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CSTPCD CSSCI 北大核心
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摘要:用户对网络视频信息的传播行为,可以很好地推广和传播视频服务网站的用户认同度,还可以极大地推动视频内容中信息和知识的扩散和交流.以网络口碑传播理论为基础,构建了网络视频服务用户内容传播行为意愿模型.通过优酷网好友在线问卷填写和纸介版社会问卷调研,共获得有效样本242个.进行了PCA因子分析和可靠性信度分析,采用结构方程模型的CFA和路径分析方法;检验结果表明,服务平台支持、关心他人、社交利益、视频质量和积极自我提升等因素对网络视频用户内容传播行为意愿有显著的影响作用,其中,积极自我提升的影响作用最大,而帮助公司对视频用户内容传播行为意愿的影响不显著....
[硕士论文] 张星
应用化学 华中农业大学 2019(学位年度)
[专利] 发明专利 CN201310684154.2
华中农业大学 2015-06-17
摘要:本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻缺氮后恢复供氮特异性诱导表达启动子Y8A及应用。利用芯片技术,得到了启动子Y8A下游基因供氮诱导表达的信息,通过不同水稻品种验证了Y8A下游基因供氮诱导的表达模式。通过PCR方法,扩增出启动子Y8A全长及其5`端截短的片段Y8B,连接到载体DX2181b上,构建得到启动子融合GUS表达的载体。再将构建好的载体转化水稻品种中花11,在转化阳性植株中验证该启动子对GUS基因表达的调控,通过Realtime表达量验证,进一步确证Y8A及Y8B属于缺氮后恢复供氮特异性诱导表达的启动子,其功能区段在ATG上游982bp。本发明为水稻提供了新的启动子资源。
摘要:用户对网络视频信息的传播行为,可以很好地推广和传播视频服务网站的用户认同度,还可以极大地推动视频内容中信息和知识的扩散和交流。以网络口碑传播理论为基础,构建了网络视频服务用户内容传播行为意愿模型。通过优酷网好友在线问卷填写和纸介版社会问卷调研,共获得有效样本242个。进行了PCA因子分析和可靠性信度分析,采用结构方程模型的CFA和路径分析方法;检验结果表明,服务平台支持、关心他人、社交利益、视频质量和积极自我提升等因素对网络视频用户内容传播行为意愿有显著的影响作用,其中,积极自我提升的影响作用最大,而帮助公司对视频用户内容传播行为意愿的影响不显著。...
[专利] 发明专利 CN201210039612.2
华中农业大学 2013-08-21
摘要:本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻缺氮特异性诱导表达的启动子Y5(又称Y5A)及应用。利用芯片技术,得到了启动子Y5(Y5A)下游基因供氮诱导表达的信息,通过不同水稻品种验证了Y5A下游基因供氮诱导的表达模式。通过PCR方法,扩增出启动子Y5A全长和其5`端截短的片段,连接到启动子载体DX2181b上,构建得到启动子融合GUS表达的载体。再将构建好的载体对水稻品种中花11进行遗传转化,在转化阳性植株中验证该启动子对GUS基因表达的调控,通过Realtime表达量验证和GUS蛋白活性的检测,进一步确证该启动子属于一种水稻缺氮特异性诱导表达的启动子,其功能区段在ATG上游546bp。
[专利] 发明专利 CN201210039585.9
华中农业大学 2013-08-21
摘要:本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种水稻缺氮后恢复供氮特异性诱导表达启动子Y2及应用。利用芯片技术,得到了启动子Y2下游基因供氮诱导表达的信息,通过不同水稻品种验证了Y2下游基因供氮诱导的表达模式。通过PCR方法,扩增出启动子Y2全长和其5`端截短的片段,连接到启动子载体DX2181b上,构建得到启动子融合GUS表达的载体。再将构建好的载体对水稻品种中花11进行遗传转化,在转化阳性植株中验证该启动子对GUS基因表达的调控,通过Realtime表达量验证和GUS蛋白活性的检测,进一步确证该启动子属于缺氮后恢复供氮特异性诱导表达的启动子,其功能区段在AT6上游519bp。
[专利] 发明专利 CN201310445940.7
华中农业大学 2014-01-29
摘要:本发明公开了一种鸡冠花试管花卉的生产方法,该方法以长出四片真叶的鸡冠花茎尖为外植体,接种在装有生根培养基的玻璃瓶内培养,获得可供观赏的鸡冠花试管花卉,所述的生根培养基为:MS+0.2mg/LNAA、琼脂7g/L、白砂糖30-50g/L、pH值为5.8-6.2。本发明涉及的鸡冠花试管花卉生产方法具有工艺简单、培养基廉价的优点,所生产的试管花卉占用空间小,开花率高,株高和花絮大,观赏时间长。
