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哈尔滨医科大学
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[硕士论文] 崔丝露
流行病与卫生统计学 哈尔滨医科大学 2014(学位年度)
摘要:目的:本研究通过建立实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimentalautoimmune thyroiditis,EAT) Lewis大鼠模型,探讨趋化因子在过量碘诱发自身免疫性甲状腺炎中的作用机制,以及自身免疫性甲状腺动物模型的免疫功能状态。
  方法:无特定病原体(Specific pathogen Free,SPF) Lewis雌鼠4周龄135只,体重80g左右。将大鼠按体重随机分为6组,即①对照组(NC)20只,喂普通饲料、蒸馏水;②模型组(TG)25只,喂普通饲料、蒸馏水;③高碘Ⅰ组(HⅠ)20只,喂普通饲料、含碘离子为25.7mg/L的去离子水;④高碘模型Ⅰ组(HⅠ+TG)25只,喂普通饲料、含碘离子为25.7mg/L的去离子水;⑤高碘Ⅱ组(HⅡ)20只,喂普通饲料、含碘离子为423.3mg/L的去离子水。⑥高碘模型Ⅱ组(HⅡ+TG)25只,喂普通饲料、含碘离子为423.3mg/L的去离子水;在对动物进行碘干预的同时,对②、④、⑥组大鼠于皮下注射含牛甲状腺球蛋白8mg/mL不完全弗氏佐剂共0.1ml,两周一次,共三次。
  造模完成后第8周,剪尾取血,收集尿液,造模后第15周末处死动物,留取血清,-20℃冻存,并取大鼠一侧甲状腺组织于4%多聚甲醛中固定备检,另一侧甲状腺在-80℃保存备检。处死大鼠两周前,采集尿液,-20℃冻存,砷铈催化分光光度法(WS/T107-2006)测定大鼠尿碘;大鼠甲状腺相对重量用甲状腺湿重(mg)/大鼠体重(g)来表示;甲状腺组织经甲醛固定后石蜡包埋切片,厚度0.4um观察各组大鼠的甲状腺组织病理学改变;放射免疫法检测大鼠甲状腺功能:FT3、FT4、TSH、TGAB、TPOAB;免疫组织化学法检测大鼠甲状腺IP-10、Mig、 CXCR3、CD4+T细胞表达情况;实时荧光定量PCR检测甲状腺组织IP-10、Mig、CXCR3mRNA水平;ELISA方法检测血清趋化因子IP-10含量。
  结果:
  1.各实验组大鼠尿碘均较对照组高(F=44.428,p<0.05),并随着碘摄入量的增高尿碘水平也明显升高。各实验组大鼠的体重和甲状腺质量没有明显差异;各实验组大鼠相对质量均较对照组大鼠有所增加(F=3.459,p<0.05)。
  2.对照组甲状腺组织滤泡发育成熟,大小均匀,呈小叶状排列;TG组、HⅠ组滤泡灶性紊乱,腺泡间少量淋巴细胞浸润;HⅠ+TG组中等程度破坏,少量淋巴细胞浸润,滤泡间可见纤维组织增生;HⅡ+TG和HⅡ组弥漫性滤泡损害,滤泡融合,弥漫性炎细胞浸润。
  3.免疫组织化学结果表明大鼠甲状腺组织中CD4+T淋巴细胞的表达情况,对照组基本无表达,TG组、HⅠ组少量表达; HⅡ、HⅡ+TG组弥漫性浸润,滤泡结构破坏严重,呈弥漫性黄染。
  4.NC、HⅠ、HⅡ组大鼠血清抗体结合率均<30%,TG组、HⅠ+TG组、HⅡ+TG组大鼠血清抗体结合率均>50%,较其它三组比较有统计学意义。各组大鼠血清TPOAb水平均较对照组有所增高,其中TG组达到最高,但无统计学意义。
  5.各实验组大鼠的血清FT3,FT4均较对照组高,且各模型组有统计学意义(p<0.05),与HⅠ组比较,HⅠ+TG、HⅡ+TG组FT3水平更高,FT4也是如此。各组大鼠血清TSH值较对照组低,并随着碘剂量的增高逐渐降低,差异有统计学意义(p<0.05)。
  6.在甲状腺组织中,主要是滤泡上皮细胞表达趋化因子IP-10,部分炎性细胞免疫组化染色呈现阳性;而Mig主要表达于炎性细胞中,而滤泡上皮细胞表达量很少、几乎阴性,旁细胞阴性;CXCR3间质阳性表达,滤泡上皮细胞弱阳性,旁细胞阳性。
