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摘要:建立低温(-20、0、2、4、6 ℃)贮藏下凡纳滨对虾中李斯特菌的生长预测模型,为冷藏对虾生产过程中该菌的有效控制提供理论依据.通过origin8.5和DMFit软件分别拟合Logisitic、Sweibull、Gompertz和Baranyi模型,分析R2得出最优一级模型.通过计算得到最大比生长速率(μm)和迟滞期(λ),再分别用Arrhenius方程和回归方程拟合对应的二级模型.结果表明修正的Logisitic模型在5个实验温度下R2均0.98,能够描述低温贮藏下LM的生长动态.采用Arrhenius方程和回归方程构建的二级模型R2分别为0.9903和0.9997,方差分析均为p<0.001,表明温度对最大比生长速率(μm)和迟滞期(入)均呈现良好的线性关系.在5℃条件下对模型进行验证,得到偏差度Bf=1.0152、准确度Af=1.0798,均在可接受范围,说明建立的生长预测模型有效可靠....
摘要:研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理,为脂肽协同茶多酚应用于副溶血弧菌的控制提供理论依据.利用“棋盘法”研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应;通过研究脂肽和茶多酚独立作用及协同作用对细胞膜完整性、细胞蛋白质合成及磷代谢方面影响来研究二者的协同抑菌机理.结果表明:脂肽和茶多酚对副溶血弧菌存在强烈的协同抑菌效应,部分抑菌浓度指数达到0.19;与1/16最小抑菌浓度(minimum inhibitory concenuation,MIC)脂肽或1/8 MIC茶多酚各自独立作用相比,在1/16 MIC脂肽和1/8 MIC茶多酚协同作用下,副溶血弧菌的细胞膜通透性显著增强,细胞部分蛋白质合成的抑制作用得到进一步加强,并且细胞的磷代谢完全受到抑制.结果表明,脂肽和茶多酚对副溶血弧菌具有强烈的协同抑菌效应,其协同抑菌作用主要通过二者协同破坏细胞膜的完整性,从而影响细胞部分蛋白质的合成与正常代谢实现的....
摘要:采用传统的分离培养技术对4种海洋动物肠道中的放线菌进行分离,利用紫外-可见分光光度法对分离菌株的代谢产物进行抗氧化活性初筛测定,再采用电子自旋共振仪(ESR)进行4种自由基清除率复筛测定,并对抗氧化活性强的菌株进行16S rDNA水平鉴定与系统发育树分析.结果表明共分离到37株放线菌,初筛测定获得7株菌的代谢产物对DPPH自由基清除率超过50%,其中菌株CH16与CH38的代谢产物通过ESR测定发现对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基及烷基自由基的消除率均超过50%,并分别鉴定为Amycolatopsis rifamycinica与Amycolatopsis sp..该研究为从海洋环境获得产生抗氧化活性物质菌株资源与开发提供依据....
摘要:为有效控制产品的品质,从自然发酵的梅香鱼中分离筛选适合作为发酵剂的菌株,并研究不同菌种之间的配比对发酵产品品质的影响.结果表明,筛选出的嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)及腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)符合发酵要求.与单菌株发酵及未接菌的对照组相比,3株菌制得的混合发酵剂(比例为1:1:1)制备的发酵鱼感官上总体可接受程度最优,其咀嚼性和弹性也最高,并且组胺和挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)的产生得到了有效抑制.该研究可为实现定向接种、人工控制以及规模化工业生产提供参考....
摘要:为研究罗非鱼基质中的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的生长规律,将LM接种到经过处理的罗非鱼基质表面,分别于0、2、4、6℃条件下培养,并建立细菌在各温度下生长的Gompertz模型、Richards模型、Logistic模型,通过比较决定系数(R2)和均方误差(mean square error,MSE)确定最适的初级生长动力学模型,采用Belehradek模型描述温度与最大比生长率和迟滞期的关系建立二级预测模型,并通过偏差值(Bf)和准确值(Af)进行检验.结果表明:罗非鱼基质在4种不同温度下拟合LM生长曲线得到最适生长模型均为Logistic.并且利用初级生长模型得出的最大比生长率,建立Belehradek为二级预测模型,且Bf与 Af值分别为1.0009、1.0153,表明构建的二级预测模型能够很好地描述罗非鱼基质中LM的生长情况....
摘要:水产品质量安全关系到我国消费者的健康,影响公共卫生安全,是各级政府广泛关注的热点.本研究对湛江市售的冰鲜水产品、即食水产品、鱼糜制品和干制水产品进行单增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)的分离与耐药性分析.参考国家标准检测方法和LM特异性基因序列的测定进行LM的筛选与鉴定,用Kirby-Bauer法对目标菌株进行耐药性分析.结果表明,从采集的4类样品共319份水产食品中,检出LM 5株,检出率为1.57%,分别分离于1月的冰鲜白鲢,6月的带子螺、墨鱼干和梅香鱼干及10月的即食包装金针鱼.通过5株LM对13种抗生素的耐药性分析,发现其中12种抗生素对LM有较强的抑制作用,LM未产生耐药性;LM生长对磷霉素表现不敏感,产生了耐药性.研究表明,湛江市区4类水产食品及其制品中存在LM食物中毒的风险,应加强食品安全意识,继续加大力度对LM的耐药监测,确保食品安全及人类健康....
