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摘要:为明确左炔诺孕酮(L)和炔雌醚(Q)2种不育剂对鼠类繁殖的影响,在实验室以布氏田鼠(Lasiopodomys brandtii)为研究对象,设置L( +/ -) ×Q( +/ -)4组双因素试验,每组7对个体,连续7 d以灌胃法给药,剂量为2 mg/kg.灌胃试验完成后配对饲养,记录动物体质量与繁殖情况;30 d后解剖动物,测定繁殖器官质量和血清激素水平.结果表明,Q可以显著降低布氏田鼠的体质量,在灌胃后14 d时降低最多,比灌胃前体质量降低了18.16%.L和Q均显著抑制布氏田鼠的繁殖,L-Q-组个体怀孕率为85.70%,L+Q-组为7.14%,其他2组均无怀孕个体.L显著升高睾丸指数( -2.11% ~66.67%)和附睾指数(18.18% ~160.00%),Q促进L对二者的升高作用;Q显著抑制子宫指数( -64.20% ~ -30.56%)和睾丸指数( -43.16% ~ -3.22%),L则削弱了Q对二者的抑制作用.Q未显著影响血清雌二醇、睾酮、促卵泡生成素和皮质酮的含量;L显著抑制血清促卵泡生成素的表达量( -11.83% ~ -55.38%),Q提升L的抑制作用.总之,Q对布氏田鼠的繁殖具有抑制作用,而L的抑制作用较弱,二者混用可降低Q的有效抑制作用....
[硕士论文] 季志鸿
细胞生物学 郑州大学 2016(学位年度)
摘要:目前鼠害可严重损害经济作物和传播疾病,目前最经济适用的控制技术为不育控制技术。左炔诺孕酮(L)是一种人工合成的孕激素,炔雌醚(Q)是一种人工合成的雌激素,已有很多研究证明二者对不同的鼠类可产生或强或弱的繁殖抑制效果。不育剂让动物不育的同时,也会有有毒性,过高的剂量会导致鼠类中毒致死。因此准确地估计不育剂的毒性尤为重要。CYP1A2是一种细胞色素P450(cytochrome P450,cytochromeCYPs,简称P450)分子,负责一些药物、前毒性物质和前致癌物在体内的活化,口服避孕药可以抑制其活性。布氏田鼠(Lasiopodomys brandtii)主要分布在俄国外贝尔加湖地区、蒙古北部及东部、黑龙江、吉林、辽宁、河北坝上等地,其破坏草原植被,啃食农作物,传播疾病,造成严重的鼠害。
  本研究以布氏田鼠为研究对象,灌胃给药L、Q,以及二者1:1的混合物,通过石蜡切片鉴定生殖系统变化、ELISA法测生殖相关激素、荧光定量PCR测三种不育剂对CYP1A2 mRNA表达量的影响,来筛选能够指征三种不育剂毒性大小的一种P450分子,从而为鼠害防治提供依据。主要进行了以下几个方面的研究:(1)不育剂对布氏田鼠繁殖的影响(2)不育剂对布氏田鼠生殖系统的影响(3)不育剂对布氏田鼠生殖激素的调控。(4)不育剂对CYP1A2的调控作用。
  主要结果如下:
  (1)Q可以显著降低布氏田鼠的体重,而L不能,在灌胃后14d时降低最为显著。L、Q、L-Q均对布氏田鼠的繁殖起到了抑制作用,表现为怀孕率几乎为0,仅L组有一组生育,且妊娠期延长,胎仔数减少,胎仔未成形,子宫红肿,而对照组怀孕率为85.7%,平均胎仔为4.86±0.53,均显著高于给药组。
  (2)不育剂对雌鼠的子宫有明显的影响,而对卵巢影响不显著,Q可以显著降低子宫重量,L效果不显著。给药组子宫形态呈现变细、变薄、易断现象,但规律性不强。不育剂对睾丸和附睾有明显的影响,Q均可以显著降低布氏田鼠睾丸和附睾的重量,L和L-Q作用效果不显著。切片显示雄鼠睾丸、附睾内曲细精管量减少,管腔空虚,管内精子细胞数减少、凋亡,Q组最为显著,L组、L-Q组不显著。
  (3)两种不育剂对促卵泡刺激素有明显的影响,而对雌二醇、睾酮、皮质酮没有明显的影响。L-Q组的促卵泡刺激素相比对照组有所降低,L、Q和对照组相比无太大变化,双因素方差得 L是起主要作用的因素,Q效果不显著,二者也没有交互作用。也即L可以显著抑制促卵泡刺激素的表达,L和Q对雌二醇、睾酮、皮质酮的表达不起作用。
  (4)不育剂对CYP1A2有明显的影响,Q可以显著抑制CYP1A2的表达,L不能,但二者有显著的交互作用。Q组肝损伤严重,外形糜烂充水,有点状坏死区,颜色变暗,表面粗糙。切片显示肝细胞扩大,组织水肿,肝细胞着色变浅,并伴有出血的状况,肝密度变小,腔隙增多。其他两组结果不显著。
  结论:
  (1)2mg/kg的Q可以抑制布氏田鼠的体重,L和Q均可以降低怀孕率和胎仔数,L和Q均起到了让布氏田鼠不育的目的,同时又不会让老鼠致死。2mg/kg是一个合适的不育剂量。
  (2)Q可以显著抑制睾丸、附睾的发育,对子宫和卵巢无太大影响,它的不育机制是抑制睾丸和附睾内精子的生成和成熟。L对子宫、卵巢、睾丸、附睾作用均不显著。说明Q是一种雄性不育剂。
  (3)L可以显著抑制 FSH的表达,它在激素方面的不育机制是通过抑制FSH的表达来起到抑制排卵的目的。说明L是一种雌性不育剂。
  (4)Q可以显著抑制CYP1A2 mRNA的表达,L效果不显著。CYP1A2抑制表现为明显的肝损伤,Q可以通过显著抑制CYP1A2的表达从而造成肝中毒。
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