  7.各组大鼠血清IP-10水平均较对照组高,其中以HⅠ+TG组达到最大值(p<0.05),并且HⅠ+TG,HⅡ+TG均较HⅠ和HⅡ组的IP-10水平高,非模型组随着碘营养水平的提高,IP-10水平也逐渐升高。与对照组相比,各组大鼠随着碘剂量的增加甲状腺IP-10mRNA表达水平不同(F=9.294,P<0.05),在HⅠ组的碘营养水平下,甲状腺IP-10mRNA表达量增加,而在HⅡ组的碘营养水平下表达量降低。MIig、CXCR3也有相同的趋势。
  8.与NC组相比,所有实验组大鼠的血清细胞因子IL-4、IFN-γ水平都有所增加。但血清细胞因子IL-4水平,只有TG组与HⅡ+TG组较对照组增加显著,而血清细胞因子IFN-γ水平,只有HⅠ+TG组较对照组增加显著。与TG组相比,除HⅡ+TG组血清细胞因子IL-4增加外,其余各实验组血清细胞因子IL-4水平均下降;与TG相比,HⅠ组与HⅡ+TG组血清细胞因子IFN-γ水平下降,HⅠ+TG组与HⅡ组血清细胞因子IFN-γ水平增加,但只有HⅠ+TG组有统计学意义。
  结论:
  1.在建立Lewis大鼠EAT动物模型方面,与单独的碘剂或者TG免疫所致自身免疫性甲状腺炎相比,二者联合可诱导和加重具有明显AITD遗传倾向的动物的实验性自身免疫性甲状腺炎,且CD4+T细胞在高碘水平下的EAT大鼠甲状腺组织中的表达量增加。
  2.随着碘摄入水平的升高,在轻度高碘组甲状腺组织高表达趋化因子IP-10和Mig,与甲状腺内趋化因子受体CXCR3结合,吸引淋巴细胞到达反应部位,导致自身免疫性甲状腺疾病的发生。在重度高碘组,趋化因子IP-10和Mig有下降的趋势,很可能是随着病程的延长和病情的加重,另一种趋化因子开始发挥作用。
[期刊论文] 崔丝露 孟凡刚 于钧
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CSTPCD 北大核心
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摘要:目的 观察碘对牛甲状腺球蛋白(bTg)诱导的实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠血清趋化因子IP-10及甲状腺组织IP-10 mRNA表达的影响.方法 选择4周龄雌性Lewis大鼠135只,采用随机数字表法按体质量分为对照组(NC,20只)、模型组(TG,25只)、高碘Ⅰ组(HⅠ,20只)、高碘模型Ⅰ组(HⅠ +TG,25只)、高碘Ⅱ组(HⅡ,20只)和高碘模型Ⅱ组(HⅡ+ TG,25只).HⅠ、HⅠ +TG组大鼠饮用含碘25.7 μg/L的去离子水,HⅡ、HⅡ+ TG组大鼠饮用含碘423.3 μg/L的去离子水,NC、rG组饮用蒸馏水.TG、HⅠ +TG和HⅡ+TG组大鼠皮下注射含8g/L bTg的不完全弗氏佐剂0.1 ml,每2周1次,共3次.15周末处死动物,采用砷-铈催化分光光度法(WS/T 107-2006)测定大鼠尿碘,光镜下观察甲状腺组织病理学改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IP-10含量,实时荧光定量PCR法检测甲状腺IP-10 mRNA表达.结果 各组大鼠尿碘中位数比较差异有统计学意义(x2=106.4,P<0.05).其中TG、HⅠ、HⅠ +TG、HⅡ、HⅡ +TG组大鼠尿碘中位数(800.08、18 633.20、13 869.08、87 889.97、61 661.51 μg/L)均高于NC组(456.45 μg/L,P均<0.05).各组大鼠病理改变等级随着碘摄入的提高逐渐加重,其中NC组大鼠甲状腺结构正常;TG组大鼠甲状腺滤泡间少量淋巴细胞浸润;HⅠ组大鼠甲状腺滤泡排列不整齐、部分滤泡组织破坏;HⅡ组大鼠甲状腺滤泡间大量炎性细胞浸润;HⅡ+ TG组大鼠甲状腺滤泡严重破坏、炎细胞弥漫性浸润.6组大鼠血清IP-10含量比较,差异无统计学意义(F=1.462,P> 0.05).HⅠ +TG组大鼠甲状腺IP-10 mRNA表达(2.80±1.73)高于NC组(1.65±1.62)和HⅠ组(1.07±1.00),HⅡ(0.64±0.64)、HⅡ +TG组(0.80±0.49)低于HⅠ +TG组(P均<0.05).结论 过量碘摄入可增加EAT大鼠甲状腺组织中炎性程度,加重病理改变;这可能与过量碘影响甲状腺IP-10 mRNA表达有关....
