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摘要:目的 应用微电极阵(MEA)技术研究小檗碱对快速心房起搏(RAP)兔心房肌场电位时程(fAPD)及兴奋传导速度(ECV)的影响,探讨其抗心房颤动(简称房颤)的作用机制.方法 新西兰兔40只,随机分成5组,对照组(n=8),起搏组(n=8),起搏+小檗碱A组(5μmol/L,n=8),起搏+小檗碱B组(10 tμmol/L,n=8),起搏+小檗碱C组(20 μmol/L,n=8).RAP 24 h后,对照组于相应时间,迅速开胸取出心脏,分别灌流改良台氏液或含5、10、20 μmol/L小檗碱的改良台氏液行Langendroff灌流,用柔性电极贴附右房,分别记录各组fAPD和ECV的变化.结果 相较对照组,起搏组心房肌fAPD缩短,传导速度减慢(P<0.05).相较起搏组,小檗碱A、B、C组心房肌fAPD逐渐延长,ECV逐渐加快(P<0.05).结论 在RAP兔模型中,小檗碱不仅能有效延长心房肌fAPD,还能加快ECV,显示出可能具有较好的抗房颤作用....
摘要:目的 分析国内内科住院病人发生静脉血栓栓塞症(VTE)的主要危险因素,为VTE的防治决策提供参考依据.方法 利用Meta分析方法对国内外公开发表的关于中国内科住院病人发生VTE危险因素病例对照研究的6篇文献进行定量综合分析,共纳入病例923例,对照l 230例.结果 各因素合并OR值及95%CI分别为:需要卧床>72h OR=2.69(1.69~4.30);中心静脉置管OR=4.88(2.38~9.99);恶性肿瘤OR=3.09(1.16~ 8.25);1个月内大手术史OR=3.34(1.27~ 8.79);心力衰竭OR=1.66(1.25~ 2.19);严重的肺部疾病OR=2.52(1.82~ 3.50);年龄OR=1.84(1.51~ 2.25).结论 长期卧床、中心静脉置管、恶性肿瘤、1个月内大手术史、心力衰竭、严重的肺部疾病、年龄是国内内科住院病人发生VTE的主要危险因素....
摘要:目的 探寻滴虫性阴道炎患者阴道微生物组成的特点,为临床诊治及减少疾病的复发提供参考依据.方法 选取2016年5-6月复旦大学附属华东医院妇科门诊45岁以下确诊为滴虫性阴道炎的育龄期患者16例,以同期18例45岁以下育龄期健康女性为对照,采集患者和健康人上阴道壁1/3处的分泌物,进行常规临床分析和革兰染色,并以21种常见的阴道细菌的特异引物进行Real-time PCR检测,分析并比较这些细菌在滴虫性阴道炎患者和健康人阴道内的组成及变化.结果 在18例健康人中,其中13例的阴道微生物组成以乳酸杆菌(Lactobacillus)为优势菌,3例的阴道微生物组成无明显优势菌群或者优势菌不为检测的21种常见阴道微生物,2例的阴道微生物组成以加德纳菌为优势菌;在16例滴虫性阴道炎患者中,只有2例患者的阴道微生物菌群以乳酸杆菌为优势菌,14例以厌氧菌如普雷沃属(Prevotella)、纤毛菌(Le ptotrichia)和斯尼思菌(Sneathia)为优势菌.经Metastats进行组间差异分析,结果表明Lactobacillus crispatus、Leptotrichia amnionii、Eggerthella sp.和Peptostreptococcus sp.在两组之间差异有统计学意义(P≤0.05).PCoA主成分析结果亦显示滴虫性阴道炎患者的阴道常见21种微生物组成与健康人有显著差别.结论 滴虫性阴道炎患者阴道内微生物组成的多样性增加,普雷沃属、纤毛菌及斯尼思菌的明显增高可能滴虫性阴道炎的炎症发生有关,此结果对于临床治疗滴虫性阴道炎的及减少复发提供新的方向,具有一定的指导意义....
