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摘要:嗅觉适应是动物的一项重要生理功能,可以保护自身细胞免受过度刺激,进而更好地应对周围环境变化.目前发现秀丽隐杆线虫嗅觉适应性主要与嗅觉神经元胞内信号分子和感受蛋白有关,如AWC神经元区域特异性环鸟苷酸(cGMP)反应、瞬时受体电位香草酸亚型(TRPV)离子通道蛋白OSM-9、细胞质基质抑制蛋白ARR-1和G蛋白信号通路中的甘油二酯(DAG)通路等均可以调控嗅觉适应,而神经环路方面的嗅觉适应性研究甚少.本文总结回顾了线虫嗅觉适应有关的分子细胞生物学机制,以期为高等生物嗅觉的研究提供参考....
摘要:目的:构建光敏剂结合 UVA 诱导的小鼠皮肤光老化模型。方法: ICR 小鼠分为3组:模型组外用1%甲氧沙林溶液(8-M。P)后进行 UVA 照射、单纯 UVA 照射组和空白对照组。照射后观察皮肤外观表现、病理学变化和超微结构特点,确定各组诱导皮肤光老化进程的累积照射剂量和时间。结果:单纯 UVA 照射组在第45天,UVA 剂量约720 J/ cm2时,肉眼观察皮肤外观、组织病理方面和超微结构都呈现比较典型的光老化表现;模型组(8-M。P / UVA)小鼠在第3天,UVA 累积剂量约47 J/cm2时,透射电镜下可见角质形成细胞和基底层黑素细胞的显著凋亡(核固缩);第5天,UVA 累积剂量约78 J/ cm2时,病理示:真皮层部分弹性纤维变性;随着照射剂量的增加,第6天 UVA 累积剂量达95 J/ cm2时,出现典型的光老化表现,透射电镜下可清晰观察到弹性纤维和胶原蛋白束的病理改变。结论:8-M。P / UVA 可以快速诱导小鼠皮肤光老化模型的建立。...
[期刊论文] 张小燕 阮晖 何国庆
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:甾体激素类药物是我国医药领域的重要门类,雄甾烯二酮是甾体激素类药物不可替代的中间体.微生物选择性降解植物甾醇侧链生成雄甾烯二酮,能替代复杂的多步化学合成法,并减轻目前由于薯蓣皂素为原料造成的资源紧缺,对合理利用我国的甾体植物资源,推动制药行业的发展有着重要的意义.本文结合相关的研究进展,综述了微生物选择性降解植物甾醇侧链茵种的选育与改良,水相体系中转化条件的优化及几种非水相转化系统的研究状况,并针对传统诱变育种耗时、费力、正突变率低、突变性状比较分散等缺陷,提出通过基因组改组技术实现突变性状优化重组,为构造甾醇微生物转化高产菌种提供广阔的发展空间....
摘要:新疆野苹果[Malus sieversii(Lebed.)Roem.]可能是栽培苹果(Malus domestica Borkh.)的祖先,主要分布在中亚地区的天山山脉,包括中国新疆伊犁的巩留、新源、霍城及裕民等,遗传多样性极为丰富.作者对新疆野苹果的发生、分类学地位、群体遗传结构、遗传多样性、生存现状及核心种质构建与新疆野苹果的保护保存等作一综述,旨在为新疆野苹果这一珍贵资源的科学保护与有效利用提供参考....
摘要:目的:编制大学生特殊完美主义量表.方法:用探索性因素分析发展量表的初步理论结构,再用验证性因素分析证明理论结构的合理性和正确性,以此为基础编制了大学生特殊完美主义量表,并对正式问卷测量结果进行探索性因素分析和验证性因素分析.结果:探索性因素分析确定量表含5个因素,解释了总变异的57.54%;α系数、分半信度、重测信度分别为0.648~0.781,0.664~0.790,0.720~0.779;验证性因素分析显示拟合指数x2/df,GFI,AGFI,NFI,NNFI,RMSEA,CFI,IFI分别为2.32,0.91,0.88,0.84,0.88,0.06,0.90,0.90.结论:该量表的信效度都达到了测量学的要求....
[期刊论文] 杨宏飞 张小燕 赵燕
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北大核心 CSTPCD CSSCI CSCD CASS
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摘要:目的: 编制大学生一般完美主义量表. 方法: 用探索性因素分析发展量表的初步理论结构,再用验证性因素分析证明理论结构的合理性和正确性. 结果: 探索性因素分析确定量表含追求高标准和在乎错两个因素,解释总变异的51.6%;ɑ系数为0.841和0.835,分半信度为0.852和0.790,重测信度为0.720和0.781;验证性因素分析显示拟合指数χ2/df=3.622,GFI=0.92,AGFI=0.91,NFI=0.87,NNFI=0.90,RMSEA=0.069,CFI=0.90,IFI=0.90.追求高标准与SCL-90、SDS、SAS和SWLS等效标不相关,与SES的相关为0.241(P<0.01);在乎错误与SCL-90、SDS、SAS、SES和SWLS等效标相关系数分别为0.299、0.301、0.302、-0.354、-0.218(均P<0.01). 结论: 该量表的信效度都达到了测量学的要求....