摘要:化学食品防腐剂潜在的副作用使其使用受到越来越严峻的挑战,微生物产天然食品防腐细菌素成为关注的热点.本研究以L.monocytogenes、E.coli、S.aureus、B.subtilis、pparahemolyticus、A.niger为指示菌,以牛津杯法评价抗菌活性,以南海海洋动物肠道作为分离材料,通过抗菌作用的排酸实验、过氧化氢排除实验以及蛋白酶敏感实验进行细菌素产生菌的筛选,并进行了细菌素物质的热稳定性与酸稳定性的研究.筛选出1株具有抗菌活性强,抗菌谱广的细菌素产生菌A0705,其发酵液在-20 ~100℃处理30 min后,再在pH2.5 ~ 11.5的范围内37℃温浴2h,仍保持较稳定的抗菌活性,经16S rDNA序列同源性比对及系统发育树分析,鉴定菌株A0705为芽孢杆菌(Bacillus sp),该菌是1株值得进一步研究与开发的海洋源细菌素产生菌....
[硕士论文] 张雪梅
水产品加工及贮藏工程 广东海洋大学 2017(学位年度)
摘要:单增李斯特菌(LM)是世界公认的四大食源性病原菌之一,该菌不仅对营养要求不高,且生长温度范围较广(0.4~50℃),-20℃下能存活一年,并且在低温等不良环境条件下仍可刺激被膜、毒素等危害因子的产生。本课题通过低温水产品中LM的分离鉴定,对其产生危害的因子进行检测分析,并建立了低温条件下的生长预测模型,最后通过静电纺丝技术处理传统的细菌素CAMT2制备细菌素复合纤维,并在低温条件下检测其在凡纳滨对虾,罗非鱼以及花蛤基质中对LM的控制效应。研究结果如下:
  (1)单增李斯特菌的分离鉴定:采用传统的分离方法,并结合形态学、生化反应、双重PCR技术以及16S rRNA鉴定技术,对湛江市售低温水产品中的LM进行分离、筛选与鉴定。测不同温度盐度及pH对其生长的影响,然后检测37℃下被膜和溶血活性的形成情况。结果从新鲜的白鲢鱼、半成品梅香鱼干、散装香辣银鱼中各分离得到一株单增李斯特菌。结果表明分离菌株,最适温度是35~37℃,但在低温下也有生长;最适盐度为1.5%~3.5%之间,最适pH为中性和弱碱性,菌膜和溶血活性在37℃下都较强。但标准菌株ATCC19111的生长情况都比分离菌株相对较好,说明其耐受性强,适应范围广。
  (2)不同水产品基质中LM的危害分析:本研究以LM的数量、溶血毒素和被膜作为危害评价指标,对凡纳滨对虾(Litopenaeus Vannamei)、罗非鱼(Oreochromis mossambicus)、花蛤(Venerupis philippinarum)三种不同基质的水产品进行低温贮藏的生长规律及危害进行分析与评价。结果表明,LM在花蛤基质中最容易形成菌膜,且溶血活性(LLO)花蛤基质中持续时间长达12 d,溶血毒素最强。
  (3)低温条件下不同基质中LM生长预测模型的建立:本研究建立了低温条件下三种水产基质中的生长预测模型,初级模型用修正Logistic、Gompertz、Weibull和Hill模型,二级模型用修正Dave方程、Arrhenius方程和Ratkowsky平方根模型进行拟合。对虾基质中最优一级模型是修正Gompertz,罗非鱼和花蛤基质中最优一级模型为修正 Logistic模型,其拟合系数 R2均大于0.98,且标准差 S均小于0.0085。二级模型中,凡纳滨对虾、罗非鱼和花蛤基质中最大比生长速率与温度的关系都符合Arrhenius方程,R2分别为0.9687,0.9507,0.9756。迟滞期与温度的关系,在罗非鱼基质中采用修正Dave方程拟合,凡纳滨对虾和花蛤基质中采用Ratkowsky平方根模型拟合,对应的R2依次为0.9826,0.9618,0.9590。预测模型验证结果,残差分析均在±0.01之间,准确因子Af及偏差因子Bf均在可接受范围内,表明本研究所建立的生长预测模型均有效,可以为-20~6℃下3种水产基质中LM的生长预测提供理论依据。
  (4)细菌素复合纤维对LM控制效应:通过静电纺丝技术对解淀粉芽孢杆菌细菌素CAMT2进行处理,得到新型细菌素复合纤维,其抑菌和缓释作用进行检测,然后使用扫描电镜和傅里叶红外检测其形态结构。结果表明细菌素浓度为0.20 mg/mL时的抑菌活性最高,抑菌圈直径为23.82±0.20 mm。傅里叶红外以及扫描电镜对其结构形态进行初步分析,结果表明复合纤维结构主要呈现排列不规则的多孔结构。当在4℃下将复合纤维膜材料置于不同基质中检测期对LM的抑制作用结果表明,复合纤维膜材料在罗非鱼基质中作用效果最明显。
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