[硕士论文] 张星
生物化学与分子生物学 华中农业大学 2013(学位年度)
摘要:氮素是限制植物生长和形成植物产量的首要因素。在过去的二、三十年中,随着人们对氮肥的大量施用造成了严重的环境污染。因此提高农作物对氮素的吸收利用效率,不仅可以提高农业生产效率且对生态环境的保护具有重要意义。随着分子生物学和基因工程在植物领域的迅速发展,植物对氮素吸收转运的分子机制也越来越清晰。目前,关于植物有效利用氮素重点应在于筛选高效利用的品种并深入挖掘与氮素吸收利用相关的新基因及其功能研究,进一步揭示植物氮信号的传导途径。本研究旨在通过全基因组cDNA芯片技术筛选水稻中与氮代谢相关的新基因并初步研究这些新基因功能。主要结果如下:
   1、分别以日本晴(Nipponbare)和珍汕97作为基础材料,水培幼苗至5叶期,分不同时间点缺氮胁迫处理取样,利用全基因组cDNA芯片表达谱作为技术手段,挑选出15个在两种材料中对氮环境变化有相同反应的差异表达基因。
   2、通过Real-time PCR进一步验证这15个基因在不同氮素处理下基因表达变化情况筛选出8个基因,作后续研究。
   3、根据这些基因的信息通过生物信息学分析获得了各基因的编码序列和上游启动子序列。用PCR技术扩增8个待研究基因的序列及各自启动子序列。将基因序列用于构建超量和抑制载体,上游启动子序列克隆到DX2181b载体上,并与Gus报告基因融合,共构建得到了33个载体。
   4、通过农杆菌介导的水稻转化方法,将构好的载体质粒转化粳稻品种中花11,每个载体获得30-70株转基因苗,对这些转基因苗进行了阳性鉴定、表达量检测、为后续基因功能研究准备了材料基础。
   5、通过Gus报告基因表达量及Gus活性分析得到2个受外界氮环境变化诱导表达的特异性启动子。
   6、通过序列分析,对以上2个特异启动子进行截短,将截短的启动子片段分别与Gus相连,构建启动子截短的载体,转化入水稻。Real-time PCR验证各截短片段Gus报告基因的表达量情况,以期找到相应顺式调控元件。
[硕士论文] 张星
动物遗传育种与繁殖 华中农业大学 2012(学位年度)
摘要:慢病毒(Lentivirus)是一类逆转录病毒,含有依赖于RNA的多聚酶即逆转录酶,可侵入宿主细胞内,在自身逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板合成cDNA,以此cDNA为模板合成双链DNA,通过病毒整合酶作用整合到宿主细胞的基因组中。以慢病毒为基础构建而成的慢病毒载体(Lentiviral vector)具有转移效率高、免疫反应小、作用范围广等优点。
   睾丸注射法即将病毒包装的外源DNA直接注射到雄性动物睾丸内,感染精原细胞或精原干细胞后将外源基因转染到精子,然后利用体外授精、人工授精等技术生产转基因动物的技术。该方法操作简便,但是否安全、有效,尚待验证。
   本试验通过分析经睾丸注射后的牛血液和精液指标,并用PCR方法检测外源DNA在睾丸内与精子整合后是否扩散到全身组织中;应用电子显微镜镜技术研究睾丸注射LV载体对牛睾丸组织的影响,旨在探讨睾丸注射法的安全性和效果,为进一步开发转基因技术奠定基础。
   本课题研究内容主要包括以下两个部分:
   1.睾丸注射慢病毒对精液品质的影响
   本试验采用多点睾丸注射,注射后对实验牛多次采精,对精液进行精液常规品质检测,主要指标为密度、活力和外观色泽。将精液制成涂片,置于400倍电子显微镜下观察精子形态及密度。
   实验结果表明:实验组牛精液密度、活力略低于对照组牛精液,但是相差不大。在400倍电子显微镜下观察,实验组精子密度低于对照组,精子形态正常,畸形精子率低。
   2.血液、精液外源DNA检测
   本试验通过对血液常规指标分析及外源基因的PCR扩增,来确定慢病毒载体在宿主体内是否发生基因转移扩散到其他组织中。本实验室PCR方法灵敏度可达到10个拷贝数,对外源BSD基因进行扩增,对扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳。
   实验结果表明:在血液DNA及精液DNA中均未检测到外源BSD序列。
   3.睾丸注射慢病毒对血液生理生化指标影响
   血常规检测各项指标利用Microsoft Office Excel2007进行数据初步统计,并用SAS8.0软件进行单因素方差分析(ANOVA)。
   实验结果表明:实验组与对照组血液常规检测各指标均无显著差异(p>0.05)。
   上述结果表明,睾丸注射慢病毒载体对牛繁殖能力及健康不会产生损害并且在宿主体内不会发生扩散,侵染其他组织。能为慢病毒载体介导RNAi技术制备转基因牛的安全性提供支持。此外本研究还可以为睾丸注射法在转基因牛的运用上提供参考。
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