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摘要:目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路与幼兔激素性股骨头缺血坏死的关系.方法 选用8周龄健康新西兰幼兔35只,体重在1.2~1.7 kg.按照随机数字表法将其分为激素注射组25只,对照组10只.前者臀肌注射糖皮质激素7.5 mg/kg,1周2次;后者注射等体积生理盐水,总共注射8周.分别于注射后4、8周时行双髋关节X线正位片、CT检查.注射8周后处死全部实验动物并立即取出双侧股骨头.根据X线正位片与CT检查结果判断发病与否,并将激素注射组分为发病组和未发病组.用RT-PCR方法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、脂联素(Adipoq)、β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)、骨形成蛋白-2(BMP-2) mRNA在各组股骨头中的表达情况,比较其在各组中的表达差异.结果 激素注射组动物存活22只,被认为发生股骨头坏死6只(发病组),未发病16只(未发病组),股骨头坏死发生率为27.3% (6/22).RT-PCR示:β-catenin在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.22±0.01、0.35±0.09和1.07±0.41,发病组与未发病组、对照组比较,差异有统计学意义(t=4.94、10.60,P<0.05);LRP5在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.22±0.05、0.35±0.12和1.12±0.36;发病组与另两组比较,差异均有统计学意义(t=4.39、9.93,P<0.05);Adipoq在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为17.84±5.51、3.33±1.26和1.11±0.27,发病组与另两组比较,差异均有统计学意义(t=5.88、12.01,P<0.05);Caspase-3在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为3.10±0.90、1.29±0.35和1.06±0.24,发病组与另两组比较,差异均有统计学意义(t=7.15、7.75,P<0.05);BMP-2在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.08±0.05、0.31±0.21和1.12±0.32,发病组与另两组比较,差异均有统计学意义(t=2.93、8.08,P<0.05).在对照组、未发病组及发病组中,β-catenin与LRP5的表达均呈正相关关系,Caspase-3与β-catenin呈负相关关系,Caspase-3与LRP5呈负相关关系,Adipoq与β-catenin呈负相关关系,Adipoq与LRP5呈负相关关系,BMP-2与β-catenin呈正相关关系,BMP-2与LRP5呈正相关关系.结论 糖皮质激素对Wnt/β-catenin信号通路的抑制可能促进股骨头骨和软骨细胞的凋亡以及脂肪细胞的形成,抑制其成骨能力.
摘要:目的 探讨脱细胞异体真皮联合头刃厚皮修复儿童瘢痕创面的临床效果.方法 52例外伤及烧伤后瘢痕,根据瘢痕切除后创面封闭术式分为复合植皮组和自体植皮组各26例,一次性切除瘢痕后,复合植皮组采用脱细胞异体真皮联合头刃厚皮移植修复创面,自体植皮组采用自体刃厚皮片或薄中厚皮片移植修复创面.比较2组植皮成活率和植皮后创面完全愈合时间,随访10个月,观察创面移植区域的色泽、质地、皮下丰满度、瘢痕增生情况及对关节功能的影响等.结果 复合植皮组创面植皮成活率(92.31%)、创面愈合时间(12.62±3.18)d]与自体植皮组[96.15%、(11.90二2.61)d]比较差异均无统计学意义(P>0.05);复合植皮组植皮区丰满,瘢痕增生轻,色泽、质地优于自体植皮组(P<0.05);复合植皮组关节功能受影响5例,自体植皮组关节功能受影响10例,差异有统计学意义(P<0.05);复合植皮组头皮供皮区均无瘢痕增生,自体植皮组供皮区色素改变1 6例,瘢痕形成10例,其中2种情况均发生者8例,供皮区瘙痒16例,供皮区反复破溃3例,影响睡眠5例.结论 脱细胞异体真皮联合头刃厚皮修复儿童瘢痕丰满度高、瘢痕增生轻,功能恢复好,供皮区损伤小.
摘要:目的:对比观察增生期和退化期小儿毛细血管瘤组织中磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达,探讨AMPK/mTOR通路在小儿毛细血管瘤消退过程中的作用。方法收集50例小儿毛细血管瘤患者的瘤组织标本,按照Mulliken分类法24例患儿瘤组织处于增生期(增生期组),26例患儿瘤组织处于退化期(退化期组),采用免疫组织化学法检测其中 AMPK、mTOR的积分光密度。结果增生期组 AMPK、mTOR的积分光密度分别为33.94±12.78、182.43±47.10,退化期组分别为85.87±19.53、47.22±44.52。两组毛细血管瘤组织AMPK、mTOR积分光密度相比,P均<0.01。50例小儿毛细血管瘤患者瘤组织AMPK、mTOR积分光密度值呈负相关(r=-0.78,P<0.01)。结论与增生期小儿毛细血管瘤组织相比,消退期小儿血管瘤组织中AMPK表达升高,mTOR表达降低。AMPK/mTOR信号通路参与小儿毛细血管瘤的消退过程。
摘要:目的:系统评价蛋白 C 与儿童股骨头缺血性坏死的相关性。方法通过计算机检索 PubMed、Embase、Cochrane library、Web of Science、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、万方数据库,检索时间均为建库至2016年2月,收集国内外有关蛋白 C 与儿童股骨头缺血性坏死关联的相关文献。并用纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)文献质量评价表对纳入的文献进行质量评价,提取数据,采用 Stata 11.0软件对数据进行Meta 分析。结果共纳入文献14篇,其中12篇文献对蛋白 C 与儿童股骨头缺血性坏死患病组与对照组之间进行了比较,Meta 分析结果表明:蛋白 C 在患病组及对照组之间差异无统计学意义[比值比(OR)=1.41,95%可信区间(CI)(0.87,2.28),P =0.147];5篇文献对蛋白 C 与儿童股骨头缺血性坏死白种人患病组与对照组之间进行了比较,Meta 分析结果表明:蛋白 C 在白种人患病组及对照组之间差异无统计学意义[OR =3.66,95%CI(1.83,7.29),P =0.612];3篇文献对蛋白 C 与儿童股骨头缺血性坏死黄种人患病组与对照组之间进行了比较,Meta 分析结果表明:蛋白 C 在黄种人患病组及对照组之间差异无统计学意义[OR =0.59,95%CI (0.05,6.72),P =0.080]。结论蛋白 C 与儿童股骨头缺血坏死无明显相关性。
[期刊论文] 俞松 季一发 于怀景
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北大核心 CSTPCD CSCD CA
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摘要:儿童股骨头缺血性坏死是一种自愈自限性疾病,病因不清,治疗方法多样.现根据近年来的文献报道并结合笔者的研究,就其基础与临床研究现状作概要介绍,以期提高广大儿科工作者对该病的认识.