[期刊论文] 张彦 郑永廷
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CSSCI 北大核心
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摘要:当前,我国社会以社会主义核心价值体系为主导,价值取向的主流是正确的、积极的,但也存在一定程度的价值迷茫.价值迷茫在空间向度、时间向度与内容向度上,分别表现为利己主义、功利主义与物质至上的价值取向.西方国家价值观的影响、市场经济发展的负面作用、科技发展对人文的挤压,是价值迷茫存在的主要原因.发挥社会主义核心价值体系的主导作用、坚持价值取向的全面性和协调性、加强和改进价值观教育,是转化价值迷茫的主要举措....
[期刊论文] 张彦 朱珠 杨继
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:进化新征的起源和分化是进化发育生物学研究的核心问题.通过对多细胞生物早期发育调控机制的比较分析,发现亲缘关系较远的生物所共有的一些形态特征受保守的发育调控程序调节(深同源性).许多创新性状的发生是基于对预先存在的基因或发育调控模块的重复利用和整合.发育基因调控网络在结构和功能上高度模块化,因此不仅可以通过模块拆分和重复征用改变发育程式,而且也增强了调控网络自身的进化力.研究基因调控网络和发育系统的进化动态将有助于更深入地认识生物演化过程中创新性状发生和表型进化的分子机制....
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北大核心 CSTPCD CSCD
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摘要:目的:通过观察针刺对急性手术创伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)家族肽及其受体表达的影响,探讨针刺调节急性手术创伤所导致的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能异常作用的神经内分泌机制.方法:雄性SD大鼠40只,随机分成正常组、创伤组、正常加电针组、创伤加电针组,每组10只.创伤动物在乙醚麻醉下行剖腹探查术.电针组动物电针"足三里""三阴交"30 min.应用特异性放射免疫法检测各组动物血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质肌动蛋白(Cort)、促黄体生成素(LH)和肌钙蛋白(T)的水平,应用RT-PCR的方法观察各组动物下丘脑CRF家族肽和其受体mRNA的表达.结果:创伤组大鼠血清ACTH水平显著下降(P<0.05),创伤加电针组血清ACTH水平和创伤组相比显著升高(P<0.05);创伤组大鼠血清Cort水平较正常组显著上升(P<0.05),创伤加电针组血清Cort水平较创伤组显著降低(P<0.05);各组动物血清LH和T水平差异无统计学意义(P>0.05).创伤组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和正常组相比降低(P<0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和创伤组相比升高(P<0.05);创伤组大鼠下丘脑Ucn 1 mRNA的表达与正常组比较升高(P<0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑Uca 1 mRNA的表达和创伤组相比下降(P<0.05);各组Uca 2、Uca 3和CRF受体1 mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论:电针效应具有多环节、多靶点的特点,电针可能通过调整急性创伤大鼠下丘脑CRF和Uca 1 mRNA的表达,进而调整急性剖腹探查所致的大鼠HPA轴功能异常....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA SA
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摘要:将重组质粒pPIC9K-apoAⅠ-milano用BglⅡ酶切后转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选得到G418高抗性转化子,经甲醇诱导和摇瓶发酵,用SDS-PAGE与Western blot检测上清液,发现有明显的重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体(rAIM)表达,但其分子量比正常蛋白小.对酵母工程菌的摇瓶发酵条件进行优化后,rAIM表达水平得到提高, 约为70 mg/L发酵液,其中正常大小的rAIM所占的比例约为80%.采用冷丙酮沉淀法初步纯化了酵母工程菌发酵液中的rAIM,并验证其有磷脂结合能力....
摘要:将PCR扩增得到的apoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3.5K,重组的pPIC3.5K-apoAⅠ用BglⅡ酶切后,转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,再通过PCR鉴定证实apoAⅠ基因已整合到染色体上.其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,收集细胞裂解后,用SDS-PAGE与Western blotting检测,证明胞内有明显的rApoAⅠ表达,其分子质量与人血浆提取的ApoAⅠ相同....