[期刊论文] 杨宏飞 张小燕
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北大核心 CSTPCD CSSCI CSCD CASS
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摘要:目的:探讨大学生的完美主义与心理健康的关系.方法:用Frost多维完美主义量表(MPS)和症状自评量表(SCL-90)对505名大学生进行测量.结果:大学生的完美主义与心理健康在总体上呈负相关(r=-0.30,P<0.01),大多数维度之间在0.01显著性水平上呈负相关.结论:大学生的完美主义对心理健康存在一定程度的影响....
摘要:Rh(D)的研究已进入基因水平,Rh(-)者D基因外显子多态性与D免疫关系神秘面纱正在逐渐揭开.其中部分人群可引起溶血性输血反应和新生儿溶血症,但没能找出引起免疫的规律以及预测的方法.为了安全输血,从1996年3月~1999年3月对6093名受血者进行Rh血型鉴定(年龄1~14岁),12例为Rh阴性,阴性检出率为0.197%.其中有2名内科患者(1名放弃受血),10名为手术患者;9名患者(汉族,均无输血史)输了ABO同型、Rh同型血液(附表),2名输血浆.除1例Rh阴性血型由浙江大学医学院附属第一医院鉴定外,其余均由浙江省血液中心鉴定....
[硕士论文] 张小燕
神经生物学 浙江大学 2018(学位年度)
摘要:秀丽隐杆线虫拥有十分简单但又完整的神经系统,神经元是神经系统的重要成员之一,而神经胶质细胞作为神经系统另一个组成部分,也有着多种作用,包括支持、营养、保护神经元等。神经元和胶质细胞之间也会通过一定的机制相互作用,进而调控生物体的生命活动,目前对于胶质细胞的功能以及与神经元之间的互作机制都知之甚少。
  线虫头部具有发达的化感系统,可以感知各种感知各种外界刺激。而嗅觉适应是线虫的一项重要生理机能,可以保护自身细胞免受过度刺激,更好的应对嗅觉刺激强度的变化。本研究利用分子遗传的技术,特异性标记线虫AMsh glia和ASH神经元,并通过光遗传学和化学遗传学的方法激活或抑制AMsh胶质细胞,记录ASH神经元的钙信号变化及线虫的回避行为。初步证明激活AMsh胶质细胞能够抑制ASH神经元的兴奋性,进而降低线虫对厌恶性气味的敏感性,从而介导嗅觉适应。
  本研究首次发现线虫AMsh glia参与嗅觉适应,为进一步深入研究神经胶质细胞在神经系统中的作用有很好的借鉴。
摘要:本研究以实验室筛选到的一株新金分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum ZJUVN)为出发菌株,采用N+离子束注入诱变,旨在选育能够高效单产产物雄甾烯酮(AD)的菌株.当诱变能量为10Kev,剂量为100×2.6×1013 ions/cm2时,致死率可达到71.38%.通过平板分离纯化和摇瓶转化筛选,得到一株突变菌株ZJUVN-08,该菌株可降解植物甾醇生产单一产物雄甾烯酮(AD),没有雄甾烯二酮(ADD)的生产.经10次传代稳定性试验,证明该菌株具有良好的遗传稳定性.摇瓶发酵转化结果表明,当以吐温80为助溶剂(5%),底物浓度为5g/l,pH为7,摇床转速200rpm,转化时间为120h,可得到单一产物AD 1.37g/l,摩尔转化率达到38.85%,比出发菌株提高了74.6%.通过N+离子束注入诱变,菌株的生产性能得到明显改善,并能有效获得单一产物AD.原因可能是N+离子束注入菌体后,甾体C1,2脱氢酶活力丧失,使得AD不能进一步降解成ADD,有利于后续发酵液中产物的分离提取.
