkjLi分别与Mistic融合连接,构建了重组载体pNMDes4和pNMLi,并成功实现了上述两种膜蛋白在乳酸乳球菌中的过量表达,其表达水平分别达到了膜蛋白总量的4.4%与45.2%,这个表达水平是目前以乳酸乳球菌为宿主表达膜蛋白产量最高的。为了进一步验证所表达亚油酸异构酶的功能,将重组的乳酸乳球菌菌株与底物亚油酸在一定条件下培养,结果发现重组乳酸菌具有转化亚油酸生成共轭亚油酸的能力,产量可达0.852mg/ml,转化率为28.4%,该结果首次实现了乳杆菌亚油酸异构酶的异源表达和功能鉴定。
   3.乳酸菌自溶性质的研究
   细菌编码的自溶酶除了用于细胞分裂产生子代细胞外,对于乳酸菌来说,还有一个重要的作用是在乳酪成熟中释放出胞内水解酶类而有助于风味物质的形成和缩短成熟时间;同时自溶酶具有对病原微生物的杀菌效果而可作为杀菌剂用作菌种保藏。因此对自溶酶和自溶表型的研究为乳酸菌的研究热点之一。本文采用GM17和MRS选择培养基,结合不同培养条件,先后从发酵乳、鸡肠道和人粪便等不同生境中分离得到了多株乳酸菌并对其自溶能力进行了测量和筛选。结果发现,同种细菌不同菌株之间的自溶能力有显著差异,这说明自溶具有高度菌株特异性。此外,粪肠球菌的自溶能力明显强于乳酸乳球菌。以抗生素为代表的生长抑制剂的使用是诱发细菌自溶现象的一个重要途径。本文检测了多种生长抑制剂在不同生长时期对乳酸乳球菌自溶性质的影响。结果表明,某些抗生素能够在碳源严格限制性培养基中对处于特定生长时期的乳酸乳球菌产生显著裂解的现象,而且抑制细胞壁合成类抗生素的促自溶效果更为明显,这些结果对于研究抗生素与乳酸菌自溶的关系以及乳酸菌自溶的调控机制提供了实验依据。
   4.干酪乳杆菌肽聚糖水解酶AclB的鉴别与生物特性研究
   相比于乳酸乳球菌,除了植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)的Acm2外,尚无乳杆菌肽聚糖水解酶鉴别与生物特性研究的报道。本文以干酪乳杆菌为研究对象,鉴别并克隆到5种推定的肽聚糖水解酶(自溶酶)基因,并对非内肽酶的基因在指数生长时期的不同阶段的表达情况做了测定,发现它们在指数期的转录量有着相似的变化趋势。随后,AclA与AclB分别在大肠杆菌中进行了大量表达和纯化。酶活性质测定表明,AclB在pH5.0的酸性条件下具有最大的水解活性,而最适温度是37℃,此结果与乳酸乳球菌肽聚糖水解酶AcmB、AcmC的酶活性质相似。为了研究AclB在细胞分离中的作用,使用自杀性整合载体对干酪乳杆菌S1的AclB基因进行了敲除失活。结果发现敲除后的乳杆菌除了在自溶能力以及自絮凝能力上有变化外,最显著的特征是部分突变菌体拉长或者扭曲,表明AclB在细胞分裂后的分离中起着重要的作用。本文首次对乳杆菌的肽聚糖水解酶做了全面的鉴别和分析,并首次对干酪乳杆菌中的AclB酶进行了生物特性研究,为该菌株的后续应用研究奠定了基础。
   5.干酪乳杆菌可控裂解系统的建立及在奶酪发酵中的潜在应用
   干酪乳杆菌作为发酵剂或非发酵剂乳酸菌株(non-starterlacticacidbacteria,NSLAB)应用于切达奶酪等多种奶酪的发酵生产中。建立干酪乳杆菌可控裂解系统可实现胞内酶的快速释放,同时可保持发酵剂一定的活细胞数,是加快奶酪成熟的有效途径。本文选用了来自于乳酸乳球菌的AcmA与来自于粪肠球菌的AtlA两种自溶酶,以NICE系统为基础,以干酪乳杆菌为宿主分别构建了两个可控裂解体系。在nisin的诱导下,AcmA与AtlA均能够成功表达并水解细胞壁,从而裂解干酪乳杆菌细胞并释放出胞内蛋白。为了进一步验证该体系在奶酪生产中的应用潜力,我们进行了实验室规模的模拟奶酪实验,在使用AtlA裂解体系的奶酪凝乳中检测到了5倍于对照组的乳酸脱氢酶活性,这标志着更多的胞内酶在生产过程中被释放到凝乳中。此外,在整个模拟奶酪实验中,所使用的发酵菌株乳酸乳球菌的数量以及整个凝乳的pH值较对照组没有显著改变,证明奶酪性质保持了相对的稳定。该研究证实了对非发酵剂乳杆菌进行可控裂解的可行性和优势,该思路和方法应具有应用于奶酪发酵生产的潜力。