摘要:基于国内外迅猛发展的高通量测序技术(第二代测序技术)应用以及精准医学的需求,从技术和成本角度分析高通量测序技术用于同时检测单核苷酸变异(SNV)和拷贝数变异(CNV)的临床应用价值....
[硕士论文] 张彦
生态学 复旦大学 2012(学位年度)
摘要:种子性状起源和进化的分子机制是植物进化-发育生物学(Eco-Devo)研究关注的热点问题之一。针对目前提出的由于贮藏物质积累和休眠程序由胚前(孢子)转变至胚后(种子成熟阶段)异时序(heterochronic)表达进而导致种子性状发生的假设,在本项研究中,首先运用高通量测序技术分析江南卷柏(Selaginella moellendorffii)孢子发育转录组特征,然后与拟南芥(Arabidopsisthaliana)种子成熟发育转录组特征进行比较,以从基因表达层面了解孢子及种子成熟发育过程中所涉及的贮藏物质代谢途径的特点和共性,验证前人提出的假设,为探讨种子性状的进化机制提供依据。
  研究结果表明,在江南卷柏孢子发育阶段,5046个基因的表达式样发生明显改变,其中2194个基因与营养叶相比显著上调表达,另有2857个基因显著下调表达,并有293个孢子发育特异表达基因。基于对公共数据库中拟南芥表达谱数据的分析,筛选得到654个在种子成熟发育时期特异上调表达的基因,850个下调表达的基因。基因同源性和表达式样比较分析结果显示,在5046个江南卷柏孢子发育差异表达基因中,85%以上的基因能在拟南芥基因组中找到同源序列,但其中约30%的基因不在种子成熟发育阶段表达,近50%的基因虽然在种子成熟发育阶段表达,但具有不同的差异表达模式,同源且具有相同表达模式的基因约占7%。基因功能注释结果表明在江南卷柏孢子发育和拟南芥种子成熟发育阶段都显著上调表达的基因绝大部分与贮藏物质的合成相关,包括各类贮藏蛋白(12S球蛋白、Cupin蛋白和胚胎晚期丰富蛋白等)、脂类(三酰甘油)、糖类(主要是蔗糖)和不同类型的次生代谢物,显示出明显的共性,表明种子成熟发育调控程序的形成涉及对进化早期出现的贮藏物质代谢通路的招募和征用(co-option),但其征用机制以及是否伴随种子性状的起源而发生尚有待进一步研究。
[专利] 发明专利 CN200410089315.4
复旦大学 2005-07-13
摘要:本发明属生物工程技术领域,具体为一种人载脂蛋白ApoA I在毕赤氏酵母胞内表达的方法。它将人工合成的apoA I基因插入胞内表达质粒pPIC3.5k,电击导入毕赤氏酵母菌株GS115,经摇瓶发酵和甲醇诱导,在酵母细胞内有明显的rApoA I蛋白表达,其分子质量与人血浆中提取的ApoA I相同。
[硕士论文] 张彦
材料物理与化学 复旦大学 2010(学位年度)
摘要:随着现代医学、生物学和材料学的不断发展,可降解聚合物广泛应用于药物缓释系统。由于它们性能均一、稳定、物理化学性质可控可调,得到了研究者的极大关注。药物缓释系统中,高分子水凝胶由于其良好的生物相容性,被认为是很有潜力的药物缓释载体,其中可降解聚乳酸(PLA)和亲水性聚乙二醇(PEG)的共聚物应用于水凝胶体系引起了广泛兴趣。
  PLA/PEG三嵌段共聚物以乳酸锌为催化剂,通过分子量为6000,12000或者20000的双羟基PEG引发L型或者D型丙交酯开环聚合反应得到。由于PLLA与PDLA链段之间的立体复合作用,将等量PLLA-PEG-PLLA与PDLA-PEG-PDLA三嵌段共聚物溶液混合形成可生物降解性水凝胶。