[期刊论文] 崔丝露 刘守军 于钧
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CSTPCD 北大核心
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摘要:目的 应用甲状腺球蛋白(Tg)诱导大鼠建立实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型,观察不同碘营养状态下大鼠甲状腺的病理改变和CD4+T淋巴细胞的浸润程度.方法 4周龄雌性Lewis大鼠135只(体质量约80 g),按体质量采用随机数字表法分为对照组(NC)、模型组(TG)、高碘Ⅰ组(HⅠ)、高碘模型Ⅰ组(HⅠ+TG)、高碘Ⅱ组(HⅡ)和高碘模型Ⅱ组(HⅡ+TG),NC、HⅠ、HⅡ组每组20只大鼠,TG、HⅠ +TG、HⅡ+TG组每组25只大鼠.HⅠ、HⅠ+TG组大鼠饮用含碘离子为25.7 mg/L的去离子水,HⅡ组和HⅡ+TG组大鼠饮用含碘离子为423.3 mg/L的去离子水,NC和TG组饮用蒸馏水.TG、HⅠ+TG、HⅡ+TG组大鼠皮下注射含8.0 g/L Tg的不完全弗氏佐剂0.1ml,两周1次,共3次.各组大鼠于建立模型后第8周,收集尿液;于建立模型后第15周末处死动物,采集血样、取甲状腺组织.砷铈催化分光光度法测定大鼠尿碘;苏木精-伊红(HE)染色法观察甲状腺组织病理学改变;免疫组织化学方法检测甲状腺组织炎性细胞水平.结果 各组大鼠甲状腺相对质量组间比较差异有统计学意义(F=44.428,P<0.05).其中与NC组(0.085 25 mg/g)比较,各实验组大鼠甲状腺相对质量(TG、HⅠ、HⅠ+TG、HⅡ、HⅡ +TG组:0.095 22、0.092 85、0.097 48、0.096 55、0.095 33 mg/g)均升高(P均< 0.05);各组大鼠尿碘组间比较差异有统计学意义(x2=106.4,P<0.05).其中TG、HⅠ、HⅠ+TG、HⅡ、HⅡ+ TG组大鼠尿碘(800.08、18 633.20、13 869.00、87 889.97、61 661.51μg/L)均高于NC组(456.45μg/L、P均< 0.05).各组大鼠甲状腺病理改变随着碘摄入的增加逐渐加重.NC组大鼠甲状腺结构正常;TG、HⅠ组甲状腺滤泡间少量淋巴细胞浸润;HⅠ+TG组可见淋巴细胞浸润到滤泡内部;HⅡ、HⅡ +TG组滤泡融合,弥漫性炎细胞浸润.各组大鼠甲状腺随着碘摄入的提高CD4+T淋巴细胞浸润程度有加重的趋势.NC组基本无CD4+T淋巴细胞的阳性染色出现;TG组有少量阳性细胞;HⅠ组有散在的黄褐色阳性细胞;HⅠ+TG组呈小灶性淋巴细胞浸润;HⅡ组滤泡扩张明显;HⅡ+ TG组滤泡结构破坏严重,呈弥漫性黄染.结论 过量碘摄入和Tg免疫可诱发和加重大鼠自身免疫性甲状腺炎的发生,病理改变情况随着碘摄入的提高而加重.过量碘摄入还可使EAT大鼠甲状腺组织中CD4+T淋巴细胞的浸润程度增加....
[专利] 发明专利 CN201911001521.8
摘要:本申请提供了一种基于迁移学习的X射线影像处理方法及系统,该系统包括:X射线影像接收模块,用于接收输入的X射线影像数据;X射线影像处理模块,利用优化模型,对所述X射线影像进行处理,并进行分类;所述优化模型通过以下方式获得:建立VGG‑16卷积神经网络,并基于X射线影像分类结果数量,放弃所述VGG‑16卷积神经网络中的全连接层,并对训练参数进行优化,得到特定全连接层,并获得完整模型;对所述完整模型进行优化,得到优化模型;输出模块,接收所述X射线影像处理模块的输出数据,并输出分类结果。本申请的方案针对大骨节异变的X射线影像处理及识别准确率高,且系统拟合情况优越,训练效率高。
摘要:近年研究发现,碘对自身免疫性甲状腺疾病的发生、发展以及预后都有一定的影响,趋化因子IP-10在自身免疫性疾病等多种疾病的病理过程中起重要作用。本实验拟通过建立实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型,研究碘与IP-10表达水平的关系,探讨趋化因子IP-10在碘诱发自身免疫性甲状腺炎的作用。本研究发现摄碘水平的不同与小鼠甲状腺炎的发病率明显相关,说明碘与自身免疫性甲状腺疾病的发病密切相关。
摘要:实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimental Autoimmune Thyroiditis,EAT)动物模型是研究人类自身免疫性甲状腺炎(HT)的重要工具,本实验通过建立不同碘摄入水平下用甲状腺球蛋白免疫的小鼠模型,以小鼠脾细胞和血淋巴细胞为研究对象,观察实验小鼠免疫功能的变化,探讨碘在诱发EAT中的作用机制。本实验中,在基础培养基条件下,稍高摄碘水平(高碘模型I组)小鼠的脾脏淋巴细胞增殖明显,而较高摄碘水平下(高碘模型II1组)小鼠的脾脏淋巴细胞增殖并不显著,说明摄碘水平与小鼠免疫功能有一定关系;本实验中,各实验组小鼠脾细胞培养液上清液INF-,水平有所增加,但只有模型组增加明显,而在增加摄碘水平的情况下小鼠脾细胞培养液上清液INF-,水平并未发生明显改变,说明在Tg及高碘协同刺激下,高碘并未增强Tg对小鼠免疫功能的影响,与以往研究结论不一致,有待再次实验进行验证。
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