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摘要:分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿中MtCYP450的表达特性和对胁迫处理的反应.该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31 kDa,等电点为6.85.序列比对发现MtCYP450与狭叶羽扇豆和大豆中的2个CYP450家族94亚家族蛋白同源性较高,因此,MtCYP450属于细胞色素P450的CYP94亚家族.荧光定量PCR结果显示MtC-YP450在叶中表达最高,茎中次之,根中最少.在胁迫处理(200 mM NaCl、5%PEG、100μM ABA和100μM Me-JA)8~12 h后,叶片中MtCYP450基因表达量显著上升,表明该基因受逆境和生长调节剂诱导表达.T2代超表达MtCYP450基因拟南芥在PEG和MeJA处理后MtCYP450表达量均上升;对异源超表达拟南芥的生长情况分析显示转基因拟南芥在NaCl(125 mM)处理后根长是野生型的1.63倍,表明MtCYP450基因增强了拟南芥根系的抗盐性.因此,MtCYP450基因可能对植物抵抗非生物胁迫具有重要作用....
[硕士论文] 崔会婷
饲草遗传育种与种子科学 中国农业科学院 2018(学位年度)
摘要:植物细胞色素P450(CYP450)超基因家族编码的单加氧酶参与多种催化反应,在植物防御非生物胁迫中具有重要作用。本文分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)中MtCYP450表达特性及功能,以期为改善豆科牧草耐盐性提供参考。主要研究结果如下:
  1、克隆蒺藜苜蓿MtCYP450并进行生物信息学分析。该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31kDa,等电点为685。二级结构主要由α-螺旋(约44%)组成,β-折叠、转角结构和无规则卷曲分别约占20%。序列同源性分析显示,蒺藜苜蓿MtCYP450与豆科植物狭叶羽扇豆(Lupinus angustifolus)和大豆(Glyctne max)中的CYP94亚家族氨基酸序列同源性较高,依次为75.7%和739%。因此,MtCYP450属于细胞色素P450的CYP94亚家族。
  2、分析MtCYP450在蒺藜苜蓿不同组织中的表达量及对胁迫处理的反应。荧光定量PCR结果显示MtCYP450在苜蓿根、茎、叶、花和果荚中均有表达,其中叶片中表达量最高,根中最低,仅为叶片的12%。在胁迫处理(200mM NaCl、5%PEG、100μM ABA和100μM MeJA)后,叶片中MtCYP450基因表达量显著上升。因此,蒺藜苜蓿MtCYP450受以上胁迫诱导表达。
  3、获得耐盐性增强的超表达tCYP450拟南芥。构建超表达载体pBI121-tCYP450,转化拟南芥并获得8个阳性转基因株系。qRT-PCR证明转基因株系中外源MtCYP450在拟南芥中成功转录。T2代超表达MtCYP450拟南芥在NaCl和PEG处理后MtCYP450表达量均上升。对转MtCYP50拟南芥的生长情况分析显示转基因拟南芥在NaCl(125mM)处理后根长是野生型的163倍,表明MtCYP450增强了拟南芥根系的耐盐性。
  4、分别获得了超表达和敲除MtCYP450基因的转基因苜蓿。将表达载体pBI121-MtCYP450转化蒺藜苜蓿,通过基因组水平和转录水平鉴定获得32个超表达M4tCYP50蒺藜苜蓿株系。同时,利用CRISPR/Cas9技术,构建基因敲除表达载体pRGEB31-MtCYP450并转化蒺藜苜蓿。测序结果表明已获得12个MtCYP450基因敲除的突变植株株系。该材料将用于蒺藜苜蓿MtCYP50基因耐盐性研究。
[专利] 实用新型 CN201720347692.6
摘要:一种植物半干培养装置,包括内部装有两层营养液储存基质(5)的培养袋(1),培养袋(1)上端开口,培养袋(1)的开口两侧各插入一根补水管(3),通过两根补水管注入植物营养液,培养袋(1)外部套有遮光袋,培养袋(1)开口中部插入一根植物生长固定管(4)。本实用新型植物半干培养装置提供了一种能够模拟土壤生长环境的半干培养条件的培养装置,适用于多种植物幼苗的培养和观察。
[专利] 实用新型 CN201621493126.8
摘要:本实用新型公开了一种植物种子硬实破除装置。本装置包括依次套设于研磨杆上的套筒、种子硬实破除部件、螺母。其中,种子硬实破除部件包括固定垫片A、砂纸、海绵垫片、固定垫片B。该装置体积小,重量轻,特别适用于对少量植物种子进行种子硬实破除。该装置通过手动摇臂带动固定垫片B和砂纸进行研磨,使用时具有省力的优点。针对不同大小的植物种子,通过调节固定螺母的松紧来调节两个垫片之间的距离,从而适应对直径小于5mm的植物种子进行硬实破除。
[专利] 发明专利 CN201611259348.8
摘要:本发明公开了一种植物果荚破碎脱粒装置及其使用方法。本装置包括依次套设于研磨杆上的套筒、果荚破碎脱粒部件、螺母。果荚破碎脱粒部件包括磨盘A、磨盘B。本发明可以破除坚硬带刺的果荚并实现种子脱粒;通过调节磨盘之间的间隙实现对直径小于20mm的不同种类的植物果荚进行研磨破碎;该装置可以对坚硬带刺植物果荚实现一边研磨破碎一边种子脱粒的效果,而对种子损伤程度低。
[专利] 发明专利 CN201510684650.7
摘要:本发明公开了一种植物无菌水培装置,包括玻璃杯(1)和固定在其内部的底部的至少一个滤网(2),在所述滤网(2)内设置有培养基质(3),所述玻璃杯(1)的顶部开口采用封口膜(4)封口,在所述玻璃杯(1)内设置有水培液(5),所述水培液(5)的液面高度低于所述培养基质(3)的上表面。本发明植物无菌水培装置可以通过高温灭菌处理后对多种植物进行快速高效的无菌水培。本发明还公开了采用该装置进行水培苜蓿的根瘤菌接菌及结瘤效果的评价方法,所述方法具有操作简便、苜蓿生长速度快、水培液更换容易、根瘤菌接菌后结瘤效果观察方便等优点。
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