  本论文首先采用1HNMR、XRD、DSC等方法对PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物的结构和性能进行了测定分析。流变性能测试证明了水凝胶的形成。水凝胶表现了典型的粘弹性行为,在凝胶化的过程中降解同时发生。胸腺五肽作为模型药物,在本实验中被用来评价PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物水凝胶作为药物缓释载体对于亲水性药物的载药和释药能力。使用HPLC方法对于凝胶中胸腺五肽药物的释放行为进行了测定。研究了聚合物浓度、载药量、聚合物组成和溶胶一凝胶等参数对于药物释放行为的影响,以得到最佳药物缓释系统。药物释放曲线呈现出了初始的突释和一定时间后的缓慢释放的特征。更高的聚合物浓度导致缓释速率减慢,早期突释减小。这是因为更高的聚合物浓度导致更加紧密的水凝胶结构,从而使药物的扩散变慢。相似的,更高的聚合物分子量也使药物缓释变慢。和单纯的PLLA-PEG-PLLA溶胶或者PDLA-PEG-PDLA溶胶相比,由PLLA-PEG-PLLA与PDLA-PEG-PDL-A立体复合形成的凝胶表现出更小的药物释放速率。相反,载药量对于药物释放的影响不大,主要原因是药物水溶性很好。在所有实验样品中,胸腺五肽的释放率接近90%。大鼠体内试验进一步证明了包含胸腺五肽的PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物水凝胶的药物缓释潜力,尤其是浓度为25%的水凝胶药物缓释系统。两个主要检测参数,CD4+/CD8+比例与胸腺形态证实了基于PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物水凝胶的胸腺五肽释放系统的药物缓释特性与免疫调节性能。
  总体来说,PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物水凝胶药物释放体系具备了胸腺五肽药物缓释材料的基本性能和缓释效果要求。相对于已经报道的胸腺五肽的微球及纳米粒释放体系,PLA-PEG-PLA三嵌段共聚物水凝胶药物释放体系,无任何有机溶剂引入,制作简单,包裹药物方式简单,条件温和,而且药物包封率高,缓释时间长,释放后的药物依然保持了原有的药理性能,具有良好的应用前景。
  另外,尝试使用PDLA自身的右旋特性与左旋药物形成立体复合产物,通过DSC实验证明PDLA与TP5可以形成立体复合产物,并有一定的药物缓释效果。
[硕士论文] 张彦
微生物学 复旦大学 2007(学位年度)
摘要:人载脂蛋白Al米兰突变体(apolipoproteinA I—milano,AIM)是ApoAI的天然突变体,首次发现于意大利米兰地区一个村庄的部分居民中,其血浆中ApoA I的第173位Arg突变成Cys。携带AIM的人群其心血管类疾病的发病率大大低于正常人群。研究表明,AIM具有比ApoAI更强的抗动脉粥样硬化症的作用。因此AIM有可能成为一种新型的治疗和预防动脉粥样硬化症等疾病的药物,具有临床应用前景。 毕赤酵母系统已经普遍用于外源蛋白的表达。用毕赤酵母表达系统分泌表达rAIM,有利于rAIM的大规模生产。将pPIC9k-apoAI质粒上的apoAI cDNA的第173位Arg密码予突变成Cys密码子,得到重组质粒pPIC9k-apoAI-milano,用Bg/II线性化,电转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,上清液用SDS-PAGE与Western blotting检测,有明显rAIM表达,但是其C末端发生部分降解。我们尝试对酵母工程菌株Amp13发酵条件的优化,在摇瓶培养时,将BMMY培养基的pH值调节到7.0,蛋白胨用量增加到4%,添加0.1%Arg、0.1%Ala和5mmol/L的EDTA,将诱导温度降低至25℃,诱导时间为3天时,使rAIM的降解得到有效控制,其表达水平达到约70mg/L发酵液,其中全长的rAIM所占的比例达到约80%。我们还采用冷丙酮沉淀法初步纯化了酵母工程菌发酵液中的rAIM,并证明rAIM含有巯基,具有磷脂结合能力。 我们用毕赤酵母系统成功表达rAIM,并且初步解决了分泌表达蛋白降解的问题,为今后运用基因工程大量生产rAIM奠定了基础,并为进一步研究rAIM的结构和生物学功能以及临床应用创造了条件。
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