[硕士论文] 徐毅
工商管理 山东大学 2012(学位年度)
摘要:在当前日趋激烈的金融竞争环境下,各国有商业银行纷纷力求摆脱业务和产品彼此同质化窘境,投入巨大精力和资金进行创新,并借此来保存自身在市场上的优势。这一方面迫于市场竞争和客户需求的压力;另一方面也在日趋复杂的经营环境下国有商业银行对高自身风险管理水平和经营管理水平的要求不断提的需要。
   作为国有商业银行,创新的领域无论是在产品、服务还是管理,其目的均在于产生正面的经济价值或减少负面的经济损失或风险。因此,要使创新项目真正发挥作用,推广过程至关重要,是关系到创新效果的关键一环。好项目也要有好过程来保证。好的推广可以使创新项目表现出设计时所期望的经济效益和社会效应,并为该银行的发展开创出一条新的途径;不好的推广过程则会使创新项目的效果产生折扣甚至失败,对创新的价值造成错误的估计,不但降低了创新投入的经济效率还可能会错失发展契机。
   在国有商业银行体系中,推广项目通常采取职能型的组织方式,项目中多数的利益相关方均为与该业务相关的职能部门,项目中所需的各类资源主要依靠职能部门提供,各部门均根据各自的职能范围来参与项目。在这种情况下,国有商业银行如果仍然采取常规经营模式下职能部门之间的协调方式,则项目很难取得理想的效果,因此,可采用利益相关方相关管理理论对参与项目的各职能部门进行协调。
   本文运用利益相关方理论结合国有商业银行特有的组织结构和经营模式,通过对国有商业银行创新推广项目中内部利益相关方的识别与分类、需求分析、协调、评价等一系列措施,使参与项目的各职能部门形成合力,主动配合与协作,避免项目完全由其中某一部门独立完成,进而更好的实现目标。
   本文在第1章明确了研究的目的和意义,提出了研究的框架;在第2章对相关文献进行了分析,并阐述了其对本文研究的支持和不足。
   本文第3章在对国有商业银行项目推广范围和目标进行确定的基础上,从内部利益相关方的识别、分类以及需求的角度对内部利益相关方进行研究。通过建立需求分析矩阵的方式,将内部利益相关方需求予以定量赋值,再对各相关方在项目中的重要性进行权重赋值,结合两者从而确定同一需求内容中各利益相关方的满足优先顺序,以及同一利益相关方不同需求的满足优先顺序。
   本文第4章主要是对国有商业银行推广项目中内部利益相关方的协调与评价的相关研究。利益相关方的协调问题不是仅凭借某一种手段就能得到良好解决的,而是多种方法综合作用的结果。本文则主要通过利益相关方的项目角色、沟通、激励以及冲突管理四个方面措施来实现利益相关方之间的协调。此外还通过对利益相关方的评价来检测利益相关方在项目中的表现,进而为银行组织对职能部门的考核、评价提供依据,因此评价本身对参与项目的职能部门也发挥着激励、约束作用。
   本文从利益相关方的角度对国有商业银行创新推广项目中参与项目的职能部门的协调问题进行研究,并取得了一定成果,得到了一套较为全面的协调思路和方法。伴随着我国国有商业银行的经营模式、组织结构以及管理方式的不断革新与进步,这一思路和方法需要进行持续的深入研究与改进。
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