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摘要:为深入了解Cr6+对海水鱼类的毒性机理,利用静水式鱼类急性毒性测试方法,开展了Cr6+对牙鲆(Paralichthys olivaceus)仔鱼和幼鱼的急性毒性效应研究.获得了24、48、72、96 h所对应的半致死浓度LC50值,计算了Cr6+对牙鲆的安全浓度,并对急性毒性下红细胞核异常率和鳃的损伤进了观察.结果表明,Cr6+对牙鲆仔鱼24、48、72、96 h的LC50分别为75.19、67.13、49.77、31.09 mg·L-1;对幼鱼的LC50分别为462.13、435.36、390.19、322.41 mg·L-1.安全浓度分别为16.05 mg·L-1(仔鱼)和115.91 mg·L-1(幼鱼).Cr6+对牙鲆仔鱼的毒性属于中等毒性,而对幼鱼的毒性为低等毒性.Cr6+对红细胞核异常率的影响呈现质量浓度、处理时间-效应关系.Cr6+会造成牙鲆鳃的损伤,且损伤程度随着浓度和时间的增加而加重.本研究可为进一步开展Cr6+对海水鱼类的毒性机理研究奠定基础....
摘要:牙鲆是我国重要的海水养殖鱼类,从苗种培育到成鱼养殖阶段存在着多种病害,其中多数病害已为人所知,而有些病害还曾被进行过深入研究;但随着养殖时间的推移,不断有一些新的疾病出现,新的疾病往往相关研究、报道较少,这也给相关从业者进行这类疾病的防控带来了很大困扰.笔者在2016年春季进行野生牙鲆与全雌牙鲆“北鲆一号”“北鲆二号”大规模苗种培育比较研究时遇到了一种新的牙鲆苗种疾病——“侧线神经肿胀症”,对于这种疾病,国内外从未有过相关报道,笔者在经过研究、摸索后,找到了该病的一些防控措施,现将该病的流行情况、主要症状及防控方法进行详细介绍,希望能够给相关从业者以参考....
[硕士论文] 崔剑斌
水产养殖 河北农业大学 2018(学位年度)
摘要:牙鲆是一种具有经济价值的海洋鱼类,在亚洲许多国家的水产养殖业中都具有重要的地位。然而,日益增加的工业化养殖使牙鲆对多种病原菌(细菌、病毒和寄生虫)敏感,各种传染病的频发造成了严重的经济损失。这其中淋巴囊肿病的暴发,已成为限制牙鲆养殖发展的瓶颈。为了减少淋巴囊肿病的影响,通过研究相关的免疫系统来探索淋巴囊肿病毒的防御机制,对建立抗病品种或开发有效的疫苗和抗微生物药物都具有重要的意义。本文主要实验结果如下:
  (1)对患淋巴囊肿病(S)和抗淋巴囊肿病(R)的牙鲆头肾进行了转录组重测序,所得到的原始数据经过质控后,我们在抗病组获得了平均序列条数为50712071条,包含5056521585bp的clean data;患病组获得了平均序列条数为53221069条,包含5307450541bp的clean data,碱基质量值超过20的在96.91%以上。并且所得到的clean data与牙鲆参考转录组mapping比率超过了82.73%。
  (2)以p<=0.05&FC>=2作为筛选条件,将所有样本两两之间进行了比较,共得到了1024个差异表达基因,其中患病组相对抗病组表达上调的有430个,表达下调的有594个。在经过GO富集分析后,这些差异表达基因显著富集在与代谢相关的生物过程(BP)和与转运蛋白活性相关的分子功能(MF)中。经KEGG的pathway分析后,所有的差异表达基因注释到了260条pathway,其中有40条pathway显著差异(P≤0.05),我们挑选出了12条与免疫相关的pathway,并从中筛选出了在多个payhway中起关键调控作用的几个表达差异显著的基因进行进一步分析。
  (3)在本课题组前期,曾对牙鲆患淋巴囊肿病和抗淋巴囊肿病的个体头肾进行了转录组测序。在无参转录组条件下,通过序列拼接,组装和注释后,获得了3个在抗病组高表达的基因:thbs2、tbc1d25和efhd2。利用RACE-PCR技术,从牙鲆组织总RNA中克隆了3个基因的全长序列,结果显示:thbs2的基因全长3991bp,含长度为3558bp的ORF,编码1185个氨基酸。其中5'UTR的长度为443bp;tbc1d25的基因全长3254bp,含长度为2604bp的ORF,编码867个氨基酸。其中5'UTR的长度为265bp,3'UTR的的长度为385bp;efhd2的基因全长1588bp,含长度为702bp的ORF,编码233个氨基酸。其中5'UTR的长度为433bp,3'UTR的长度为453bp。氨基酸同源序列比对中,牙鲆的这3个基因,均与尖吻鲈的同源性较高。并且氨基酸同源比对和系统进化分析都表明牙鲆的thbs2、tbc1d25和efhd2这3个基因与各种脊椎动物保持较高的同源性(71%到95%)。
  (4)利用qRT-PCR检测了,thbs2、tbc1d25和ethd2这三个基因在患淋巴囊肿病和抗淋巴囊肿病的牙鲆不同组织中的表达情况,结果显示:这3个基因在抗病组的血液中表达量均表现出上调,并且tbc1d25的表达差异显著,而thbs2在患病组的血液中几乎不表达;thbs2在大多数抗病组组织中,均表现出表达上调,并且在肝脏、鳃、心脏和肌肉中表达差异显著。
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