[博士论文] 张小燕
食品科学 浙江大学 2013(学位年度)
摘要:甾体类激素药物是我国医药领域的重要门类,雄甾烯二酮(AD)是甾体激素类药物不可替代的中间体。微生物选择性降解植物甾醇(PS)侧链生成AD,能替代复杂的多步化学合成法,并减轻目前由于薯蓣皂素为原料造成的资源紧缺,对合理利用我国甾体植物资源、推动制药行业的发展有着重要意义。本文对分离得到能转化植物甾醇合成AD的菌株进行性能比较,并对高产菌株进行鉴定与N+离子注入诱变选育,获得1株仅积累产物AD的菌株(新金分枝杆菌,命名为ZJUVN-08)。利用正交实验对该菌的培养基组成和培养条件进行了优化;通过几种不同的细胞通透性调节手段,提高新金分枝杆菌细胞壁的通透性,以期增加AD产量;比较了水相系统中几种不同促溶剂对植物甾醇转化的影响,并借助响应面分析方法对添加羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的生长细胞转化过程进行了优化;研究了水相体系中静息细胞转化植物甾醇的最佳条件。论文的主要研究结果如下:
   取山东泰安市郊几家植物油厂附近污染较为严重的土壤样品,后经富集培养和涂布平板等方法,分离得到76株能够在以植物甾醇为唯一碳源的培养基上生长的菌株,对转化产物进行薄层层析和高效液相色谱分析,发现菌株ZJUVN的转化产物产量最高,且产物AD和雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)的比例约为10:1。经过菌株形态观察、生理生化特征及16S rDNA序列分析方法对菌株ZJUVN进行鉴定,结果显示该菌为新金分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum.ZJUVN)。
   利用N+离子束注入技术对新金分枝杆菌ZJUVN进行诱变,通过不同注入剂量与诱变致死率的关系曲线确定N+离子束注入的最佳条件为:能量10 keV,诱变剂量100×2.6×1013ions/cm2,致死率约在70%。
   选择在平板筛选培养基上生长良好的单菌落,进行摇瓶发酵,得到23株积累产物AD而几乎没有副产物ADD的突变株,其中突变株ZJUVN-08的AD产量为2.29 g/L,比出发菌株提高71.05%。10次传代过程中,AD产量基本保持稳定,表明该菌有较好的遗传稳定性。
   利用正交实验,对突变株M.neoaurum ZJUVN-08的培养基组成进行了优化,最终确定合适培养基组成为:葡萄糖1%,蛋白胨0.6%,磷酸氢二钾0.15%,硫酸镁0.05%,硫酸亚铁0.007%。确定了最佳转化条件为:初始pH值7.0,温度30℃,10%的接种量,装液量50 mL/250 mL,转速为200 rpm。对ZJUVN-08的转化产物利用制备型HPLC进行分离纯化,制得白色粉末结晶,通过MS,IR和NMR进行结构鉴定,结果证明纯化产物为AD。
   对比了超声、杆菌肽、鱼精蛋白和甘氨酸处理对菌体生长及底物转化能力的影响。结果发现,超声功率为500 W,超声时长为180 s时,发酵液中AD产量为2.95 g/L,比对照提高了5.8%。杆菌肽处理菌体后,几种参试浓度下,均会抑制菌体生长,且AD产量低于对照水平。10 mg/L鱼精蛋白处理菌体后,发酵液中AD产量最高为3.02 g/L,比对照提高了8.6%。5 g/L的甘氨酸有利于菌体的生长,且有利于提高菌体转化底物的能力,发酵液中AD产量最高为3.16 g/L,比对照提高了13.6%。并通过药敏性实验进一步确定了甘氨酸是通过增强细胞通透性的方式提高了底物的转化能力。
   探讨了水相体系中不同助溶剂对植物甾醇微生物转化的影响,确定了添加HP-β-CD的体系中植物甾醇转化效果最好;进一步采用响应面法对添加HP-β-CD的水相体系转化条件进行优化,获得最佳转化条件为诱导物浓度0.1 g/L、初始pH7.0,HP-β-CD/PS摩尔比1.92:1,底物浓度8.89 g/L,转化时间120 h,在该条件下转化植物甾醇时,得到AD产量最大值为5.96 g/L,摩尔转化率为94.69%。比未优化前有效节约了底物和HP-β-CD的用量,同时获得了较高的产量。
   进一步研究了水相体系中诱变菌株M.neoaurum ZJUVN-08静息细胞转化植物甾醇的条件,确定静息细胞菌龄为72 h,细胞浓度45 g/L、pH为7.0的0.05mol/L Tris-HCl缓冲液中转化96 h条件最佳。静息细胞重复使用4次以后,在底物浓度为8.89 g/L时,摩尔转化率降为56.04%。
摘要:新疆野苹果(Malus sieversii(Lebed.)Roem.)可能是栽培苹果(Malus domestica Borkh.)的祖先,属珍稀的第三纪孑遗物种,不但变异丰富,而且环境适应能力强,是栽培苹果品种改良的优异资源,且有园林应用价值.本文对新疆野苹果的发生、分类学地位、群体遗传结构、遗传多样性、生存现状及核心种质构建与新疆野苹果的保护保存等作一综述,旨在为新疆野苹果这一珍贵资源的科学保护与有效利用提供参考。
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