[硕士论文] 季一发
小儿外科学 遵义医学院 2017(学位年度)
摘要:目的:
  检测R-spondin1、DKK-1、β-catenin在幼兔激素性股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达,比较不同剂量甲基泼尼松龙对人成骨细胞中R-spondin1的表达及人成骨细胞凋亡的影响,探讨糖皮质激素致幼兔股骨头缺血坏死的相关机制。
  方法:
  1.幼兔股骨头坏死组(n=12):激素性股骨头缺血坏死新西兰幼兔;对照组(n=12):正常新西兰幼兔。应用Western Blot、RT-qPCR检测方法检测R-spondin1、DKK-1、β-catenin在各组股骨头中的表达情况,比较各相关蛋白及基因在各组中的表达差异,皮尔逊(Pearson)相关性检验分析R-spondin1与DKK-1、β-catenin的相关性。
  2.培养人成骨细胞并传代,激素干预组:分别加入(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)甲基泼尼松龙后,继续培养72h;空白组:不加甲基泼尼松龙,继续培养72h。Western Blot、RT-qPCR检测各组R-spondin1的表达情况,同期检测各组的细胞凋亡率。
  结果:
  1.R-spondin1在幼兔股骨头坏死组与对照组中的蛋白表达量分别为0.179±0.028、0.471±0.104,差异具有统计学意义(t=9.38,P<0.01);β-catenin在幼兔股骨头坏死组与对照组中的蛋白表达量分别为0.195±0.041、0.632±0.129,差异具有统计学意义(t=11.15,P<0.01);Dkk1在幼兔股骨头坏死组与对照组中的蛋白表达量分别为0.713±0.161、0.181±0.029,差异具有统计学意义(t=-11.25,P<0.01);在幼兔股骨头坏死组与对照组中,R-spondin1与β-catenin的蛋白表达呈正相关关系(r=0.89,P<0.01),R-spondin1与Dkk1呈负相关关系(r=-0.945,P<0.05)。
  2.R-spondin1在幼兔股骨头坏死组与对照组中的mRNA表达量分别为0.255±0.039、0.995±0.093,差异具有统计学意义(t=25.33,P<0.01);β-catenin在幼兔股骨头坏死组与对照组中的mRNA表达量分别为0.216±0.036、1.055±0.083,差异具有统计学意义(t=32.49,P<0.01);Dkk1在幼兔股骨头坏死组与对照组中的mRNA表达量分别为3.275±0.073、0.986±0.084,差异具有统计学意义(t=-10.32,P<0.01);在幼兔股骨头坏死组与对照组中,R-spondin1与β-catenin的表达mRNA呈正相关关系(r=0.860,P<0.01),R-spondin1与Dkk1呈负相关关系(r=-0.945, P<0.01)。
  3.空白组与10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L三种不同剂量甲基泼尼松龙干预培养的细胞中R-spondin1蛋白表达量分别为0.622±0.105、0.441±0.125、0.194±0.038、0.112±0.019,R-spondin1蛋白表达量随甲基泼尼松龙剂量增大而降低,差异具有统计学意义(F=76.37,P<0.01);R-spondin1mRNA表达量分别为0.999±0.168,0.897±0.131,0.624±0.101,0.323±0.033,R-spondin1mRNA表达量随甲基泼尼松龙剂量增大而降低,差异具有统计学意义(F=64.79,P<0.01)。
  4.空白组与10-8mol/L组、10-7mol/L组、10-6mol/L组的细胞凋亡率(%)分别为7.41±1.11、13.14±1.92、25.01±5.21、31.99±9.48,细胞凋亡率随干预剂量增大而增大,差异具有统计学意义(F=40.80,P<0.01)。
  结论:
  1.糖皮质激素对人成骨细胞中R-spondin1的表达具有负调控作用,可能通过负调控R-spondin1表达促进人成骨细胞的凋亡。
  2.在糖皮质激素致幼兔股骨头缺血坏死模型中,R-spondin1与β-catenin表达正相关,与DKK-1表达负相关,R-spondin1可能负调控Wnt/β-catenin信号通路,促进成骨细胞的凋亡,导致幼兔激素性股骨头缺血坏死发生。
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